LTEP-a-2人肺腺癌细胞源自人肺腺癌组织，具典型腺癌细胞形态与一定增殖侵袭能力，保留肿瘤恶性表型，常用于肺腺癌发病机制、靶向治疗及药物筛选研究。

LTEP-a-2人肺腺癌细胞

LTEP-a-2人肺腺癌细胞是从人类肺腺癌患者手术切除的外周肺肿瘤组织中分离、纯化获得的恶性肿瘤细胞株，因具有典型的肺腺癌病理形态、稳定的上皮细胞特征及贴近临床的分子表达谱，且能复现肺腺癌常见的恶性生物学行为，成为研究肺腺癌发病机制、靶向药物响应及肿瘤微环境互作的核心体外模型，在肺癌基础研究与临床转化领域，尤其针对肺腺癌这一最常见肺癌亚型，具有不可替代的应用价值。

从细胞来源与病理背景来看，LTEP-a-2 细胞的原始肿瘤组织源自肺腺癌患者的外周肺病灶 —— 肺腺癌是肺癌最主要亚型（占比约 40%），多起源于肺外周小气道的 Clara 细胞或 Ⅱ 型肺泡上皮细胞，临床特点为 “外周发病多、早期症状隐匿、分子靶点丰富"，部分患者确诊时已出现局部胸膜侵犯或远处转移（常见转移部位为脑、骨、肾上腺），但因存在 EGFR、ALK 等高频突变，靶向药物响应率较高，预后相对其他亚型更优。通过组织块贴壁 - 酶解联合法（采用低浓度胶原酶消化外周肺肿瘤组织，避免损伤上皮细胞完整性），从新鲜手术标本中分离获得上皮细胞团，经差速贴壁法去除成纤维细胞、血管内皮细胞等杂细胞，结合肺腺癌特异性标志物筛选，最终获得纯度超 95% 的 LTEP-a-2 细胞株。该细胞株严格保留原代肺腺癌的病理表型：细胞形态呈典型立方状或多边形，胞质丰富，体外培养时呈贴壁生长并形成 “铺路石样" 单层细胞群落，部分细胞可形成微小腺管样结构（肺腺癌特征性病理改变）；免疫组化检测显示，细胞高表达肺腺癌特异性标志物（如细胞角蛋白 7 [CK7]、甲状腺转录因子 - 1 [TTF-1]、表面活性物质相关蛋白 C [SP-C]），低表达肺鳞癌标志物（如 CK5/6、p63），与临床肺腺癌的病理诊断标准高度一致，为研究肺腺癌的亚型特异性特征提供了可靠体外模型。

在核心生物学特性方面，LTEP-a-2 细胞展现出三大典型肺腺癌特征，较好模拟临床肺腺癌的恶性行为。其一，稳定的上皮表型与腺管形成能力：LTEP-a-2 细胞始终维持上皮细胞的核心特征，免疫荧光检测显示，细胞高表达上皮细胞连接蛋白（如 E - 钙黏蛋白 E-cadherin、紧密连接蛋白 ZO-1），且在三维培养体系（如 Matrigel 胶包埋培养）中，可自发形成中空的腺管样结构 —— 培养 7-10 天后，腺管形成率达 30% 以上，腺管直径约 50-100μm，与体内肺腺癌的腺管结构相似度超 80%，这一特性为研究肺腺癌上皮分化调控及腺管形成机制提供了理想实验系统。其二，临床相关的分子表达谱与靶向药物响应：基因检测显示，LTEP-a-2 细胞携带肺腺癌常见的 EGFR 基因突变（如 EGFR 19 号外显子缺失突变，发生率约 40% 肺腺癌患者），同时低表达 PD-L1（TPS＜1%），无 ALK、ROS1 等融合基因；Western blot 检测显示，细胞内 EGFR 下游信号通路（如 PI3K/Akt、Ras/ERK）呈基础激活状态，加入 EGFR 靶向抑制剂（1μM）处理 48 小时后，信号通路磷酸化水平下降 60% 以上，细胞增殖抑制率达 50%-60%，凋亡率从 5% 提升至 25% 以上，与临床 EGFR 突变型肺腺癌患者对靶向药物的响应特征高度吻合，为研究 EGFR 靶向药物作用及耐药研发提供了关键模型。其三，可控的增殖与侵袭转移能力：体外培养时，细胞倍增时间约为 36-48 小时，软琼脂克隆形成率达 25%-30%（显著高于正常肺上皮细胞的 5% 以下），体现出适度的自主增殖能力；Transwell 侵袭实验中，细胞 24 小时穿越基质胶的细胞数是正常肺上皮细胞的 4-6 倍，且侵袭能力受基质金属蛋白酶调控 —— 细胞高表达 MMP-9（可降解 Ⅳ 型胶原），抑制 MMP-9 活性后，侵袭能力下降 40% 以上，与临床肺腺癌 “局部缓慢浸润、远处转移相对较晚" 的特点相符，为研究肺腺癌侵袭转移机制提供了可控模型。

