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更新时间：2025-11-11
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HO-8910人卵巢癌细胞
一、细胞基本生物学特性
HO-8910人卵巢癌细胞源自人卵巢浆液性囊腺癌组织（取自晚期卵巢癌患者手术标本，经原代分离、纯化及稳定传代建立），是研究卵巢癌发生发展机制、侵袭转移规律及抗卵巢癌药物研发的核心体外模型。其保留了卵巢浆液性囊腺癌的典型恶性表型与分泌特征，在模拟卵巢癌病理进程、药物响应及腹腔微环境互作方面表现稳定，广泛应用于肿瘤学、妇科医学及药理学领域。
形态上，该细胞呈典型腺癌细胞形态，常规培养时以多边形、上皮样为主，部分细胞呈梭形聚集生长（胞体长 14-20μm，宽 10-15μm）；胞质丰富但分布不均，含少量黏液样颗粒（PAS 染色阳性率约 25%-35%，提示保留部分腺体分泌功能），细胞间连接松散（缺乏正常卵巢上皮的极性排列，黏附能力弱）；细胞核大而畸形，呈多形性（圆形、椭圆形或不规则形），核仁增多（1-3 个）且明显，染色质浓集呈块状或边集，核分裂象多见（正常培养条件下分裂象比例约 5%-7%，可见病理性核分裂）。体外培养以贴壁生长为主，接种后 24-36 小时完成贴壁，随培养时间推移形成多层细胞群落，无接触抑制（融合度达 100% 仍持续增殖），可稳定传代 40 代以上，传代过程中恶性表型无明显改变，符合肿瘤细胞系的长期研究需求。
功能特性方面，HO-8910 人卵巢癌细胞具备三大核心恶性特征。一是恶性增殖能力：细胞周期进程异常（G1 期比例降至 42%-47%，S 期比例升至 28%-33%），倍增时间短（约 40-48 小时），无需外源生长因子即可快速增殖，对营养剥夺耐受性强（葡萄糖浓度降至 5mmol/L 时，增殖率仅下降 13%-18%，显著低于正常卵巢上皮细胞）。二是侵袭转移潜能：体外 Transwell 实验中 24 小时穿膜细胞数达 60-100 个 / 视野（正常卵巢上皮细胞 < 4 个 / 视野），可分泌高活性基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9，表达量比正常细胞高 4-6 倍），降解腹腔基质成分（如胶原 Ⅳ、层粘连蛋白）；划痕愈合实验中 24 小时愈合率达 55%-65%，模拟卵巢癌细胞的腹腔侵袭过程，通过腹腔接种可建立稳定的腹腔转移模型（接种后 28-35 天形成腹腔内多发转移灶）。三是腹腔微环境适应与耐药能力：可分泌卵巢癌相关抗原（如 CA125，表达量比正常细胞高 10 倍以上，临床卵巢癌监测指标）与血管生成因子（如 VEGF，表达量高），促进肿瘤血管生成与腹腔种植；对临床常用hua疗药物具中等耐药性，特定药物（10μmol/L）处理 48 小时后，细胞存活率仍达 35%-45%（正常细胞存活率 < 10%），同时可通过上皮 - 间质转化（EMT）增强转移与耐药能力（EMT 标志物 N-cadherin 阳性率≥60%）。
分子表型上，该细胞高表达卵巢浆液性囊腺癌特异性标志物：糖类抗原 125（CA125，阳性率≥85%，卵巢癌核心诊断抗原）、细胞角蛋白 18（CK18，阳性率≥90%，上皮源性肿瘤标志物）、癌胚抗原（CEA，阳性率≥70%，肿瘤相关抗原），其中 CA125⁺CK18⁺双阳性表型是其身份鉴定的核心依据；同时表达多种恶性相关蛋白，包括增殖相关蛋白（Ki-67，阳性率≥70%，提示高增殖活性）、侵袭相关蛋白（MMP-9，细胞膜及胞质阳性）、耐药相关蛋白（ABCB1，阳性率≥60%，介导药物外排）；细胞内信号通路异常激活：PI3K/Akt 通路（持续高活性，调控恶性增殖与耐药）、MAPK/ERK 通路（过度激活，促进细胞侵袭与 EMT）、NF-κB 通路（持续激活，介导炎症与腹腔种植）；染色体核型为非整倍体（多为 46-48 条染色体，可见染色体缺失、易位及扩增，如 19 号染色体部分扩增），与临床卵巢浆液性囊腺癌组织的分子特征高度一致，确保实验结果的临床相关性。
二、体外培养关键条件
HO-8910 人卵巢癌细胞的体外培养需兼顾其恶性增殖特性与分泌功能，精准控制培养条件以维持稳定表型。
培养基选择：增殖阶段优先使用 RPMI-1640 培养基（添加 10% 胎牛血清 FBS，低内毒素≤5 EU/mL，无支原体污染）、1% 非必需氨基酸（NEAA），无需额外添加生长因子（外源因子可能干扰恶性表型）；培养基 pH 值控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 290-320 mOsm/kg。构建耐药模型时，可逐步提高药物浓度（如从 0.5μmol/L 增至 8μmol/L，每代培养 2-3 周）；开展腹腔侵袭实验前，需用无血清培养基饥饿处理 12 小时，消除血清对细胞迁移的干扰。
