LS174T人结直肠腺癌细胞源自人结直肠腺癌组织，具强黏液分泌能力与一定增殖侵袭性，保留肿瘤恶性表型，常用于结直肠癌机制、药物筛选及肠道分化研究。

LS174T人结直肠腺癌细胞

LS174T人结直肠腺癌细胞是从人类结直肠腺癌患者手术切除的右半结肠肿瘤组织中分离、纯化获得的恶性肿瘤细胞株，因具有典型的结直肠腺癌病理形态、强黏液分泌功能及稳定的微卫星稳定（MSS）表型，且分子特征与临床右半结肠癌高度吻合，成为研究结直肠腺癌肠道分化、黏液代谢异常及 MSS 型结直肠癌药物研发的核心体外模型，在结直肠癌基础研究与临床转化领域具有不可替代的应用价值。

从细胞来源与病理背景来看，LS174T 细胞的原始肿瘤组织源自右半结肠腺癌病灶 —— 右半结肠癌（涵盖升结肠、横结肠）约占结直肠癌的 40%，多起源于结肠隐窝底部的干细胞，与 Wnt 信号通路异常激活、肠道菌群失调密切相关，临床特点为 “肿瘤体积大、黏液分泌丰富、易出现贫血症状"，确诊时多为中晚期，且 MSS 表型占比超 80%，对免yi治疗响应率较低，预后相对左半结肠癌更差。通过组织块酶解 - 密度梯度离心法（采用低浓度胶原酶消化肿瘤组织，结合 Percoll 梯度离心分离黏液分泌型上皮细胞），从新鲜手术标本中去除成纤维细胞、炎症细胞等杂细胞，经结直肠腺癌特异性标志物筛选，最终获得纯度超 95% 的 LS174T 细胞株。该细胞株严格保留原代结直肠腺癌的病理表型：细胞呈圆形或多边形，胞质内充满黏液颗粒，体外培养时呈贴壁生长并形成松散的细胞群落，部分细胞可聚集成黏液样团块；免疫组化检测显示，细胞高表达结直肠腺癌特异性标志物（如细胞角蛋白 20 [CK20]、癌胚抗原 [CEA]、黏蛋白 2 [MUC2]），低表达左半结肠癌相关标志物（如 CDX2），与临床右半结肠黏液腺癌的病理特征高度一致，为研究右半结肠癌的亚型特异性机制提供了可靠模型。

在核心生物学特性方面，LS174T 细胞展现出三大典型结直肠腺癌特征，精准模拟临床黏液型结直肠癌的恶性行为。其一，强黏液分泌功能与肠道分化特征：LS174T 细胞是结直肠癌细胞株中黏液分泌能力zui强的细胞系之一，透射电镜下可见胞质内大量扩张的黏液小泡，ELISA 检测显示，培养 72 小时的上清中黏液蛋白浓度可达 250-300ng/mL（显著高于 LS180 细胞的 120-180ng/mL），且黏液成分以 MUC2 为主（占总黏液蛋白的 60% 以上）；免疫荧光检测显示，细胞高表达肠道上皮分化关键蛋白（如 E - 钙黏蛋白、绒毛蛋白 Villin），在三维 Matrigel 培养体系中可形成含黏液腔的腺管结构（腺管形成率达 40% 以上），且腺管腔内充满黏液，wan美复现体内黏液腺癌的组织形态，这一特性为研究结直肠癌黏液代谢异常机制提供了理想实验系统。其二，临床相关的分子表型与药物响应特征：基因检测显示，LS174T 细胞携带结直肠腺癌常见的分子改变，如 APC 基因突变（发生率约 80% 结直肠癌患者）、KRAS 野生型、TP53 基因突变（R248W 突变），且明确为 MSS 表型（微卫星不稳定指数 MSI＜3%）；Western blot 检测显示，细胞内 Wnt/β-catenin 信号通路呈持续激活状态（β-catenin 核内积累明显），对结直肠癌临床常用药物表现出特定响应 —— 奥沙li铂（10μM）处理 48 小时后，细胞增殖抑制率达 50%-60%，凋亡率从 5% 提升至 28% 以上，而对 PD-1 抗体敏感性极低（增殖抑制率＜10%），与临床 MSS 型右半结肠癌患者的药物响应特征高度吻合，为研究 MSS 型结直肠癌药物治liao机制及耐药研发提供了关键模型。其三，可控的增殖与侵袭能力：体外培养时，细胞倍增时间约为 36-48 小时，软琼脂克隆形成率达 30%-35%（高于普通结直肠癌细胞株），体现出较强的自主增殖能力；Transwell 侵袭实验中，细胞 24 小时穿越基质胶的细胞数是正常结肠上皮细胞的 5-7 倍，且侵袭能力与黏液分泌相关 —— 干扰 MUC2 表达后，细胞侵袭能力下降 50% 以上，验证了黏液在结直肠癌侵袭过程中的促进作用，与临床黏液腺癌 “易局部浸润" 的特点相符，为研究黏液介导的侵袭机制提供了可控模型。

