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更新时间:2025-03-18
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核酸检测法:部分试剂盒采用聚合酶链式反应(PCR)技术。其原理是利用引物特异性地结合 HPV 的特定核酸序列,在 DNA 聚合酶的作用下,对目标核酸进行扩增。通过荧光标记的探针或其他检测手段,实时监测扩增过程中荧光信号的变化,从而判断样本中是否存在 HPV 及其含量。不同型别的 HPV 具有du特的核酸序列,可通过设计相应的引物和探针实现分型检测。
免疫检测法:采用酶联免疫吸附测定(ELISA)技术,以双抗体夹心法为例。试剂盒中的微孔板预先包被有针对 HPV 抗原的特异性抗体。当加入待测样本时,若样本中存在 HPV 抗原,其会与包被抗体特异性结合。随后加入酶标记的抗 HPV 抗原抗体,该抗体与已结合在包被抗体上的 HPV 抗原进一步结合,形成 “包被抗体 - HPV 抗原 - 酶标抗体" 复合物。加入底物溶液后,在酶的催化作用下,底物发生显色反应,通过酶标仪在特定波长下测定吸光度(OD 值),并与试剂盒提供的临界值比较,判断样本中是否存在 HPV 抗原。
样本采集:对于核酸检测,常用的样本有宫颈脱落细胞、阴道分泌物等。使用专用采样刷在宫颈口或阴道壁采集细胞样本,然后将采样刷放入保存液中送检。对于免疫检测,多采集血清或血浆样本,采集方法与常规血液样本采集相同,血清需待血液自然凝固后离心获取,血浆则在采血时加入合适抗凝剂后离心分离。
试剂盒准备:从冰箱取出试剂盒,在室温(20℃ - 25℃)平衡 30 分钟,确保试剂盒内各试剂温度均匀。同时准备好移液器、吸头、PCR 仪(核酸检测)或酶标仪(免疫检测)等实验器材,并检查其性能是否正常。
加样与反应:根据试剂盒说明书,将标准品(如有)、待测样本及空白对照按规定体积准确加入相应反应体系中,如 PCR 反应管或微孔板孔中。按照设定的温度和时间进行孵育或扩增反应。
结果检测与判定:核酸检测通过 PCR 仪自带的分析软件读取荧光信号,根据设定的阈值和标准曲线判断样本中 HPV 的类型和含量。免疫检测则使用酶标仪在规定波长下测定各孔 OD 值,将样本的 OD 值与试剂盒提供的临界值比较,判定样本中是否存在 HPV 抗原。
高灵敏度:能够检测到极低含量的 HPV,无论是核酸检测还是免疫检测,都可发现早期感染或低病毒载量的情况。
特异性强:针对不同型别的 HPV,核酸检测的引物和免疫检测的抗体具有高度特异性,能准确区分不同型别的 HPV,减少误诊和漏诊。
操作简便:试剂盒的操作流程相对标准化,经过简单培训的人员即可进行操作,适合各级医疗机构和实验室使用。
宫颈癌筛查:HPV 感染是宫颈癌的主要病因,通过检测 HPV,可早期发现潜在的宫颈癌风险,为宫颈癌的预防和早期治疗提供依据。
HPV 相关疾病诊断:用于诊断尖锐湿疣、肛men癌等 HPV 相关疾病,辅助医生制定治疗方案。
流行病学研究:在人群中进行 HPV 检测,了解 HPV 的感染率、型别分布等流行病学特征,为公共卫生政策的制定提供数据支持。
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