PC-12(未分化)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞

产品简介：

PC-12(未分化)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞源自大鼠肿瘤，贴壁呈聚集状，具稳定增殖与儿茶酚胺分泌基础，适用于肿瘤增殖凋亡、神经内分泌基础及分化对照研究。

产品型号：

更新时间：2025-10-28

厂商性质：代理商

访问量：514

服务热线

021-34556080

立即咨询

产品分类

PRODUCT CLASSIFICATION

细胞/细菌培养试剂

血清细胞株

产品介绍

PC-12(未分化)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞

PC-12(未分化)大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞是源自大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤组织的贴壁生长细胞系，特指未经任何分化诱导处理的初始培养状态。该状态下细胞既保留肾上腺嗜铬细胞瘤的核心肿瘤特征，又具备神经内分泌细胞的基础功能属性，增殖稳定且分子表型明确，成为肿瘤细胞生物学、肾上腺神经内分泌基础功能及分化起始机制研究的专用模型，同时为后续分化诱导实验提供标准化起始材料。

一、核心生物学特性（未分化专属特征）

（一）来源与功能定位

该细胞株直接分离自大鼠肾上腺髓质的嗜铬细胞瘤组织，肾上腺髓质的组织起源决定其天然具备神经内分泌特性 —— 未分化状态下虽未展现神经元样结构，但已拥有合成、储存儿茶酚胺类物质（如多巴胺）的基础能力。作为肿瘤细胞，其可无限传代且增殖活性稳定，既能用于研究 “肾上腺来源肿瘤细胞的增殖调控机制"，也可作为探索 “神经内分泌细胞分化起始信号" 的理想对象，同时是评估分化诱导因子（如神经生长因子）活性的标准化对照细胞。

（二）形态与增殖特征

未分化状态下，细胞形态呈现鲜明的肾上腺嗜铬细胞瘤细胞初始特征：呈规则的多边形或椭圆形，贴壁生长时因肾上腺细胞的聚集特性，常形成密集的 “细胞团"，细胞间连接紧密，无任何神经突起伸出（这是与分化细胞最直观的区别）；胞质内可见 5-10 个细小的嗜碱性颗粒，这些颗粒是储存儿茶酚胺的核心结构，分布均匀且数量稳定，可通过吉姆萨染色清晰观察；细胞核呈圆形居中，核仁 1-2 个且清晰可见，染色质呈细颗粒状均匀分布，无明显异染色质聚集，符合肿瘤细胞的基础形态特征。

增殖能力表现稳定，倍增时间约 48-72 小时，传代 50 代以内形态与增殖速率无显著变化；软琼脂克隆形成率达 35%-45%，显著高于分化后细胞（<10%），克隆形态规则、边界清晰，反映其作为肾上腺来源肿瘤细胞的强恶性增殖潜能；细胞周期分布稳定，G1 期占比 50%-55%、S 期 30%-35%、G2/M 期 15%-20%，可通过流式细胞术精准检测，为肾上腺肿瘤细胞增殖相关研究提供可靠数据支撑。

（三）分子与功能特征

分子层面，未分化细胞的专属表型与肾上腺嗜铬细胞瘤特性高度匹配：

肿瘤与肾上腺细胞标志物：高表达嗜铬粒蛋白 A（CgA）、突触素（Synaptophysin）等肾上腺嗜铬细胞瘤特异性标志物，通过免疫荧光或 Western blot 可稳定检测，精准验证其细胞身份；

神经内分泌基础分子：表达神经生长因子受体（TrkA、p75NTR），但表达量处于基础水平（仅为分化诱导后表达量的 30%-40%），为后续接受分化信号、启动分化程序奠定分子基础；儿茶酚胺合成通路的核心酶（如多巴胺 β- 羟化酶 DBH）呈低水平基础表达，可分泌少量儿茶酚胺类物质（约 0.5-1ng/10⁶细胞 / 24h），通过高效液相色谱（HPLC）可精准定量，体现肾上腺嗜铬细胞的基础分泌功能；

神经元标志物缺失：神经元特异性标志物（如微管相关蛋白 MAP2、神经丝蛋白 NF-200）表达量极低，几乎检测不到，这是判断细胞处于未分化状态的关键分子指标，也反映其尚未启动向神经元样细胞转型的程序。

