BT-549人乳腺管癌细胞

BT-549人乳腺管癌细胞是源自50岁女性乳腺浸润性导管癌患者的上皮源性恶性肿瘤细胞系，因具有典型的基底样乳腺癌表型、高侵袭性及携带BRCA1基因突变，成为研究三阴性乳腺癌发病机制、hua疗耐药及靶向治疗的重要模型，为攻克这类预后较差的乳腺癌亚型提供了关键实验支撑。

生物学特性上，BT-549细胞呈典型的乳腺管癌细胞形态，贴壁生长且排列紊乱无极性，显微镜下以梭形和多角形为主，细胞边界清晰，胞质丰富呈嗜碱性，部分细胞可见丝状伪足；细胞核大而畸形，核仁明显且数量增多，核质比显著增高，常出现多核、核分裂象异常等恶性特征。其增殖活性旺盛，传代周期约36-48小时，无接触抑制特性，密集生长时易形成侵袭性细胞集落。细胞高表达基底样乳腺癌标志物，如细胞角蛋白5/6（CK5/6）、波形蛋白（Vimentin），核心特征为雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及人表皮生长因子受体2（HER2）均呈阴性，且携带BRCA1基因26号外显子缺失突变，经STR鉴定遗传背景稳定，无微生物污染，体外可稳定维持三阴性乳腺癌的恶性表型。

培养条件需适配乳腺管癌细胞的代谢特性：常规采用含10%-15%胎牛血清的RPMI-1640培养基，添加1%非必需氨基酸以优化生长环境，培养环境控制在37℃、5%CO₂及95%相对湿度。胎牛血清中的成纤维细胞生长因子（FGF）、胰岛素样生长因子（IGF）等成分，可激活细胞增殖信号通路，RPMI-1640培养基的营养配比能满足肿瘤细胞高代谢需求。传代操作时，用无菌PBS轻柔清洗细胞表面2次，加入含0.02%EDTA的0.25%消化液，37℃孵育4-6分钟，待细胞间隙增大后用含血清培养基终止消化，吹打为单细胞悬液按1:3-1:5比例传代，避免剧烈操作破坏细胞的侵袭相关结构。

研究应用中，BT-549细胞是解析三阴性乳腺癌核心科学问题的理想工具。在发病机制研究方面，可利用其BRCA1基因突变特性，探究DNA损伤修复机制缺陷对细胞恶性转化的影响，分析PI3K/Akt、MAPK等信号通路的异常激活机制，为挖掘三阴性乳腺癌特异性诊断靶点提供依据。在耐药研究领域，因该细胞对紫shan醇、shun铂等临床常用hua疗药易产生耐药性，常被用于构建耐药模型，明确ABC转运蛋白过表达、DNA修复基因激活等耐药相关分子机制。

在药物研发领域，该细胞系应用价值突出：体外可通过CCK-8法检测药物IC50值，结合Transwell侵袭实验评估药物对细胞侵袭能力的抑制效果，利用Western blot分析药物对BRCA1相关信号通路蛋白的调控作用；体内构建裸鼠乳腺癌移植瘤模型时，其成瘤率达90%以上，可直观评估药物的体内抑瘤活性及对肿瘤转移的阻断效果。使用时需注意：传代控制在50代以内，每10代通过免疫染色验证CK5/6、Vimentin表达稳定性；培养时避免细胞过度饥饿，防止表型异常；实验中建议设置 luminal型乳腺癌细胞（如MCF-7）作为对照，明确三阴性乳腺癌的特异性特征。作为三阴性乳腺癌研究的经典模型，BT-549细胞为推动乳腺癌精准治疗研究提供了不可替代的实验基础。