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更新时间:2025-11-27
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A7d小鼠骨髓细胞是源于小鼠骨髓组织的标准化细胞系,富集造血干/祖细胞及骨髓基质细胞组分,因保留完整的骨髓细胞生物学特征与分化潜能,成为研究造血发育、免疫调控及骨髓相关疾病的核心实验材料,在血液学、免疫学及肿瘤学领域应用广泛,为基础研究与临床转化提供可靠支撑。
生物学特性上,A7d细胞呈现典型的骨髓混合细胞形态,以圆形或椭圆形造血细胞为主,部分基质细胞呈梭形,胞质透亮,细胞核大而圆,染色质分布均匀,生长方式为半悬浮状态,群体倍增时间约36-48小时。该细胞系核心优势是造血分化潜能完整,在特定细胞因子诱导下可定向分化为红细胞、粒细胞、巨核细胞及免疫细胞,传代至40代后仍维持小鼠二倍体核型(40条染色体)及稳定增殖活性,为长期实验提供保障。
标准化培养是维持细胞特性的关键。A7d细胞适宜在含10%胎牛血清的IMDM培养基中生长,添加50ng/mL小鼠干细胞因子(mSCF)促进造血活性,同时加入1%广谱抗菌双抗预防污染。培养环境需严格控制为37℃、5%二氧化碳及饱和湿度,传代时无需yi酶消化,轻柔吹打即可分散细胞,传代比例1:4至1:6,细胞密度维持在5×10⁵-2×10⁶个/mL为宜。
冻存与复苏需保障细胞分化潜能。冻存液采用含10%二甲基亚砜(DMSO)、20%胎牛血清的IMDM培养基,细胞密度调至1×10⁷-3×10⁷个/mL后,经4℃预冷30分钟、-20℃冷冻1小时、-80℃过夜的梯度降温,最终转入液氮保存。复苏时37℃水浴快速解冻,离心后用含mSCF的新鲜培养基重悬,24小时后更换培养基,细胞存活率达85%以上,分化功能不受影响。
细胞鉴定需结合形态、分子及功能三重标准。形态上观察典型骨髓细胞形态特征;分子层面高表达造血干/祖细胞标志物Sca-1、CD34及c-kit受体;功能层面通过诱导分化实验验证多向分化能力,在促红细胞生成素(EPO)作用下可分化为成熟红细胞,粒细胞集落刺激因子(G-CSF)则诱导其向粒细胞分化。
研究应用中,A7d细胞价值多元。基础研究中用于解析造血调控机制,探索SCF-c-kit信号通路对造血干细胞自我更新的影响;血液病研究中模拟再生障碍性贫血、白血病等疾病的细胞异常状态;免疫研究中用于构建免疫细胞体外分化模型,分析骨髓来源免疫细胞的活化机制;药物研发领域则作为造血促进剂或hua疗药物的药效评价模型,评估药物对骨髓造血功能的影响。
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