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更新时间:2025-11-25
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BT-325人脑多型胶质母细胞瘤细胞是源自人脑多型胶质母细胞瘤组织的恶性神经胶质瘤细胞系,因保留胶质母细胞瘤的高度侵袭性、异质性及放hua疗抵抗特性,体内致瘤性强且能模拟肿瘤微环境交互作用,成为研究中枢神经系统恶性肿瘤发病机制、治疗策略及药物研发的重要模型,为改善胶质母细胞瘤极差的临床预后提供关键实验支撑。
生物学特性上,BT-325细胞呈典型多型胶质母细胞瘤形态,贴壁生长且排列紊乱无极性,显微镜下可见梭形、多角形等多种形态细胞,细胞边界模糊,胞质丰富呈嗜碱性,部分细胞含胶质纤维样结构;细胞核大而畸形,核仁明显且数量不等,核质比显著增高,多核、病理性核分裂象及核仁异常增生等恶性标志突出。其增殖活性旺盛,传代周期约36-48小时,无接触抑制特性,密集生长时形成不规则细胞集落,且易出现细胞重叠堆积。细胞高表达胶质母细胞瘤特异性标志物,如胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、波形蛋白(Vimentin)及O6-甲基鸟piao呤-DNA甲基转移酶(MGMT),经STR鉴定遗传背景稳定,无微生物污染,体外可稳定维持胶质母细胞瘤的高度恶性表型。
培养条件需模拟中枢神经系统肿瘤微环境:常规采用含10%-15%胎牛血清的DMEM/F12混合培养基,添加2mmol/L丙酮酸钠及1%非必需氨基酸优化代谢环境,培养环境控制在37℃、5%CO₂及95%相对湿度。胎牛血清中的表皮生长因子(EGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)可激活细胞增殖与侵袭相关信号通路,DMEM/F12混合培养基的营养配比能满足肿瘤细胞高代谢需求,丙酮酸钠可提升细胞能量供应稳定性。传代操作时,用无菌PBS轻柔清洗细胞表面2次,加入含0.02%EDTA的0.25%消化液,37℃孵育4-6分钟,待细胞间隙增大后用含血清培养基终止消化,轻柔吹打为单细胞悬液按1:3-1:5比例传代,避免剧烈操作破坏细胞侵袭相关的伪足结构。
研究应用中,BT-325细胞是解析胶质母细胞瘤核心科学问题的理想工具。在侵袭机制研究方面,可用于探究MGMT表达与DNA损伤修复的关联,分析基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)对血脑屏障及脑间质的降解作用,明确Hedgehog、Notch等信号通路在肿瘤浸润性生长中的调控机制,为挖掘侵袭相关治疗靶点提供依据。在放hua疗抵抗研究领域,因该细胞对替mo唑胺及放疗具有天然抵抗性,常被用于构建耐药模型,明确DNA修复增强、肿瘤干细胞样细胞富集等耐药相关分子机制。
在药物研发领域,该细胞系应用价值突出:体外可通过CCK-8法检测药物IC50值,结合Transwell侵袭实验评估药物对细胞侵袭能力的抑制效果,利用Western blot分析药物对MGMT及耐药相关蛋白的调控作用;体内构建裸鼠脑胶质瘤原位移植瘤模型时,其成瘤率达90%以上,可直观评估药物的血脑屏障穿透能力及体内抑瘤活性。使用时需注意:传代控制在50代以内,每10代通过免疫染色验证GFAP、Vimentin表达稳定性;培养时避免细胞过度密集,防止出现缺氧诱导的表型异常;实验中建议设置正常胶质细胞作为对照,明确肿瘤特异性特征。作为胶质母细胞瘤研究的经典模型,BT-325细胞为推动中枢神经系统恶性肿瘤精准治疗研究提供了不可替代的实验基础。
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