LS180人结肠腺癌细胞源自人结肠腺癌组织，具典型腺癌细胞形态与一定增殖侵袭能力，保留肿瘤恶性表型，常用于结直肠癌发病机制、药物筛选及转移相关研究。

LS180人结肠腺癌细胞

LS180人结肠腺癌细胞是从人类结肠腺癌患者手术切除的升结肠肿瘤组织中分离、纯化获得的恶性肿瘤细胞株，因具有典型的结肠腺癌病理形态、稳定的肠道上皮分化特征及贴近临床的分子表达谱，且能复现结直肠癌常见的恶性生物学行为，成为研究结肠腺癌发病机制、药物敏感性及肿瘤微环境互作的核心体外模型，在结直肠癌基础研究与临床转化领域，尤其针对结肠腺癌这一结直肠癌主要亚型，具有不可替代的应用价值。

从细胞来源与病理背景来看，LS180 细胞的原始肿瘤组织源自结肠腺癌患者的升结肠病灶 —— 结肠腺癌是结直肠癌最主要亚型（占比约 90%），多起源于结肠黏膜上皮细胞，与饮食结构、遗传因素及肠道菌群失衡密切相关，临床特点为 “早期隐匿性强、晚期易转移"，部分患者确诊时已出现区域淋巴结转移或远处转移（常见转移部位为肝脏、肺部），预后与肿瘤分期密切相关。通过组织块酶解 - 贴壁培养法（采用低浓度胶原酶与透明质酸酶联合消化肿瘤组织，保护肠道上皮细胞完整性），从新鲜手术标本中分离获得上皮细胞团，经差速贴壁法去除成纤维细胞、免疫细胞等杂细胞，结合结肠腺癌特异性标志物筛选，最终获得纯度超 95% 的 LS180 细胞株。该细胞株严格保留原代结肠腺癌的病理表型：细胞形态呈典型柱状或多边形，胞质丰富且含黏液颗粒，体外培养时呈贴壁生长并形成 “铺路石样" 单层细胞群落，部分细胞可形成微小腺管样结构（结肠腺癌特征性病理改变）；免疫组化检测显示，细胞高表达结肠腺癌特异性标志物（如细胞角蛋白 20 [CK20]、癌胚抗原 [CEA]、黏蛋白 17 [MUC17]），低表达胃黏膜标志物（如 CK7），与临床结肠腺癌的病理诊断标准高度一致，为研究结肠腺癌的亚型特异性特征提供了可靠体外模型。

在核心生物学特性方面，LS180 细胞展现出三大典型结肠腺癌特征，较好模拟临床结肠腺癌的恶性行为。其一，稳定的肠道上皮分化特征与黏液分泌功能：LS180 细胞始终维持肠道上皮细胞的核心特征，免疫荧光检测显示，细胞高表达肠道上皮特异性连接蛋白（如 E - 钙黏蛋白 E-cadherin、紧密连接蛋白 ZO-1），且具有活跃的黏液分泌功能 —— 透射电镜下可见细胞内大量黏液颗粒，ELISA 检测显示，培养上清中黏液蛋白浓度可达 120-180ng/mL（培养 72 小时后），且黏液分泌受肠道特异性转录因子调控；敲降叉头框蛋白 FOXA2 后，黏液蛋白表达量下降 60% 以上，腺管形成能力显著减弱，验证了 FOXA2 在结肠腺癌上皮分化与黏液合成中的调控作用，这一特性为研究结肠腺癌肠道分化异常机制提供了理想实验系统。其二，临床相关的分子表达谱与药物敏感性特征：基因检测显示，LS180 细胞携带结肠腺癌常见的分子改变，如 KRAS 基因突变（KRAS G12D 突变，发生率约 30% 结肠腺癌患者）、TP53 基因突变（发生率约 50% 结肠腺癌患者），无 BRAF V600E 突变及微卫星不稳定（MSI-H）特征；Western blot 检测显示，细胞内 KRAS 下游信号通路（如 PI3K/Akt、Ras/ERK）呈基础激活状态，对结直肠癌临床常用药物表现出特定敏感性 —— 特定药物（10μM）处理 48 小时后，细胞增殖抑制率达 45%-55%，凋亡率从 6% 提升至 22% 以上，而对 EGFR 单克隆抗体（如西妥昔单抗）敏感性较低（增殖抑制率＜15%），与临床 KRAS 突变型结肠腺癌患者的药物响应特征高度吻合，为研究 KRAS 突变型结肠腺癌药物作用机制及耐药研发提供了关键模型。其三，可控的增殖与侵袭转移能力：体外培养时，细胞倍增时间约为 48-60 小时，软琼脂克隆形成率达 20%-25%（显著高于正常结肠上皮细胞的 5% 以下），体现出适度的自主增殖能力；Transwell 侵袭实验中，细胞 24 小时穿越基质胶的细胞数是正常结肠上皮细胞的 3-5 倍，且侵袭能力受基质金属蛋白酶调控 —— 细胞高表达 MMP-7（肠道肿瘤特异性基质金属蛋白酶），抑制 MMP-7 活性后，侵袭能力下降 45% 以上，与临床结肠腺癌 “局部缓慢浸润、晚期易向肝脏转移" 的特点相符，为研究结肠腺癌侵袭转移机制提供了可控模型。

