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更新时间:2025-04-09
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样本准备:血清样本需在空腹状态下采集,采集后静置使其自然凝固,随后离心获取上层血清;血浆样本则依据不同抗凝剂要求采集,离心处理后备用;组织匀浆要按照规范方法制备,确保样本的均一性与稳定性。
试剂准备:将试剂盒从冰箱取出,室温平衡 30 分钟。按说明书要求,用蒸馏水将浓缩洗涤液稀释成工作洗涤液。
加样:在酶标板上准确设置标准品孔、空白孔与待测样本孔。标准品孔加入不同浓度的标准品,空白孔不加任何试剂,待测样本孔加入适量处理好的样本。
温育与洗涤:加样完毕后,封板,37℃温育相应时间。温育结束,弃去孔内液体,用洗涤液反复洗涤酶标板,去除未结合物质。
后续反应与检测:依次加入酶标抗体、显色底物,按规定时间温育与显色,最后加入终止液终止反应。使用酶标仪在 450nm 波长下测定各孔 OD 值,依据标准曲线计算样本中可替丁浓度。
试剂盒使用前必须充分平衡至室温,防止温度差异影响检测结果。
样本采集与处理过程务必严格遵循规范,避免溶血、脂血等异常样本干扰检测。
洗涤过程要彻di,确保去除杂质,但也要防止过度洗涤导致已结合物质脱落。
加样时要准确、快速,尽量减少各孔间加样时间差异,保证实验条件的一致性。
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