Hs 578Bst人正常乳腺细胞源自人正常乳腺组织，贴壁生长呈上皮样，具正常体细胞特性，可作为乳腺疾病研究对照，用于乳腺生理机制、癌变机制及药物安全性评价。

产品型号：

更新时间：2025-11-11

厂商性质：代理商

访问量：750

服务热线

021-34556080

立即咨询

产品分类

PRODUCT CLASSIFICATION

细胞/细菌培养试剂

血清细胞株

产品介绍

Hs 578Bst人正常乳腺细胞

一、细胞基本生物学特性

Hs 578Bst人正常乳腺细胞源自人正常乳腺组织（取自健康成年女性乳腺间质旁上皮组织，无肿瘤细胞污染），经体外原代分离、纯化及传代培养建立细胞株，是研究人类乳腺正常生理功能、乳腺组织稳态调控及乳腺癌癌变机制的核心对照模型。其完整保留了正常乳腺上皮细胞的生理特征与功能表型，在模拟乳腺细胞增殖分化、分泌功能及微环境适应方面表现稳定，广泛应用于乳腺生理学、病理学、肿瘤学及药物安全性评价领域。

形态上，该细胞呈典型正常上皮细胞形态，常规培养状态下以规则多边形、铺路石样排列为主，部分细胞呈短梭形（胞体长 12-18μm，宽 8-14μm）；胞质均匀呈弱嗜酸性，无明显颗粒状物质（体现正常细胞代谢稳态），细胞间连接紧密（存在紧密连接与桥粒结构，维持上皮完整性）；细胞核小而规则，呈圆形或椭圆形，位于细胞中央，核仁清晰（1 个为主），染色质分布均匀（呈细颗粒状），核分裂象罕见（正常培养条件下分裂象比例 < 1%）。体外培养以贴壁生长为核心特性，细胞接种后 48-72 小时内完成贴壁，初期排列稀疏，随培养时间延长逐渐形成单层，存在严格接触抑制（融合度达 90% 以上时增殖停滞，体现正常体细胞特征）；常规培养条件下可稳定传代 15-20 代，传代至 15 代后逐渐呈现衰老表型（胞体增大、增殖速率减缓、β- 半乳糖苷酶阳性率升高至 30% 以上），符合正常体细胞的增殖生命周期规律。

功能特性方面，Hs 578Bst 人正常乳腺细胞具备正常乳腺上皮细胞的三大核心生理功能：一是可控增殖分化能力，细胞周期进程稳定（G1 期比例约 60%-65%，S 期比例约 20%-25%），仅在含 10% 血清的培养基中维持增殖（低血清环境下进入 G0 期休眠），对营养剥夺敏感（葡萄糖浓度降至 2g/L 时，增殖率下降 50% 以上）；二是乳腺特异性分泌功能，可合成并分泌乳腺上皮特异性蛋白（如乳清蛋白、酪蛋白前体），在催乳素（10μg/mL）诱导下分泌量提升 2-3 倍，模拟正常乳腺的泌乳相关生理过程；三是微环境适应与稳态维持，细胞高表达上皮细胞黏附分子（E - 钙黏蛋白，维持细胞间连接），可与乳腺成纤维细胞、脂肪细胞协同生长（形成类乳腺组织的细胞群落），适应乳腺间质微环境，且无侵袭迁移能力（Transwell 实验中 24 小时穿膜细胞数 < 5 个 / 视野）。

分子表型上，该细胞高表达正常乳腺上皮细胞标志物：细胞角蛋白 18（CK18，阳性率 100%，上皮细胞特征标志物）、上皮特异性抗原（ESA，阳性率≥98%）、E - 钙黏蛋白（E-cadherin，阳性率≥95%，维持上皮极性），其中 CK18⁺E-cadherin⁺双阳性表型是其身份鉴定的核心依据；同时表达乳腺生理功能相关蛋白，包括增殖调控蛋白（p21，阳性率约 30%，抑制过度增殖）、分泌功能相关蛋白（乳清蛋白，诱导后阳性率达 60% 以上）、细胞连接蛋白（紧密连接蛋白 occludin，细胞膜定位表达）；细胞内存在正常乳腺细胞te有的信号通路稳态：PI3K/Akt 通路（低活性状态，仅在生长因子刺激下激活）、MAPK/ERK 通路（调控正常增殖分化，无异常激活）、Wnt/β-catenin 通路（维持上皮表型，β-catenin 主要定位于细胞膜）；染色体核型为正常人类二倍体（46,XX，无染色体缺失、扩增或易位），与健康人乳腺组织原代细胞的分子特征wan全一致，确保实验结果的生理相关性与可靠性。

