MEF小鼠胚胎成纤维细胞，呈成纤维样贴壁生长，增殖能力强，可分泌细胞因子、支持干细胞培养，是细胞生物学、胚胎工程及疾病模型研究的常用基础细胞。

MEF小鼠胚胎成纤维细胞

MEF小鼠胚胎成纤维细胞是细胞生物学与生命科学研究领域应用zui广泛的基础细胞系之一，源于妊娠 12.5-14.5 天的小鼠胚胎体壁中胚层组织，因具备增殖能力强、分泌功能稳定、易体外培养等优势，成为细胞生物学机制研究、胚胎工程技术开发及疾病模型构建的核心支撑细胞，为众多基础与应用研究提供了关键实验载体。

从细胞来源与核心生物学特性来看，MEF 细胞的取材背景与生物学功能高度适配基础研究需求。来源上，该细胞系通过无菌分离妊娠中期小鼠胚胎的体壁组织，经yi酶消化获得单细胞悬液，再经体外贴壁培养、纯化后建立，其起源的中胚层特性决定了其成纤维细胞的典型表型。形态层面，MEF 细胞呈典型梭形成纤维样贴壁生长，显微镜下可见细胞排列呈放射状或漩涡状，胞质丰富，细胞核呈椭圆形位于细胞中央，形态规则且均一，传代早期无明显异型性，能稳定维持成纤维细胞的形态特征。功能层面，MEF 细胞拥有三大核心优势：一是增殖能力强劲，体外培养时群体倍增时间约 24-36 小时，传代 5-8 代内可保持旺盛增殖活性，能快速获得大量均一细胞，满足大规模实验需求；二是分泌功能活跃，可合成并分泌多种细胞因子（如 EGF、FGF）、生长因子（如 IGF-1）及细胞外基质成分（如胶原蛋白、纤连蛋白），这些分泌产物能构建贴近体内的微环境，为其他细胞（如干细胞）的培养提供必要支持；三是细胞可塑性适中，虽为分化成熟的成纤维细胞，但在特定诱导条件下（如病毒介导的重编程因子导入）可转化为诱导多能干细胞（iPSC），为细胞重编程机制研究提供理想材料。分子层面，MEF 细胞稳定表达成纤维细胞特异性标志物（如波形蛋白 Vimentin、成纤维细胞特异蛋白 FSP-1），不表达上皮细胞或造血细胞标志物，遗传背景与来源小鼠一致（如 C57BL/6、BALB/c 等近交系），便于后续与同源小鼠模型联动研究。

在细胞培养与维护方面，MEF 细胞的培养条件相对温和，但需严格把控细节以维持其增殖活性与分泌功能。基础培养基推荐使用高糖 DMEM 培养基（含 4.5g/L 葡萄糖、L - 谷an酰胺，满足成纤维细胞高代谢需求），添加 10% 胎牛血清（FBS，需筛选无支原体、低内毒素的优质批次 —— 血清质量直接影响 MEF 细胞的增殖速率与分泌功能，劣质血清可能导致细胞生长停滞或表型改变）和 1% 双抗（青mei素 - 链mei素混合液，抑制细菌污染）。培养环境需遵循 37℃恒温、5% CO₂饱和湿度的标准，且需特别注意细胞密度控制：当细胞汇合度达 80%-90% 时需及时传代，若过度汇合会导致细胞接触抑制，不仅降低增殖速率，还可能引发细胞衰老（表现为细胞体积增大、扁平，增殖停滞）；传代时采用 0.25% yi酶 - EDTA 消化液，37℃孵育 2-3 分钟，待细胞间隙增大、形态变圆后立即终止消化，传代比例建议为 1:3-1:5，避免消化过度损伤细胞表面受体，影响分泌功能。细胞冻存需采用含 10% DMSO、90% 胎牛血清的冻存液，按 “4℃放置 30 分钟→-20℃静置 1 小时→-80℃过夜→转入液氮长期保存" 的梯度降温流程操作，复苏时需将冻存管迅速放入 37℃水浴中快速融化，离心去除 DMSO 后接种至新鲜培养基，复苏后 24 小时内更换培养基，可将细胞存活率提升至 90% 以上，最da程度保留其原有的生物学功能。

在科研应用领域，MEF 细胞凭借 “基础支撑性强、适用场景广泛" 的优势，成为众多研究方向的 “基石细胞"。在胚胎工程研究中，MEF 细胞是早期胚胎体外培养的关键饲养层细胞：将其经丝裂mei素 C 处理（抑制增殖但保留分泌功能）后铺板，再接种小鼠早期胚胎（如囊胚），MEF 细胞分泌的生长因子可支持胚胎体外发育至孵化囊胚阶段，为胚胎移植、胚胎干细胞（ESC）分离提供必要微环境；同时，MEF 细胞也是 ESC 体外培养的经典饲养层，能抑制 ESC 分化，维持其多能性。在细胞生物学机制研究中，MEF 细胞是探索细胞增殖、凋亡、衰老机制的理想模型：通过基因编辑技术（如 CRISPR/Cas9 敲除、siRNA 沉默）调控目标基因（如 p53、p21 等细胞周期调控基因），观察 MEF 细胞的生长曲线、凋亡率及衰老相关 β- 半乳糖苷酶活性变化，为解析细胞命运调控机制提供直接实验证据。在疾病模型构建中，MEF 细胞可用于建立体外疾病模拟体系：例如从基因工程小鼠（如肿瘤易感小鼠、代谢疾病小鼠）胚胎中分离 MEF 细胞，通过体外培养构建与体内疾病相关的细胞模型，研究疾病相关基因在成纤维细胞中的功能，为疾病机制研究提供体外简化系统；此外，MEF 细胞还可作为 “滋养细胞" 支持肿瘤细胞、干细胞的体外培养，或作为细胞融合的供体细胞，应用于单克隆抗体制备等技术领域。

使用 MEF 细胞时需注意两点关键事项：一是严格控制传代次数，MEF 细胞为有限传代细胞，通常传代 5-8 代后会出现明显衰老，建议在传代 3-5 代内使用，以确保细胞处于旺盛增殖状态；二是明确细胞来源背景，不同近交系小鼠来源的 MEF 细胞在遗传背景、分泌因子谱上存在差异，需根据实验需求（如与特定小鼠模型匹配、研究特定基因功能）选择对应品系的 MEF 细胞，避免因遗传背景不一致影响实验结果。

综上，MEF 小鼠胚胎成纤维细胞以其稳定的生物学特性、强大的基础支撑能力，成为细胞生物学、胚胎工程及疾病研究领域不ke或缺的工具细胞，其广泛应用为推动生命科学基础研究与技术转化提供了坚实保障，对相关领域的发展具有不可替代的基础作用。