在体外培养与维护细节上，LTEP-a-2 细胞因需维持上皮表型与腺管形成能力，对培养环境要求较高，需模拟外周肺组织的微环境条件。常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培养基（添加 1mM 丙酮酸钠及 1% 非必需氨基酸，满足上皮细胞代谢需求，同时补充 5μg/mL 胰岛素与 10ng/mL EGF，维持上皮表型稳定），培养基 pH 值需精准控制在 7.2-7.4，需添加抗菌试剂预防污染。培养条件为 37℃、5% 二氧化碳恒温培养箱，细胞贴壁能力中等，建议使用普通培养瓶（无需包被），接种密度为 2×10⁴ cells/cm²（密度过低易导致细胞分化异常，过高则出现接触抑制）。传代操作需注意：当细胞融合度达 75%-85% 时及时传代（过度融合会降低腺管形成能力），采用低浓度消化液 37℃孵育 2-3 分钟，待细胞边缘收缩、间隙明显后，加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液（避免剧烈操作破坏上皮连接蛋白），传代比例为 1:3-1:4。长期储存时，选择对数生长期、形态均一的细胞，用含 10% DMSO、20% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基制备冻存液，细胞密度调整为 5×10⁶ cells/mL，梯度降温（4℃ 30 分钟→-80℃过夜→液氮长期保存），复苏时快速解冻（37℃水浴 1-2 分钟）后立即用预热培养基稀释，24 小时后更换培养基，细胞存活率可达 80% 以上，且复苏后 3-5 代内病理形态、分子特征及靶向药物响应保持稳定。

在科研与应用领域，LTEP-a-2 细胞的价值围绕肺腺癌的亚型特异性研究展开，覆盖发病机制、靶向药物、药物筛选等关键方向。其一，肺腺癌上皮分化与腺管形成机制研究：利用细胞的腺管形成能力，通过转录组测序筛选三维培养与二维培养的差异表达基因，发现叉头框蛋白 FOXA2 在腺管形成中表达显著上调；通过 RNA 干扰技术沉默 FOXA2 后，腺管形成率从 30% 降至 8% 以下，且 E-cadherin 表达下降，验证了 FOXA2 在肺腺癌上皮分化与腺管形成中的调控作用，为理解肺腺癌组织形态发生提供分子依据。其二，EGFR 靶向药物作用与耐药研发：基于细胞的 EGFR 突变特征，研究 EGFR 靶向药物对 EGFR 信号通路的抑制作用 —— 通过 Western blot 检测药物处理后 EGFR、Akt、ERK 的磷酸化动态，明确药物对信号通路的阻断节点；同时，通过连续低剂量 EGFR 靶向药物诱导，构建耐药细胞株（LTEP-a-2/GR），发现耐药细胞中出现 EGFR T790M 二次突变（临床 EGFR 靶向耐药最常见机制），筛选第三代 EGFR 抑制剂（如奥希替尼），结果显示该药物可使耐药细胞增殖抑制率恢复至 55% 以上，为临床耐药患者的治疗提供新策略。其三，肺腺癌新型靶向药物筛选与验证：针对肺腺癌潜在靶点（如 MET、HER2），利用 LTEP-a-2 细胞构建药物筛选模型，检测 MET 抑制剂（如卡马替尼）对细胞的抑制效果；同时，针对 EGFR 耐药后的联合治疗策略，筛选 “奥希替尼 + MET 抑制剂" 联合方案，发现联合用药可使耐药细胞凋亡率从 12% 提升至 38% 以上，为肺腺癌靶向治疗方案优化提供体外证据。其四，肺腺癌诊断标志物开发与验证：基于 LTEP-a-2 细胞的分泌蛋白谱，筛选肺腺癌特异性血清标志物（如 CYFRA21-1、CEA），通过 ELISA 检测细胞培养上清中标志物浓度，结合临床样本验证 —— 结果显示 CYFRA21-1 联合 CEA 诊断肺腺癌的敏感性达 78%、特异性达 92%，为肺腺癌早期诊断（尤其外周无症状病灶）、疗效监测提供新的分子靶点。

综上，LTEP-a-2 人肺腺癌细胞凭借其典型的肺腺癌病理形态、临床相关的 EGFR 突变特征及稳定的上皮表型，成为肺腺癌研究领域的核心工具细胞。其在肺腺癌上皮分化机制、EGFR 靶向药物与耐药、新型药物筛选等方面的应用，不仅填bu了肺腺癌体外研究模型的需求空白，更为推动肺腺癌精准诊疗技术的发展、提升患者预后提供了关键实验支撑，具有重要的科学价值与临床转化意义。