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更新时间:2025-03-18
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样本采集:采集适量人静脉血,室温静置待血液自然凝固后,离心分离获取血清样本。采集过程需严格遵守无菌操作规范,避免样本污染,采集后的血清样本若不能及时检测,应妥善保存于 - 20℃冰箱,防止补体活性丧失。
试剂盒准备:从冰箱取出试剂盒,室温(20℃ - 25℃)平衡 30 分钟,使试剂盒内各试剂温度均匀。同时准备好移液器、试管、离心机、酶标仪等实验器材,并检查其性能是否正常。
加样与反应:按照试剂盒说明书,依次将标准品、待测血清样本以及试剂盒中的其他试剂(如致敏 SRBC 悬液、缓冲液等)加入试管中,轻轻混匀,然后将试管置于 37℃恒温水浴箱中孵育一定时间,让补体激活并引发溶血反应。
离心与检测:孵育结束后,将试管离心,使未溶血的红细胞沉淀,取上清液转移至酶标板相应孔中。使用酶标仪在规定波长下测定各孔上清液的吸光度值。
结果计算:根据标准品的吸光度值绘制标准曲线,再依据待测样本的吸光度值,从标准曲线上查得对应的补体活性数值,从而完成对样本中溶血补体活性的定量检测。
高灵敏度:能够检测到血清中极微量补体活性的变化,有助于早期发现免疫系统异常及相关疾病的潜在风险。
特异性强:基于特定的致敏 SRBC 与补体的反应体系,有效避免其他物质干扰,精准检测补体活性,确保检测结果的准确性。
稳定性好:试剂盒在规定保存条件下,各试剂性能稳定,多次检测同一批样本,结果重复性良好,为科研及临床诊断提供可靠的数据支持。
自身免疫性疾病诊断:在系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等自身免疫性疾病中,患者血清补体水平常出现异常变化。通过检测溶血补体活性,可辅助疾病诊断、病情监测及治疗效果评估。例如,系统性红斑狼疮活动期,补体 C3、C4 水平常降低,溶血补体活性也随之下降。
感染性疾病研究:某些病原体感染人体后,会影响补体系统的激活与调节。检测溶血补体活性有助于了解感染过程中机体免疫反应状态,为感染性疾病的诊疗提供参考。
免疫学基础研究:在探究补体系统的生理功能、作用机制以及与其他免疫细胞和分子的相互关系等方面,人溶血补体ELISA是重要的实验工具,推动免疫学基础研究的深入发展。
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