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SF9昆虫卵巢细胞
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SF9昆虫卵巢细胞源自草地贪夜蛾卵巢,可悬浮或贴壁生长,易被杆状病毒感染,是重组蛋白表达、病毒学研究及生物农药研发的常用昆虫细胞模型。

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更新时间:2025-10-22

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SF9昆虫卵巢细胞

SF9昆虫卵巢细胞是昆虫细胞生物学与生物工程领域的经典工具细胞,其独特的生长特性与病毒易感性,使其成为重组蛋白表达、病毒学研究及生物农药研发的核心模型。该细胞系源自草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)的卵巢组织,于 20 世纪 80 年代经体外原代培养与克隆筛选建立 —— 草地贪夜蛾作为一种广泛分布的农业害虫,其卵巢细胞具有强增殖能力与分化潜能,而 SF9 细胞作为该物种卵巢细胞的克隆亚系,不仅保留了昆虫细胞的基本生物学特征,还具备悬浮与贴壁双模式生长、易被杆状病毒感染等特殊属性,为后续科研应用奠定了基础。

从生物学特性来看,SF9 细胞呈现典型的昆虫卵巢细胞形态与生长特征。在光学显微镜下观察,未贴壁的悬浮细胞呈圆形或椭圆形,直径约 12-18μm,胞质均匀透明,细胞核呈圆形且位于细胞中央,核仁清晰可见;若培养环境提供适宜附着表面(如经包被的培养瓶),细胞可贴壁生长,贴壁后呈梭形或多边形,排列松散且无明显接触抑制,这一 “双生长模式" 使其既能适应大规模悬浮培养(用于工业化生产),也能满足小规模贴壁实验(如病毒滴度测定)的需求。在生长特性方面,SF9 细胞的最适培养温度为 27-28℃,无需 CO₂培养环境(区别于哺乳动物细胞),其生长速度受培养基营养浓度影响较大,在优质昆虫细胞培养基(如 Grace 培养基、SF900 系列培养基)中,倍增时间约为 24-36 小时,对数生长期细胞密度可达到 1×10⁶-3×10⁶个 /mL,且细胞活力能长期维持在 90% 以上,具备高效增殖的优势。

在培养操作与质量控制层面,SF9 细胞的培养体系与哺乳动物细胞差异显著,需遵循专属操作规范。培养基选择上,常规使用添加 10%-15% 胎牛血清(或昆虫细胞专用血清替代品)的 Grace 培养基或无血清 SF900 III 培养基 —— 无血清培养基可避免血清中杂蛋白对后续重组蛋白纯化的干扰,更适用于工业化生产;若需促进细胞贴壁,可使用多聚赖氨酸或明胶包被培养容器。培养操作时,悬浮培养需采用摇瓶培养体系,摇床转速控制在 100-120rpm,确保细胞均匀悬浮且获得充足氧气;贴壁培养则可使用常规培养瓶,置于 27℃恒温培养箱中即可,无需控温 CO₂。传代时,悬浮细胞可直接按 1:3-1:5 的比例稀释至新鲜培养基中;贴壁细胞需用昆虫细胞专用消化液(如含 EDTA 的胰dan白酶溶液)处理,避免过度消化损伤细胞。质量控制方面,需定期通过台盼蓝染色法检测细胞活力,确保活力维持在 85% 以上;通过 PCR 或荧光染色法检测细胞是否存在支原体、细菌或真菌污染(昆虫细胞易受杆状病毒外的微生物感染,需严格防控);同时需验证细胞对杆状病毒的敏感性,确保其符合实验或生产要求。

在科研应用领域,SF9 细胞凭借其独特优势,在多个方向发挥不可替代的作用。最核心的应用是重组蛋白表达 —— 基于 SF9 细胞与杆状病毒的表达系统(Baculovirus-Insect Cell Expression System,BICS),是目前应用zui广泛的真核表达系统之一:科研人员将目标蛋白基因插入杆状病毒载体,感染 SF9 细胞后,利用病毒复制过程驱动外源基因高效表达,该系统可实现蛋白的正确折叠、糖基化修饰(虽与哺乳动物修饰存在差异,但优于原核系统),且表达量高(可达细胞总蛋白的 10%-50%),适用于抗体、酶、疫苗抗原等多种蛋白的制备,广泛应用于基础研究与生物医药生产。在病毒学研究中,SF9 细胞是杆状病毒(如苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒 AcMNPV)研究的理想模型,可用于病毒复制机制探索(如病毒基因对宿主细胞周期的调控)、病毒滴度测定(通过空斑实验计数)及病毒载体改造(优化外源基因表达效率);同时,因草地贪夜蛾是农业害虫,SF9 细胞也可用于研究昆虫病毒(如杆状病毒)对害虫的致病性,为生物农药研发提供理论依据。在生物农药研发领域,SF9 细胞可用于杆状病毒杀虫剂的生产 —— 通过大规模培养 SF9 细胞,感染杆状病毒后收集病毒颗粒,制成生物农药,该类农药对害虫特异性强、对环境友好,是绿色农业的重要技术支撑;此外,还可利用 SF9 细胞筛选新型昆虫病毒或改造病毒基因组,提高生物农药的杀虫效率与稳定性。

SF9 细胞的应用优势显著,但也存在一定局限。优势在于:无血清培养适应性强,便于工业化放大;杆状病毒表达系统高效且能实现蛋白修饰;培养无需 CO₂,成本低于哺乳动物细胞。局限则包括:蛋白糖基化修饰与哺乳动物存在差异,可能影响部分医用蛋白的活性;细胞培养


 

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