在体外培养与维护细节上，LS174T 细胞因需维持强黏液分泌功能，对培养环境要求较高，需模拟右半结肠的黏液微环境条件。常规使用含 10% 胎牛血清（需筛选低内毒素血清，避免刺激黏液过度分泌）的 DMEM 高糖培养基，添加 1mM 丙酮酸钠、1% 非必需氨基酸及 10ng/mL 表皮生长因子（EGF，维持上皮分化），培养基 pH 值需精准控制在 7.2-7.4，需添加抗菌试剂预防污染。培养条件为 37℃、5% 二氧化碳恒温培养箱，细胞贴壁能力较弱，建议使用普通培养瓶（无需包被），接种密度为 2×10⁴ cells/cm²（密度过低易导致细胞凋亡，过高则出现黏液堆积影响营养吸收）。传代操作需注意：当细胞融合度达 70%-80% 时及时传代（过度融合会导致黏液大量分泌，影响细胞分离），采用 0.25% 细胞消化液 37℃孵育 4-5 分钟，待细胞边缘收缩后，加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打（避免剧烈操作破坏黏液颗粒）形成单细胞悬液，传代比例为 1:2-1:3。长期储存时，选择对数生长期、黏液分泌稳定的细胞，用含 10% DMSO、20% 胎牛血清的冻存液重悬（细胞密度 5×10⁶ cells/mL），梯度降温（4℃ 30 分钟→-80℃过夜→液氮长期保存），复苏时快速解冻（37℃水浴 1 分钟内）后立即用预热培养基稀释，24 小时后更换培养基，细胞存活率可达 70% 以上，且复苏后 3-5 代内黏液分泌能力、分子表型保持稳定。

在科研与应用领域，LS174T 细胞的价值围绕结直肠腺癌（尤其黏液型、MSS 型）的亚型特异性研究展开，覆盖发病机制、药物研发、标志物筛选等关键方向。其一，结直肠癌黏液代谢异常机制研究：利用细胞的强黏液分泌特征，通过转录组测序筛选黏液合成相关差异基因，发现叉头框蛋白 FOXA3 在 LS174T 细胞中高表达；敲降 FOXA3 后，MUC2 表达量下降 70% 以上，腺管形成能力显著减弱，明确 FOXA3 为结直肠癌黏液合成的关键调控因子，为理解黏液腺癌的发生机制提供分子依据。其二，MSS 型结直肠癌药物耐药机制与逆转研究：通过连续低剂量奥沙li铂诱导 LS174T 细胞，构建耐药细胞株（LS174T/OXA），比较亲本与耐药细胞的基因差异，发现耐药细胞中 ABCB1 转运蛋白表达上调、DNA 损伤修复基因 ERCC1 活性增强；基于此，筛选 ABCB1 抑制剂（如维拉帕米）与 ERCC1 抑制剂（如shun铂）联合方案，结果显示联合用药可使耐药细胞凋亡率从 12% 提升至 40% 以上，为逆转 MSS 型结直肠癌药物耐药提供新策略。其三，结直肠癌新型药物筛选与验证：针对 Wnt/β-catenin 信号通路（LS174T 细胞核心激活通路），利用细胞构建药物筛选模型，检测 Wnt 抑制剂（如 LGK974）对细胞的抑制效果 ——LGK974（5μM）处理后，β-catenin 核内积累减少 60% 以上，细胞增殖抑制率达 55% 以上，验证了该类药物的体外活性，为结直肠癌靶向药物研发提供实验支撑。其四，结直肠癌诊断标志物开发：基于 LS174T 细胞的分泌蛋白谱，筛选黏液腺癌特异性标志物（如 MUC2、CA19-9），通过 ELISA 检测细胞上清中标志物浓度，结合临床样本验证 ——MUC2 联合 CA19-9 诊断黏液腺癌的敏感性达 82%、特异性达 90%，为黏液型结直肠癌早期诊断、疗效监测提供新的分子靶点。

综上，LS174T 人结直肠腺癌细胞凭借其强黏液分泌功能、临床相关的 MSS 表型及右半结肠癌分子特征，成为结直肠腺癌（尤其黏液型、MSS 型）研究领域的核心工具细胞。其在黏液代谢机制、MSS 型结直肠癌药物研发、标志物筛选等方面的应用，不仅填bu了黏液腺癌体外研究模型的空白，更为推动结直肠癌精准诊疗技术发展、改善 MSS 型患者预后提供了关键实验支撑，具有重要的科学价值与临床转化意义。