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更新时间:2025-03-18
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样本采集:依据检测需求,采集适量人血清或血浆样本。血清样本需血液自然凝固后离心获取;血浆样本则在采血时加入合适抗凝剂后离心分离。组织匀浆样本需将新鲜组织洗净、称重后,按比例加入匀浆介质,经匀浆、离心等步骤制备。采集后的样本妥善保存,避免反复冻融。
试剂盒准备:从冰箱取出试剂盒,在室温(20℃ - 25℃)平衡 30 分钟,确保试剂盒内各试剂温度一致。同时准备好移液器、比色杯(酶动力学法)或反应杯(免疫比浊法)、分光光度计(酶动力学法)或生化分析仪(免疫比浊法)等实验器材,保证其性能良好。
加样:将样本、底物缓冲液、辅酶等试剂按试剂盒说明书规定体积准确加入反应体系中,迅速混匀,启动反应。对于免疫比浊法,还需加入适量抗体试剂。
反应与检测:酶动力学法将反应体系置于分光光度计中,在 340nm 波长下,每隔一定时间读取吸光度,记录吸光度随时间的变化值。免疫比浊法则将反应杯放入生化分析仪,仪器自动检测反应体系浊度变化。
结果计算:酶动力学法根据吸光度变化速率,结合试剂盒提供的标准曲线及计算公式,计算出样本中 LDH 活性。免疫比浊法由生化分析仪根据预设程序,通过检测浊度变化,自动计算并输出样本中 LDH 含量。
高灵敏度:能够检测到低水平的 LDH 活性变化,满足对早期疾病诊断及病情监测的需求。
特异性强:酶动力学法基于 LDH 特定催化反应,免疫比浊法采用特异性抗体,二者均能有效避免其他物质干扰,准确测定 LDH 含量。
操作简便:试剂盒操作流程相对标准化,便于实验室人员掌握,适合各级医疗机构及科研实验室使用。
心脏疾病诊断:急性心肌梗死发生时,血清 LDH 水平会在发病后 12 - 24 小时开始升高,48 - 72 小时达到峰值,可辅助诊断心肌梗死并监测病情发展。
肝脏疾病诊断:肝炎、肝硬化等肝脏疾病患者血清 LDH 活性常升高,可作为肝脏功能评估及疾病诊断的参考指标。
恶性肿瘤诊断:多种恶性肿瘤如白血病、淋巴瘤等患者体内 LDH 水平会异常升高,可用于肿瘤筛查、病情监测及预后评估。
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