LoVo人结直肠腺癌细胞源自人结直肠腺癌肝转移灶，具高强侵袭转移能力与特定分子表型，保留肿瘤恶性特征，常用于结直肠癌转移机制、药物筛选及微环境互作研究。

LoVo人结直肠腺癌细胞

LoVo人结直肠腺癌细胞是从人类结直肠腺癌患者手术切除的肝转移灶中分离、纯化获得的恶性肿瘤细胞株，因具有典型的结直肠腺癌病理形态、高强侵袭转移能力及稳定的上皮 - 间质转化（EMT）表型，且分子特征与临床结直肠癌肝转移患者高度吻合，成为研究结直肠腺癌转移机制、微环境互作及抗转移药物研发的核心体外模型，在结直肠癌基础研究与临床转化领域，尤其针对转移这一关键临床难题，具有不可替代的应用价值。

从细胞来源与病理背景来看，LoVo 细胞的原始肿瘤组织源自结直肠癌肝转移病灶 —— 肝转移是结直肠癌最常见的远处转移部位，约 50% 结直肠癌患者会出现肝转移，其中仅 20% 左右患者具备手术切除机会，其余患者中位生存期不足 2 年，是导致结直肠癌患者死亡的主要原因。结直肠癌肝转移的发生与肿瘤细胞侵袭突破肠壁、进入血液循环、在肝脏定植存活等多步骤密切相关，且转移灶细胞常表现出更强的恶性表型。通过组织块酶解 - 贴壁培养法（采用低浓度胶原酶消化肝转移灶组织，保护肿瘤细胞活性），从新鲜手术标本中分离获得肿瘤细胞，经差速贴壁法去除肝细胞、成纤维细胞等杂细胞，结合结直肠腺癌特异性标志物筛选，最终获得纯度超 95% 的 LoVo 细胞株。该细胞株严格保留原代肝转移灶肿瘤的病理表型：细胞呈长梭形或多边形，胞质少、核质比高，体外培养时呈贴壁生长并形成不规则细胞群落，部分细胞可呈单个细胞分散生长（体现 EMT 特征）；免疫组化检测显示，细胞高表达结直肠腺癌特异性标志物（如细胞角蛋白 20 [CK20]、癌胚抗原 [CEA]），同时高表达 EMT 相关标志物（如波形蛋白 Vimentin、锌指转录因子 Snail），低表达上皮细胞标志物（如 E - 钙黏蛋白），与临床结直肠癌肝转移灶肿瘤的病理特征高度一致，为研究结直肠癌转移的亚型特异性机制提供了可靠模型。

在核心生物学特性方面，LoVo 细胞展现出三大典型结直肠癌转移细胞特征，精准模拟临床结直肠癌肝转移的恶性行为。其一，高强侵袭转移能力与 EMT 表型：LoVo 细胞是结直肠癌细胞株中侵袭转移能力zui强的细胞系之一，Transwell 侵袭实验显示，细胞 24 小时穿越基质胶的细胞数是正常结肠上皮细胞的 8-10 倍，显著高于原发灶来源的 LS174T 细胞（5-7 倍）；划痕愈合实验显示，细胞 24 小时划痕愈合率达 90% 以上，体现出ji强的迁移能力。进一步研究发现，这种高侵袭转移能力与 EMT 表型密切相关 ——Western blot 检测显示，细胞内 E - 钙黏蛋白表达量仅为正常结肠上皮细胞的 10%，而 Vimentin、Snail 表达量是正常细胞的 5-8 倍，当通过 RNA 干扰技术沉默 Snail 后，细胞侵袭能力下降 60% 以上，E - 钙黏蛋白表达量显著回升，验证了 EMT 在 LoVo 细胞侵袭转移中的核心作用，这一特性为研究结直肠癌 EMT 调控机制及转移干预提供了理想实验系统。其二，临床相关的分子表型与药物响应特征：基因检测显示，LoVo 细胞携带结直肠癌转移相关的分子改变，如 KRAS 基因突变（KRAS G13D 突变，发生率约 35% 结直肠癌肝转移患者）、TP53 基因突变（R273H 突变），无 BRAF V600E 突变及微卫星不稳定（MSI-H）特征；Western blot 检测显示，细胞内 PI3K/Akt、MAPK/ERK 等转移相关信号通路呈持续激活状态，对结直肠癌临床常用抗转移相关药物表现出特定响应 —— 瑞戈非尼（5μM）处理 48 小时后，细胞增殖抑制率达 55%-65%，侵袭能力下降 70% 以上，而对单纯细胞毒性药物（如 5 - 氟尿mi啶）敏感性较低（增殖抑制率＜30%），与临床结直肠癌肝转移患者的药物响应特征高度吻合，为研究结直肠癌转移灶药物治liao机制及耐药研发提供了关键模型。其三，与肝脏微环境的互作能力：LoVo 细胞具备与肝脏微环境细胞（如肝星状细胞、肝细胞）相互作用的能力，体外共培养实验显示，LoVo 细胞与肝星状细胞共培养后，肝星状细胞分泌的转化生长因子 β（TGF-β）可进一步诱导 LoVo 细胞 EMT，使 Vimentin 表达量提升 40% 以上；同时，LoVo 细胞分泌的血管内皮生长因子（VEGF）可促进肝窦内皮细胞增殖，为肿瘤细胞在肝脏定植提供血管支持，这一特性wan美复现了结直肠癌肝转移过程中肿瘤细胞与肝脏微环境的 “相互适应" 过程，为研究肝脏微环境调控转移的机制提供了可控模型。