二、体外培养关键条件

Hs 578Bst 人正常乳腺细胞的体外培养需模拟正常乳腺组织微环境，精准控制营养与环境参数，兼顾细胞存活与生理功能维持：

培养基选择：增殖阶段优先使用 DMEM/F12 混合培养基（1:1 比例），添加 10% 胎牛血清（FBS，需选择低内毒素≤5 EU/mL、无激素污染的产品）、5μg/mL 胰岛素（维持乳腺上皮细胞存活）、1ng/mL 表皮生长因子（EGF，促进正常增殖），培养基 pH 值控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-300 mOsm/kg；若需诱导分泌功能（如模拟泌乳相关过程），可在培养基中添加 10μg/mL 催乳素，培养 72 小时后乳清蛋白分泌量显著提升；开展药物安全性评价实验时，需使用含 5% 血清的培养基（贴近体内生理血清浓度），药物作用时间为 72-96 小时（适应正常细胞慢增殖特性）。

培养环境参数：温度稳定维持在 37℃（±0.5℃），CO₂浓度控制在 5%（±0.3%），相对湿度 95% 以上；温度波动超过 ±1℃会导致细胞间连接破坏、E - 钙黏蛋白表达量下降 40%；CO₂浓度异常会改变培养基 pH 值，当 pH<7.0 时细胞贴壁能力下降，pH>7.6 时细胞出现空泡化（提示细胞损伤），需通过培养箱 CO₂调节系统及时校正。

传代操作要点：细胞融合度达 85%-90% 时需及时传代（避免过度融合导致接触抑制性衰老），操作步骤如下：用无菌 PBS 轻柔清洗细胞 2 次（避免用力冲洗破坏细胞连接），加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液（含 0.04% EDTA，促进上皮细胞分离），37℃孵育 3-5 分钟（显微镜下观察到细胞间隙增大、边缘收缩即可终止），立即加入含血清培养基（体积为消化液的 10 倍）中和，用移液器轻柔吹打（沿培养皿壁缓慢吹打，避免反复用力）形成单细胞悬液，按 1:2-1:3 比例接种至新培养皿；传代过程中需注意，消化时间不宜超过 6 分钟（否则细胞活性下降至 80% 以下），吹打次数控制在 3-5 次（减少正常细胞损伤）。

关键注意事项：细胞对血清质量与添加因子敏感，劣质血清或无胰岛素培养基会导致细胞 72 小时内死亡率达 30% 以上；培养器皿需提前用胶原蛋白 Ⅰ 型（浓度 10μg/cm²）包被（促进正常上皮细胞贴壁与极性维持），未包被器皿会导致细胞贴壁率下降 60%；培养基需每 4-5 天更换 1 次（正常细胞代谢较慢，无需频繁换液），更换时保留 1/3 旧培养基（维持微环境稳态），避免全量更换导致细胞应激反应。

三、核心科研应用领域

依托与正常乳腺细胞的高度一致性及生理功能完整性，Hs 578Bst 人正常乳腺细胞在科研领域具有不可替代的对照价值：

乳腺生理机制研究：可用于解析正常乳腺细胞增殖分化、分泌功能的调控机制，如探索胰岛素对细胞存活的作用机制（胰岛素缺失后，细胞凋亡率升高至 25% 以上）、催乳素对乳清蛋白分泌的调控路径（沉默催乳素受体后，分泌量下降 70%）、E - 钙黏蛋白对上皮极性维持的作用（敲低 E - 钙黏蛋白后，细胞排列紊乱，失去铺路石样形态）；通过比较不同激素（如雌激素、孕激素）对细胞功能的影响，为理解乳腺组织周期性变化（如月经周期中的乳腺调节）提供实验依据。

乳腺癌癌变机制研究：作为 Hs 578T 人乳腺癌细胞的理想对照模型，可用于筛选乳腺癌癌变相关差异分子，如通过转录组学技术对比两者的基因表达差异（发现 MYC、Twist1 等癌基因在 Hs 578T 中高表达，而 p53、p21 等抑癌基因在 Hs 578Bst 中正常表达）；通过构建 “正常 - 癌变" 转化模型（如用致癌剂 MNNG 处理 Hs 578Bst，诱导细胞恶性转化），观察转化过程中细胞形态（从规则多边形变为梭形）、功能（从接触抑制变为无限增殖）及分子表型（E - 钙黏蛋白下降，Vimentin 升高）的变化，为明确乳腺癌癌变阶段特征提供直接证据。

抗乳腺癌药物安全性评价：可用于评估抗乳腺癌药物对正常乳腺细胞的毒性，避免药物对健康组织的损伤，如检测候选药物对细胞活力的影响（计算药物对 Hs 578Bst 的 IC50 值，与对 Hs 578T 的 IC50 值比较，评估药物选择性）、对分泌功能的影响（药物处理后乳清蛋白分泌量变化，反映药物对乳腺生理功能的干扰）、对细胞凋亡的诱导作用（流式细胞术检测 Annexin V 阳性率，判断药物是否导致正常细胞过度凋亡）；通过该模型筛选出的高选择性药物，可显著降低临床治疗中的副作用风险。