功能上，未分化细胞的响应特性与细胞状态高度适配：对表皮生长因子（EGF）、胰岛素样生长因子 - 1（IGF-1）等促肿瘤因子响应显著，加入后 24-48 小时增殖速率可提升 20%-30%，符合肾上腺肿瘤细胞的增殖调控规律；对神经毒性物质（如 6 - 羟基多巴胺）耐受性较高，相同浓度处理下凋亡率仅为分化细胞的 1/5-1/3，无法模拟神经元损伤反应，因此不适用于神经毒性相关研究，需严格限定应用场景。

二、体外培养与维护条件（未分化状态维持关键）

（一）基础培养条件

为维持未分化状态及肾上腺嗜铬细胞瘤细胞的特性，需采用专用培养体系：基础培养基选用RPMI-1640 培养基，该培养基的营养成分可匹配肾上腺细胞的代谢需求；添加 10% 马血清、5% 胎牛血清的双血清组合（高浓度血清是抑制细胞自发分化、维持肿瘤增殖活性的核心条件，血清比例不可随意降低），同时加入 1% 抗菌试剂预防细菌污染。

培养环境需严格控制：温度 37℃（±0.5℃），温度波动超过 ±1℃会导致细胞增殖停滞，甚至触发少量细胞自发分化；CO₂浓度 5%（±0.2%），浓度过低会导致培养基 pH 升高，细胞易出现胞质空泡，影响肾上腺细胞的分泌功能；湿度维持 95%，pH 稳定在 7.2-7.4，渗透压 280-320mOsm/kg，需通过培养箱自带的温湿度、CO₂传感器实时监控，确保环境参数稳定。

（二）传代与状态监控操作

传代是维持未分化状态的核心环节，需严格把控时机与操作：当细胞汇合度达 80%-90% 时必须及时传代，若超过 95%，细胞密度过高会触发肾上腺细胞的自发分化程序，表现为局部细胞出现短小微突起；传代比例控制在 1:3-1:4，比例过高会导致细胞密度过低，增殖缓慢；比例过低则易快速达到高汇合度，增加自发分化风险。

传代操作步骤：

弃去旧培养基，用无菌 PBS 轻柔冲洗细胞表面 2 次，彻di去除残留血清（血清残留会影响解离效果）；

加入含 0.02% EDTA 的细胞解离液（避免使用高浓度解离试剂，防止损伤细胞表面受体），37℃孵育 2-3 分钟，显微镜下观察到细胞边缘收缩、细胞间隙增大即可终止；

加入 3-5 倍体积的基础培养基，轻柔吹打 10-15 次制成单细胞悬液（避免剧烈吹打导致细胞破碎，影响后续增殖）；

按 1:3-1:4 比例接种至新培养瓶，补充新鲜基础培养基，置于培养箱中继续培养。

状态监控需每日进行：通过倒置显微镜观察细胞形态，确保无神经突起、细胞团聚集状态正常；每周通过免疫荧光检测 MAP2 表达（未分化细胞 MAP2 应为阴性），每月检测软琼脂克隆形成率，每季度检测儿茶酚胺分泌量，确保未分化表型及肾上腺嗜铬细胞瘤细胞特性稳定。

（三）冻存与复苏（未分化状态保留）

冻存对象仅限未分化细胞，操作需确保复苏后仍维持细胞特性：

冻存液配置：含 10% 二甲基亚砜（DMSO）、20% 胎牛血清、10% 马血清的 RPMI-1640 培养基，高血清比例可减少冻存对细胞的损伤，同时维持肾上腺细胞的基础属性；

冻存步骤：选择对数生长期的未分化细胞，制成浓度为 1×10⁶-2×10⁶ cells/mL 的单细胞悬液，分装后采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存），避免直接冷冻导致细胞破裂；

复苏步骤：从液氮取出冻存管后，快速放入 37℃水浴中 1-2 分钟wan全解冻，立即加入 10 倍体积预热的基础培养基稀释，1000×g 离心 5 分钟去除 DMSO（残留 DMSO 会增加细胞毒性，导致复苏后凋亡率升高），重悬后接种至培养瓶。

复苏后需观察 72 小时：复苏存活率通常可达 75% 以上，24 小时内更换一次培养基去除死亡细胞碎片，48-72 小时后观察细胞形态，确认无异常突起、增殖速率正常，且通过免疫荧光检测 CgA 表达验证肾上腺细胞特性后，再用于后续实验。

