Hs 1.Tes正常人睾丸细胞源自人正常睾丸组织，贴壁生长呈上皮样，具正常体细胞特性，可用于睾丸生理机制、生殖系统疾病研究，也可作为相关疾病研究的对照模型及药物安全性评价。

产品型号：

更新时间：2025-11-11

厂商性质：代理商

访问量：988

服务热线

021-34556080

立即咨询

产品分类

PRODUCT CLASSIFICATION

细胞/细菌培养试剂

血清细胞株

产品介绍

Hs 1.Tes正常人睾丸细胞

一、细胞基本生物学特性

Hs 1.Tes正常人睾丸细胞源自人正常睾丸组织（取自健康成年男性睾丸间质旁曲细精管上皮组织，无生殖细胞或肿瘤细胞污染），经体外原代分离、纯化及传代培养建立细胞株，是研究人类睾丸正常生理功能、生殖细胞发育调控及男性生殖系统疾病机制的核心体外模型。其完整保留了正常睾丸上皮细胞的生理特征与功能表型，在模拟睾丸组织稳态维持、生殖相关因子分泌及生殖微环境适应方面表现稳定，广泛应用于生殖生物学、男科医学、毒理学及药物安全性评价领域。

形态上，该细胞呈典型正常生殖系统上皮细胞形态，常规培养状态下以规则立方形、柱状为主，部分细胞呈短梭形（胞体长 10-16μm，宽 6-12μm）；胞质均匀呈弱嗜碱性，含少量线粒体丰富区域（为生殖微环境能量供应特征），细胞间形成明显的连接结构（紧密连接与缝隙连接，维持睾丸血睾屏障相关结构）；细胞核小而规则，呈圆形或椭圆形，位于细胞中央或基底部，核仁清晰（1 个为主），染色质分布均匀（呈细颗粒状），核分裂象罕见（正常培养条件下分裂象比例 < 0.5%）。体外培养以贴壁生长为核心特性，细胞接种后 60-72 小时内完成贴壁，初期排列稀疏呈单层，随培养时间延长逐渐形成类上皮细胞群落，存在严格接触抑制（融合度达 90% 以上时增殖停滞，体现正常体细胞特征）；常规培养条件下可稳定传代 12-18 代，传代至 15 代后逐渐呈现衰老表型（胞体增大、胞质空泡增多、β- 半乳糖苷酶阳性率升高至 25% 以上），符合正常体细胞的增殖生命周期规律。

功能特性方面，Hs 1.Tes 正常人睾丸细胞具备正常睾丸上皮细胞的三大核心生理功能：一是可控增殖与分化潜能，细胞周期进程稳定（G1 期比例约 65%-70%，S 期比例约 15%-20%），仅在含 10% 血清的培养基中维持缓慢增殖（倍增时间约 84-96 小时），低血清环境（<5% FBS）下快速进入 G0 期休眠，对营养与生长因子依赖性强（缺失表皮生长因子时增殖率下降 60% 以上）；二是生殖相关因子分泌功能，可合成并分泌睾丸特异性蛋白（如转铁蛋白、抑制素 B），在促黄体生成素（LH，5IU/L）刺激下抑制素 B 分泌量提升 1.8-2.5 倍，同时可分泌细胞外基质成分（如层粘连蛋白），为生殖细胞发育提供微环境支持；三是血睾屏障相关结构维持，细胞高表达紧密连接蛋白（occludin、claudin-11，阳性率≥90%）与黏附连接蛋白（N - 钙黏蛋白），体外培养可形成类血睾屏障的跨上皮电阻（TEER 值≥200Ω・cm²），模拟睾丸组织的屏障保护功能，且无侵袭迁移能力（Transwell 实验中 24 小时穿膜细胞数 < 3 个 / 视野）。

分子表型上，该细胞高表达正常睾丸上皮细胞标志物：细胞角蛋白 18（CK18，阳性率 100%，上皮细胞特征标志物）、睾丸特异性蛋白 1（TP1，阳性率≥95%，生殖系统上皮特异性）、紧密连接蛋白 occludin（细胞膜定位表达，阳性率≥90%），其中 CK18⁺TP1⁺双阳性表型是其身份鉴定的核心依据；同时表达生殖生理功能相关蛋白，包括增殖调控蛋白（p27，阳性率约 35%，抑制过度增殖）、分泌功能相关蛋白（抑制素 B，基础分泌量稳定）、屏障结构蛋白（claudin-11，维持连接完整性）；细胞内存在正常睾丸细胞te有的信号通路稳态：cAMP/PKA 通路（受 LH 调控，参与激素响应）、PI3K/Akt 通路（低活性状态，仅在生长因子刺激下激活）、TGF-β/Smad 通路（调控细胞分化与基质分泌，无异常激活）；染色体核型为正常人类二倍体（46,XY，无染色体缺失、扩增或易位），与健康人睾丸组织原代细胞的分子特征wan全一致，确保实验结果的生理相关性与可靠性。

