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更新时间:2025-11-27
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AD293人胚肾细胞是源于人类胚胎肾脏组织的永生化细胞系,经腺病毒E1A和E1B基因转化而来,因具备高转染效率、稳定的增殖特性及完善的蛋白加工能力,成为基因功能研究、重组蛋白表达及病毒载体生产的标gan性细胞模型,在生物制药与生命科学研究领域应用广泛。
从细胞核心特性来看,AD293细胞是HEK293细胞的衍生株,保留了人胚肾细胞的上皮细胞属性,同时因外源基因的导入获得了更强的增殖活性与外源基因表达能力。显微镜下呈典型的上皮样形态,细胞呈多角形或梭形,胞质丰富,以贴壁方式生长,群体倍增时间约为24小时,传代至60代后仍能维持稳定的核型与生物学功能,满足大规模实验与工业化生产需求。
标准化的培养条件是发挥其功能的基础。AD293细胞适宜在含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基中生长,添加1%广谱抗菌双抗以预防微生物污染,培养环境需严格控制为37℃、5%二氧化碳及饱和湿度的恒温培养箱。传代时采用0.25%胰dan白酶-EDTA消化液处理,待细胞边缘收缩、间隙增大时终止消化,传代比例以1:3至1:5为宜,避免细胞密度过高导致接触抑制。
冻存与复苏的规范操作直接决定细胞活性。冻存液采用含10%二甲基亚砜(DMSO)、20%胎牛血清的DMEM培养基配制,细胞密度调整为2×10⁶-5×10⁶个/mL后,经4℃预冷30分钟、-20℃冷冻1小时、-80℃过夜保存的梯度降温流程,最终转入液氮长期储存。复苏时需将冻存管快速置于37℃水浴中震荡解冻,离心去除冻存液后用新鲜培养基重悬接种,细胞存活率可稳定在90%以上。
AD293细胞的鉴定需结合形态学、分子特征及功能属性综合判断。分子层面,其高表达腺病毒E1A蛋白,同时表达肾上皮细胞特异性标志物如细胞角蛋白19(CK19);功能层面,该细胞具有ji强的外源基因转染效率,无论是脂质体转染还是病毒介导转染,均能高效表达目的基因,且具备完善的蛋白糖基化、磷酸化等翻译后修饰系统,保障重组蛋白的天然活性。
在应用领域,AD293细胞的价值贯穿基础研究与产业应用。基础研究中,常用于解析基因表达调控机制、信号通路功能验证,如通过过表达或敲低目的基因研究其对细胞增殖、凋亡的影响;生物制药领域,是重组抗体、细胞因子等蛋白药物的核心表达系统,同时也是腺病毒、腺相关病毒等基因治疗载体的生产工具;此外,还可用于药物筛选模型构建,评估药物对肾脏细胞的毒性及作用机制。
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