三、主要实验应用场景（未分化状态专属）

（一）肾上腺来源肿瘤细胞增殖与凋亡机制研究

未分化细胞因源自肾上腺髓质、肿瘤特征明确，是研究肾上腺肿瘤增殖调控的理想模型：

增殖信号通路研究：用不同浓度 EGF、IGF-1 处理细胞，通过 CCK-8 实验检测细胞活力，Western blot 检测 PI3K/AKT、Ras/MAPK 通路磷酸化水平，解析促增殖因子对肾上腺肿瘤细胞的作用机制；

凋亡诱导机制研究：用抗肿瘤活性物质（如肾上腺肿瘤相关信号通路抑制剂、植物提取物）处理细胞，通过流式细胞术检测凋亡率，Hoechst 染色观察细胞核形态变化，Western blot 检测凋亡相关蛋白（Bax、Bcl-2、Caspase-3）表达，明确肾上腺肿瘤细胞的凋亡诱导通路；

细胞周期调控研究：通过流式细胞术分析不同处理下细胞周期分布变化，检测周期调控蛋白（Cyclin D1、p21）表达，探索肾上腺肿瘤细胞周期紊乱的分子机制。

（二）肾上腺神经内分泌基础功能研究

依托未分化细胞的肾上腺起源与神经内分泌基础属性，可开展专属研究：

儿茶酚胺合成基础调控：检测细胞在基础状态下儿茶酚胺的合成速率，研究不同营养条件（如葡萄糖浓度、氨基酸组成）对儿茶酚胺分泌的影响，通过实时荧光定量 PCR 检测合成通路相关基因（DBH 等）的基础表达水平，解析肾上腺细胞基础分泌功能的调控规律；

神经生长因子受体基础功能：通过受体结合实验检测 TrkA 受体的基础结合活性，采用免疫荧光定位技术研究受体在未分化状态下的亚细胞定位，为后续探索 “分化信号如何激活肾上腺细胞受体、启动分化程序" 提供对照数据。

（三）分化诱导实验的标准化对照与起始材料

未分化细胞是肾上腺嗜铬细胞瘤细胞分化研究的核心工具：

分化诱导因子筛选：将候选因子（如不同批次的神经生长因子 NGF、脑源性神经营养因子 BDNF）分别作用于未分化细胞，以未处理的未分化细胞为对照，观察神经突起形成率、神经元标志物（MAP2、NF-200）表达变化，评估因子对肾上腺来源细胞的分化诱导活性；

分化机制研究的起始材料：在探索 “肾上腺嗜铬细胞瘤细胞向神经元样细胞分化的信号通路" 研究中，未分化细胞作为标准化起始状态，可精准对比诱导前后的分子变化（如 TrkA 通路激活、儿茶酚胺合成酶表达调整、神经元标志物上调），明确分化关键调控节点。

四、实验应用注意事项（未分化状态专属）

未分化状态维持关键：严禁在培养过程中降低血清浓度（如低于 10% 马血清 + 5% 胎牛血清），低血清环境会触发肾上腺细胞的自发分化程序，导致实验材料失效；传代时需严格控制汇合度，超过 95% 未传代的细胞即使后续恢复正常培养，也可能残留少量自发分化细胞，影响实验重复性。

污染防控特殊要求：未分化细胞对支原体污染更敏感，污染后会导致儿茶酚胺分泌异常、增殖速率下降，每传代 2 次需通过 PCR 法检测支原体；同时需严防成纤维细胞污染（肾上腺组织分离过程中易混入），传代时可采用差速贴壁法（接种后 1 小时换液，去除贴壁更快的成纤维细胞），确保细胞纯度≥98%。

实验设计中的对照设置：所有涉及该细胞的实验需设置 “未处理未分化细胞" 作为空白对照，同时建议设置 “标准 NGF 诱导分化组" 作为阳性对照，排除培养环境、操作步骤对结果的干扰；若与分化细胞或其他来源肿瘤细胞对比实验，需确保未分化细胞与对照细胞的初始培养条件一致（如相同批次血清、相同培养箱环境），减少系统误差，保证结果的可靠性与可比性。

上一个：SF9昆虫卵巢细胞