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更新时间:2025-11-25
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BxPC-3人原位胰腺腺癌细胞是源自人胰腺导管腺癌原发灶的上皮源性恶性肿瘤细胞系,因保留胰腺腺癌的原位侵袭特征、不表达表皮生长因子受体(EGFR)且体内外致瘤性强,成为研究胰腺癌发病机制、hua疗耐药及靶向治疗的重要模型,为攻克这类预后极差的消化道恶性肿瘤提供了关键实验支撑。
生物学特征上,BxPC-3细胞呈典型的胰腺腺癌细胞形态,贴壁生长且排列紧密紊乱,显微镜下以多边形和短梭形为主,细胞边界不清,胞质丰富呈嗜碱性,部分细胞含细小分泌颗粒;细胞核大而畸形,核仁明显且数量不等,核质比显著增高,常见多核、核固缩及异常核分裂象等恶性标志。其增殖活性旺盛,传代周期约24-36小时,无接触抑制特性,密集生长时形成巢状细胞集落。细胞高表达胰腺腺癌特异性标志物,如癌胚抗原(CEA)、糖类抗原19-9(CA19-9)及细胞角蛋白19(CK19),核心特征为EGFR表达缺失,经STR鉴定遗传背景稳定,无微生物污染,体外可稳定维持原位胰腺腺癌的侵袭性表型。
培养条件需适配胰腺癌细胞的代谢特性:常规采用含10%-15%胎牛血清的RPMI-1640培养基,添加1%非必需氨基酸以优化生长环境,培养环境控制在37℃、5%CO₂及95%相对湿度。胎牛血清中的胰岛素样生长因子(IGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)等成分,可激活细胞增殖信号通路,RPMI-1640培养基的营养配比能满足胰腺癌细胞高代谢需求。传代操作时,用无菌PBS轻柔清洗细胞表面2次,加入含0.02%EDTA的0.25%消化液,37℃孵育3-5分钟,待细胞边缘收缩后用含血清培养基终止消化,吹打为单细胞悬液按1:4-1:6比例传代,避免剧烈操作影响细胞侵袭潜能。
研究应用中,BxPC-3细胞是解析胰腺癌核心科学问题的理想工具。在侵袭机制研究方面,可用于探究EGFR缺失背景下,基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)对胰腺外基质的降解作用,分析Hedgehog、Notch等信号通路在肿瘤原位侵袭中的调控机制,为挖掘胰腺癌侵袭相关靶点提供依据。在耐药研究领域,因该细胞对吉西他滨等临床一线hua疗药具有天然耐药性,常被用于构建耐药模型,明确ABC转运蛋白过表达、自噬活性增强等耐药相关分子机制。
在药物研发领域,该细胞系应用价值突出:体外可通过CCK-8法检测药物IC50值,结合Transwell侵袭实验评估药物对细胞侵袭能力的抑制效果,利用Western blot分析药物对耐药相关蛋白的调控作用;体内构建裸鼠胰腺癌原位移植瘤模型时,其成瘤率达95%以上,可直观评估药物的体内抑瘤活性及对肿瘤转移的阻断效果。使用时需注意:传代控制在50代以内,每10代通过免疫染色验证CA19-9、CK19表达稳定性;培养时避免细胞过度饥饿,防止表型异常;实验中建议设置胰腺导管上皮细胞作为对照,明确肿瘤特异性特征。作为胰腺癌研究的经典模型,BxPC-3细胞为推动胰腺癌精准治疗研究提供了不可替代的实验基础。
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