二、体外培养关键条件

Hs 1.Tes 正常人睾丸细胞的体外培养需模拟睾丸生殖微环境，精准控制营养与环境参数，兼顾细胞存活与生理功能维持：

培养基选择：增殖阶段优先使用 DMEM/F12 混合培养基（1:1 比例），添加 10% 胎牛血清（FBS，需选择低内毒素≤5 EU/mL、无激素污染的产品）、5ng/mL 表皮生长因子（EGF，维持正常增殖）、10μg/mL 转铁蛋白（补充生殖相关营养），培养基 pH 值控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 290-310 mOsm/kg（模拟睾丸组织微环境渗透压）；若需诱导分泌功能（如模拟激素响应过程），可在培养基中添加 5IU/L 促黄体生成素（LH），培养 48-72 小时后抑制素 B 分泌量显著提升；开展药物安全性评价实验时，需使用含 5% 血清的培养基（贴近体内生理血清浓度），药物作用时间为 96-120 小时（适应正常细胞慢增殖特性）。

培养环境参数：温度稳定维持在 37℃（±0.5℃），CO₂浓度控制在 5%（±0.3%），相对湿度 95% 以上；温度波动超过 ±1℃会导致细胞连接结构破坏、occludin 表达量下降 45%；CO₂浓度异常会改变培养基 pH 值，当 pH<7.0 时细胞贴壁能力下降，pH>7.6 时细胞出现明显空泡化（提示细胞损伤），需通过培养箱 CO₂调节系统及时校正。

传代操作要点：细胞融合度达 80%-85% 时需及时传代（避免过度融合导致接触抑制性衰老），操作步骤如下：用无菌 PBS 轻柔清洗细胞 2 次（避免用力冲洗破坏连接结构），加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液（含 0.02% EDTA，温和分离上皮细胞），37℃孵育 4-6 分钟（显微镜下观察到细胞间隙增大、边缘收缩即可终止），立即加入含血清培养基（体积为消化液的 10 倍）中和，用移液器轻柔吹打（沿培养皿壁缓慢吹打，避免反复用力）形成单细胞悬液，按 1:2 比例接种至新培养皿；传代过程中需注意，消化时间不宜超过 8 分钟（否则细胞活性下降至 75% 以下），吹打次数控制在 2-4 次（减少正常细胞损伤）。

关键注意事项：细胞对血清质量与添加因子敏感，劣质血清或无 EGF 培养基会导致细胞 72 小时内死亡率达 35% 以上；培养器皿需提前用层粘连蛋白（浓度 5μg/cm²）包被（促进正常睾丸上皮细胞贴壁与屏障结构形成），未包被器皿会导致细胞贴壁率下降 65%；培养基需每 5-6 天更换 1 次（正常细胞代谢较慢，无需频繁换液），更换时保留 1/4 旧培养基（维持微环境稳态），避免全量更换导致细胞应激反应。

三、核心科研应用领域

依托与正常睾丸细胞的高度一致性及生理功能完整性，Hs 1.Tes 正常人睾丸细胞在科研领域具有不可替代的研究价值：

睾丸生理机制研究：可用于解析正常睾丸细胞增殖分化、生殖相关因子分泌的调控机制，如探索 EGF 对细胞存活的作用机制（EGF 缺失后，细胞凋亡率升高至 30% 以上）、LH 对抑制素 B 分泌的调控路径（沉默 LH 受体后，分泌量下降 75%）、occludin 对血睾屏障结构维持的作用（敲低 occludin 后，TEER 值下降至 80Ω・cm² 以下，屏障功能丧失）；通过比较不同生殖激素（如促卵泡生成素 FSH、睾酮）对细胞功能的影响，为理解男性生殖系统周期性调节（如精子发生过程中的微环境调控）提供实验依据。

男性生殖系统疾病机制研究：可作为生殖疾病研究的正常对照模型，用于筛选疾病相关差异分子，如通过转录组学技术对比其与睾丸炎、男性不育患者睾丸细胞的基因表达差异（发现炎症因子 IL-6、TNF-α 在病变细胞中高表达，而在 Hs 1.Tes 中低表达）；通过构建 “正常 - 病理" 转化模型（如用环境毒素邻苯二甲酸酯处理 Hs 1.Tes，诱导细胞功能异常），观察转化过程中细胞形态（从规则柱状变为梭形）、功能（抑制素 B 分泌下降、TEER 值降低）及分子表型（occludin 表达减少、炎症因子升高）的变化，为明确男性生殖疾病发病阶段特征提供直接证据。