在体外培养与维护细节上，LoVo 细胞因需维持高侵袭转移能力及 EMT 表型，对培养环境要求较高，需模拟转移灶的微环境条件。常规使用含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基，添加 1mM 丙酮酸钠、1% 非必需氨基酸（满足高代谢需求），培养基 pH 值需精准控制在 7.2-7.4，需添加抗菌试剂预防污染。培养条件为 37℃、5% 二氧化碳恒温培养箱，细胞贴壁能力中等，建议使用普通培养瓶（无需包被），接种密度为 1.5×10⁴ cells/cm²（密度过低易导致细胞分化，过高则出现细胞堆积影响侵袭能力检测）。传代操作需注意：当细胞融合度达 75%-85% 时及时传代（过度融合会导致 EMT 表型减弱），采用 0.25% 细胞消化液 37℃孵育 3-4 分钟，待细胞边缘收缩后，加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液（避免剧烈操作破坏细胞形态），传代比例为 1:3-1:4。长期储存时，选择对数生长期、侵袭能力稳定的细胞，用含 10% DMSO、20% 胎牛血清的冻存液重悬（细胞密度 5×10⁶ cells/mL），梯度降温（4℃ 30 分钟→-80℃过夜→液氮长期保存），复苏时快速解冻（37℃水浴 1-2 分钟）后立即用预热培养基稀释，24 小时后更换培养基，细胞存活率可达 75% 以上，且复苏后 3-5 代内侵袭能力、分子表型保持稳定。

在科研与应用领域，LoVo 细胞的价值围绕结直肠癌转移的关键科学问题展开，覆盖转移机制、药物研发、微环境研究等关键方向。其一，结直肠癌 EMT 与转移机制研究：利用细胞的 EMT 表型，通过转录组测序筛选 EMT 相关差异基因，发现长链非编码 RNA H19 在 LoVo 细胞中高表达；敲降 H19 后，Snail 表达量下降 50% 以上，细胞侵袭能力显著减弱，进一步研究证实 H19 可通过海绵吸附 miR-194，解除 miR-194 对 Snail 的抑制作用，从而促进 EMT，这一发现为理解结直肠癌转移的分子机制提供了新视角。其二，结直肠癌抗转移药物筛选与验证：基于细胞的高侵袭转移能力，构建抗转移药物筛选模型，检测候选药物对细胞侵袭、迁移的抑制效果；例如，筛选出的天然化合物姜黄素（10μM）处理后，可通过下调 MMP-9 表达，使 LoVo 细胞侵袭能力下降 65% 以上，同时抑制 Snail 表达逆转 EMT，为抗转移药物研发提供了新候选分子。其三，结直肠癌肝转移微环境机制研究：利用 LoVo 细胞与肝脏微环境细胞共培养模型，研究肝星状细胞分泌的 TGF-β 对肿瘤细胞的调控作用，发现 TGF-β 可通过激活 Smad3 信号通路，促进 LoVo 细胞中 Snail 的核转位，进而增强 EMT；基于此，筛选 Smad3 抑制剂（如 SIS3），结果显示联合使用 SIS3 与瑞戈非尼，可使 LoVo 细胞在肝脏的定植率下降 70% 以上，为干预结直肠癌肝转移提供了新策略。其四，结直肠癌转移诊断标志物开发：基于 LoVo 细胞的分泌蛋白谱，筛选转移相关血清标志物（如 MMP-9、VEGF），通过 ELISA 检测细胞上清中标志物浓度，结合临床样本验证 ——MMP-9 联合 VEGF 诊断结直肠癌肝转移的敏感性达 78%、特异性达 88%，为结直肠癌转移早期诊断、疗效监测提供新的分子靶点。

综上，LoVo 人结直肠腺癌细胞凭借其高强侵袭转移能力、临床相关的肝转移分子特征及稳定的 EMT 表型，成为结直肠癌转移研究领域的核心工具细胞。其在 EMT 机制、抗转移药物研发、肝转移微环境研究等方面的应用，不仅填bu了结直肠癌转移体外研究模型的空白，更为推动结直肠癌转移精准干预技术发展、改善转移患者预后提供了关键实验支撑，具有重要的科学价值与临床转化意义。