培养环境参数：温度稳定维持在 37℃±0.5℃，CO₂浓度 5%±0.3%，相对湿度 95% 以上；温度波动超过 ±1℃会导致细胞增殖率下降 18%-25%，但 CA125 表达无明显改变；CO₂浓度异常（<4% 或> 6%）会导致培养基 pH 值失衡，细胞出现空泡化（存活率下降），需通过培养箱实时监控调整。
传代操作要点：细胞融合度达 70%-80% 时需及时传代（避免过度融合导致细胞脱落），操作步骤如下：用无菌 PBS 快速清洗细胞 1 次（肿瘤细胞贴壁较牢，无需轻柔），加入细胞消化液（37℃孵育 3-5 分钟），显微镜下观察到细胞变圆、间隙增大时，加入 5 倍体积含血清培养基终止消化，用移液器吹打至细胞wan全脱落（可反复吹打 2-3 次，肿瘤细胞耐受性强），按 1:4-1:5 比例接种至新培养皿；传代过程中无需控制吹打次数，但需避免产生过多气泡（气泡会导致细胞死亡）。
关键注意事项：细胞对血清质量敏感度较低（不同批次血清对增殖影响差异 < 12%），但需避免使用过期血清（会导致细胞活力下降与 CA125 分泌减少）；培养器皿无需包被（肿瘤细胞可直接贴壁，包被可能促进过度聚集）；培养基每 2-3 天更换 1 次（细胞代谢快，需及时清除代谢废物），更换时可全量更换（无需保留旧培养基，肿瘤细胞无需依赖微环境因子）。
三、核心科研应用领域
卵巢癌发病机制研究：可用于解析卵巢癌发生发展与腹腔转移机制，如沉默 PI3K 基因后，细胞增殖率下降 55%，MMP-9 表达量下降 70%，证实 PI3K 通路对恶性表型的调控作用；通过对比 HO-8910 细胞与正常卵巢上皮细胞的转录组差异，筛选出卵巢癌相关差异基因（如 BRCA1、MYC，在 HO-8910 中表达异常），为明确癌变机制提供直接证据。
卵巢癌腹腔侵袭与转移机制研究：可构建体外腹腔侵袭模型（Transwell 小室加腹腔基质胶），研究肿瘤细胞与腹腔微环境的互作，如加入腹腔巨噬细胞条件培养基后，HO-8910 细胞穿膜数提升 2 倍，证实微环境对侵袭的促进作用；检测 EMT 标志物（如 N-cadherin、E-cadherin）的表达变化，揭示卵巢癌细胞通过 EMT 增强转移能力的分子机制。
抗卵巢癌药物筛选与评价：适用于高通量筛选hua疗药物、靶向药物及中药活性成分，如检测靶向 CA125 的抗体药物对 HO-8910 细胞的抑制作用（10μg/mL 抗体处理 48 小时后，细胞增殖率下降 60%，CA125 分泌量下降 80%）；评价药物耐药机制，如检测 ABCB1 抑制剂对耐药细胞的逆转作用（抑制剂处理后，耐药细胞存活率从 45% 降至 18%）。
卵巢癌诊断标志物与治疗靶点验证：可验证肿瘤标志物的临床价值，如检测 HO-8910 细胞分泌的 CA125 含量（比正常细胞高 10 倍以上），对比卵巢癌患者血清与健康人血清的 CA125 差异，优化诊断阈值；通过基因敲除实验验证潜在治疗靶点（如 MMP-9），敲除 MMP-9 后，HO-8910 细胞的体外侵袭能力下降 65%，体内腹腔转移灶数量减少 70%，提示其作为治疗靶点的潜力。
四、质量控制与使用注意事项
（一）质量控制标准
细胞活力：台盼蓝染色法检测活力≥90%（死细胞比例 < 10%），传代后 24 小时贴壁率≥85%；
纯度检测：CA125⁺CK18⁺细胞比例≥80%，无成纤维细胞（vimentin 阳性）、内皮细胞（CD31 阳性）等杂细胞污染（通过免疫荧光染色验证）；
功能验证：Transwell 实验 24 小时穿膜细胞数≥60 个 / 视野，10μmol/L 特定药物处理 48 小时后存活率≥35%，CA125 分泌量≥15U/10⁶细胞 / 24 小时；
污染检测：无细菌、真菌、支原体污染（PCR 法检测），STR 分型与标准 HO-8910 细胞图谱一致性≥95%（避免交叉污染）；
稳定性检测：传代至 40 代后，仍保持≥75% 的标志物阳性率与稳定的侵袭、耐药及 CA125 分泌功能。
（二）使用注意事项
培养操作：长期培养需每 10 代进行一次 STR 分型验证（卵巢癌细胞易发生遗传漂变，需确认身份）；避免与正常卵巢细胞同室培养（防止交叉污染，肿瘤细胞污染正常细胞后难以清除）；
实验设计：开展药物筛选时，需设置正常卵巢上皮细胞对照组，评估药物的肿瘤特异性（避免筛选出对正常细胞有毒性的药物）；检测侵袭能力时，需统一基质胶浓度（50μg / 孔）与细胞接种密度（1×10⁵个 / 孔），确保结果可重复；
冻存复苏：冻存需选择对数生长期细胞（活力≥95%），冻存液配方为 RPMI-1640 培养基 + 10% DMSO+20% FBS，无需添加其他因子（肿瘤细胞冻存存活率高）；复苏时在 37℃水浴中快速融化（1 分钟内），加入 5 倍体积含血清培养基，离心后直接接种（无需静置，肿瘤细胞贴壁快）；
安全防护：该细胞为人类肿瘤细胞系，操作时需遵守生物安全二级防护规范（穿戴防hufu、手套，使用生物安全柜），废弃培养物需高压灭菌处理（121℃，30 分钟），避免生物污染风险。
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