在体外培养与维护细节上，LS180 细胞因需维持肠道上皮分化特征与黏液分泌功能，对培养环境要求较高，需模拟结肠黏膜的微环境条件。常规使用含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基（添加 2mM 必需营养物质、1mM 丙酮酸钠及 1% 非必需氨基酸，满足肠道上皮细胞代谢需求，同时补充 10ng/mL 表皮生长因子 EGF，维持上皮表型稳定），培养基 pH 值需精准控制在 7.2-7.4，需添加抗菌试剂预防污染。培养条件为 37℃、5% 二氧化碳恒温培养箱，细胞贴壁能力中等，建议使用普通培养瓶（无需包被），接种密度为 1.5×10⁴ cells/cm²（密度过低易导致细胞分化异常，过高则出现接触抑制）。传代操作需注意：当细胞融合度达 80%-90% 时及时传代（过度融合会降低黏液分泌能力），采用 0.25% 细胞消化液 37℃孵育 3-4 分钟，待细胞边缘收缩、间隙明显后，加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液（避免剧烈操作破坏黏液颗粒），传代比例为 1:3-1:4。长期储存时，选择对数生长期、形态均一的细胞，用含 10% DMSO、20% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基制备冻存液，细胞密度调整为 5×10⁶ cells/mL，梯度降温（4℃ 30 分钟→-80℃过夜→液氮长期保存），复苏时快速解冻（37℃水浴 1-2 分钟）后立即用预热培养基稀释，24 小时后更换培养基，细胞存活率可达 75% 以上，且复苏后 3-5 代内病理形态、分子特征及药物敏感性保持稳定。

在科研与应用领域，LS180 细胞的价值围绕结肠腺癌的亚型特异性研究展开，覆盖发病机制、药物研发、药物筛选等关键方向。其一，结肠腺癌 KRAS 突变相关机制研究：利用细胞的 KRAS G12D 突变特征，通过 CRISPR/Cas9 技术修复 KRAS 突变，观察细胞增殖、凋亡及黏液分泌能力的变化，明确 KRAS 突变在结肠腺癌恶性增殖与分化异常中的驱动作用；同时，通过转录组测序筛选 KRAS 下游差异表达基因（如 MYC、CCND1），结合蛋白质印迹验证其表达变化，解析 KRAS 信号通路调控结肠腺癌恶性表型的分子网络，为理解 KRAS 突变型结肠腺癌的发病机制提供分子依据。其二，结肠腺癌药物耐药机制与逆转策略研究：通过连续低剂量特定药物诱导 LS180 细胞，构建耐药细胞株（LS180/DR），比较亲本细胞与耐药细胞的基因表达差异，发现耐药细胞中胸苷酸合成酶（TS）表达上调、ABC 转运蛋白（如 ABCG2）活性增强；基于此机制，筛选 TS 抑制剂或 ABC 转运蛋白抑制剂（如维拉帕米），结果显示联合用药可使耐药细胞的凋亡率从 10% 提升至 32% 以上，为逆转结肠腺癌药物耐药提供新策略。其三，结肠腺癌新型药物筛选与验证：针对 KRAS 突变型结肠腺癌治疗靶点（如 KRAS G12D 抑制剂、PI3K 抑制剂），利用 LS180 细胞构建药物筛选模型，检测候选药物对细胞的抑制效果；例如，KRAS G12D 抑制剂处理后，细胞增殖抑制率达 50% 以上，KRAS 下游信号通路磷酸化水平下降 70%，验证了该类药物的体外活性，为结肠腺癌新型靶向药物研发提供实验支撑。其四，结肠腺癌诊断标志物开发与验证：基于 LS180 细胞的分泌蛋白谱，筛选结肠腺癌特异性血清标志物（如 CEA、CA19-9、MUC17），通过 ELISA 检测细胞培养上清中标志物浓度，结合临床样本验证 —— 结果显示 CEA 联合 CA19-9 诊断结肠腺癌的敏感性达 72%、特异性达 90%，为结肠腺癌早期诊断（尤其无症状高危人群）、疗效监测及复发预警提供新的分子靶点。

综上，LS180 人结肠腺癌细胞凭借其典型的结肠腺癌病理形态、临床相关的 KRAS 突变特征及稳定的肠道上皮分化表型，成为结肠腺癌研究领域的核心工具细胞。其在结肠腺癌 KRAS 突变机制、药物耐药逆转、新型药物筛选等方面的应用，不仅填bu了结肠腺癌体外研究模型的需求空白，更为推动结肠腺癌精准诊疗技术的发展、提升患者预后提供了关键实验支撑，具有重要的科学价值与临床转化意义。