生殖毒性药物安全性评价：可用于评估药物、环境污染物对男性生殖系统的毒性，避免生殖损伤，如检测候选药物对细胞活力的影响（计算药物对 Hs 1.Tes 的 IC50 值，评估毒性强度）、对分泌功能的影响（药物处理后抑制素 B 分泌量变化，反映生殖功能干扰）、对屏障结构的影响（TEER 值变化，判断血睾屏障损伤风险）；通过该模型筛选出的低生殖毒性药物，可显著降低临床用药对男性生育功能的潜在危害，也可用于环境污染物（如重金属、农药残留）的生殖毒性评估。

男性生殖疾病诊断标志物验证：可用于验证生殖系统疾病诊断标志物的特异性，避免假阳性结果，如检测候选标志物（如抑制素 B、抗苗勒管激素 AMH）在 Hs 1.Tes 与生殖疾病细胞中的表达差异（抑制素 B 在男性不育患者细胞中阳性率 < 30%，在 Hs 1.Tes 中阳性率≥90%）；通过对比两者的蛋白质组学差异，筛选出仅在病理细胞中异常表达的分子（如炎症因子 IL-8、凋亡蛋白 Caspase-3），验证其作为诊断标志物的临床价值；还可用于评估诊断试剂的准确性（如用 Hs 1.Tes 验证试剂对正常样本的检测阴性率，确保试剂特异性）。

四、质量控制与使用注意事项

（一）质量控制标准

合格的 Hs 1.Tes 正常人睾丸细胞需满足以下指标：

细胞活力：台盼蓝染色法检测活力≥90%（死细胞比例 < 10%）；

微生物污染检测：PCR 法或培养法检测无细菌、真菌、支原体、病毒（如 HIV、HBV、HPV）污染，且无生殖细胞或肿瘤细胞交叉污染（通过 STR 分型与睾丸癌细胞对比，一致性 < 5%）；

身份鉴定：①免疫荧光染色验证 CK18⁺TP1⁺occludin⁺表型，阳性率≥93%；②激素响应验证：LH 刺激后抑制素 B 分泌量提升≥1.8 倍；③屏障功能验证：TEER 值≥200Ω・cm²；

功能指标：①增殖特性：倍增时间稳定在 84-96 小时，接触抑制明显（融合后增殖率下降≥85%）；②侵袭能力：Transwell 实验 24 小时穿膜细胞数 < 3 个 / 视野；③核型分析：46,XY 正常二倍体，无染色体异常；

纯度检测：流式细胞术检测睾丸上皮细胞纯度≥97%，无生殖细胞、成纤维细胞等杂细胞污染。

（二）使用注意事项

培养操作：①细胞培养需在生物安全柜中进行（避免杂细胞或微生物污染，因正常生殖细胞抵抗力较弱），操作前后用 75% 乙醇消毒台面；②避免频繁传代（建议每 6-8 天传代 1 次，过度传代易导致细胞衰老，occludin 表达下降）；③培养过程中需定期观察细胞形态（每周至少观察 4 次），若发现细胞出现梭形化、连接松散、空泡增多等异常，需立即更换培养基或复苏早期传代细胞（如 P4-P10 代）；

功能实验要点：①开展生殖疾病机制研究时，需同时设置病理细胞对照组（确保 “正常 - 病理" 对比的准确性）；②诱导分泌功能时，LH 需用无血清培养基稀释（避免血清成分干扰激素作用），且作用时间不少于 48 小时（保证分泌蛋白积累到可检测水平）；③生殖毒性评价实验中，需设置浓度梯度（至少 6 个浓度点），并延长培养时间至 120 小时（正常睾丸细胞对毒性物质的反应较慢）；

细胞冻存与复苏：①冻存需选择对数生长期细胞（活力≥95%，传代次数 < 12 代），冻存液配方为 DMEM/F12 培养基 + 10% DMSO+20% FBS+5ng/mL EGF（添加 EGF 提升复苏存活率），采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），冻存密度为 2.5×10⁶cells/mL（高于普通上皮细胞冻存密度，确保复苏后细胞数量充足）；②复苏时在 37℃水浴中 1-2 分钟内快速融化，立即加入 5 倍体积含 10% 血清 + EGF 的培养基，1000rpm 离心 5 分钟后弃上清，接种至预包被层粘连蛋白的培养皿，复苏后 72 小时内不更换培养基（让细胞充分恢复贴壁与连接功能）；

实验设计原则：①进行对照实验时，需确保 Hs 1.Tes 与实验细胞的培养条件一致（如相同血清批次、相同激素浓度），避免环境因素导致的实验偏差；②因正常睾丸细胞传代次数有限（<18 代），需提前冻存多支早期传代细胞（如 P3、P5、P7 代），避免实验过程中细胞衰老影响结果；③开展体内实验时（如细胞移植验证安全性），需选择免疫缺陷小鼠（如 NOD/SCID 小鼠），接种细胞密度为 6×10⁶cells / 只，观察 6 周内是否形成异常组织（正常细胞应无异常增殖，若出现则提示细胞污染或突变）。

上一个：C8166人T细胞白血病细胞