乳腺疾病诊断标志物验证：可用于验证乳腺癌诊断标志物的特异性，避免假阳性结果，如检测候选标志物（如 CEA、CA15-3）在 Hs 578Bst 与 Hs 578T 中的表达差异（CEA 在 Hs 578T 中阳性率 65%-75%，在 Hs 578Bst 中阳性率 < 5%）；通过对比两者的蛋白质组学差异，筛选出仅在乳腺癌细胞中异常表达的分子（如 MMP-9、ABCG2），验证其作为诊断标志物的临床价值；还可用于评估诊断试剂的准确性（如用 Hs 578Bst 验证试剂对正常样本的检测阴性率，确保试剂特异性）。

四、质量控制与使用注意事项

（一）质量控制标准

合格的 Hs 578Bst 人正常乳腺细胞需满足以下指标：

细胞活力：台盼蓝染色法检测活力≥92%（死细胞比例 < 8%）；

微生物污染检测：PCR 法或培养法检测无细菌、真菌、支原体、病毒（如 HIV、HBV、EBV）污染，且无肿瘤细胞交叉污染（通过 STR 分型与 Hs 578T 对比，一致性 < 5%）；

身份鉴定：①免疫荧光染色验证 CK18⁺E-cadherin⁺ESA⁺表型，阳性率≥95%；②激素受体检测：雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）表达阳性（符合正常乳腺上皮细胞激素敏感性特征）；③功能验证：催乳素诱导后乳清蛋白分泌量提升≥2 倍；

功能指标：①增殖特性：倍增时间稳定在 72-96 小时，接触抑制明显（融合后增殖率下降≥80%）；②侵袭能力：Transwell 实验 24 小时穿膜细胞数 < 5 个 / 视野；③核型分析：46,XX 正常二倍体，无染色体异常；

纯度检测：流式细胞术检测上皮细胞纯度≥98%，无成纤维细胞、脂肪细胞等杂细胞污染。

（二）使用注意事项

培养操作：①细胞培养需在生物安全柜中进行（避免杂细胞或微生物污染，因正常细胞抵抗力较弱），操作前后用 75% 乙醇消毒台面；②避免频繁传代（建议每 5-7 天传代 1 次，过度传代易导致细胞衰老，E - 钙黏蛋白表达下降）；③培养过程中需定期观察细胞形态（每周至少观察 4 次），若发现细胞出现梭形化、连接松散等异常，需立即更换培养基或复苏早期传代细胞（如 P5-P10 代）；

功能实验要点：①开展癌变机制研究时，需同时设置 Hs 578T 对照组（确保 “正常 - 癌变" 对比的准确性）；②诱导分泌功能时，催乳素需用无血清培养基稀释（避免血清成分干扰激素作用），且作用时间不少于 72 小时（保证分泌蛋白积累到可检测水平）；③药物安全性评价实验中，需设置浓度梯度（至少 6 个浓度点），并延长培养时间至 96 小时（正常细胞对药物的反应较慢）；

细胞冻存与复苏：①冻存需选择对数生长期细胞（活力≥95%，传代次数 < 15 代），冻存液配方为 DMEM/F12 培养基 + 10% DMSO+20% FBS+5μg/mL 胰岛素（添加胰岛素提升复苏存活率），采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），冻存密度为 2×10⁶cells/mL（高于肿瘤细胞冻存密度，确保复苏后细胞数量充足）；②复苏时在 37℃水浴中 1-2 分钟内快速融化，立即加入 5 倍体积含 10% 血清 + 胰岛素的培养基，1000rpm 离心 5 分钟后弃上清，接种至预包被胶原蛋白 Ⅰ 型的培养皿，复苏后 48 小时内不更换培养基（让细胞充分恢复贴壁能力）；

实验设计原则：①进行对照实验时，需确保 Hs 578Bst 与 Hs 578T 的培养条件一致（如相同血清批次、相同培养环境），避免环境因素导致的实验偏差；②因正常细胞传代次数有限（<20 代），需提前冻存多支早期传代细胞（如 P3、P5、P8 代），避免实验过程中细胞衰老影响结果；③开展体内实验时（如细胞移植验证安全性），需选择免疫缺陷小鼠（如 NOD/SCID 小鼠），接种细胞密度为 5×10⁶cells / 只，观察 4 周内是否形成肿瘤（正常细胞应无成瘤能力，若成瘤则提示细胞污染或突变）。

上一个：Ca Ski人宫颈癌肠转移细胞