HuT 78人T淋巴细胞白血病细胞源自患者，悬浮生长，具 T 细胞表型与恶性增殖特性，可用于 T 淋巴细胞白血病机制研究、药物筛选及耐药性分析。

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更新时间：2025-11-10

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HuT 78人T淋巴细胞白血病细胞

一、细胞基本生物学特性

HuT 78人T淋巴细胞白血病细胞源自人皮肤 T 细胞淋巴瘤（属于 T 淋巴细胞白血病范畴）患者的外周血样本，经体外分离培养建立细胞株，是研究 T 淋巴细胞白血病发病机制、肿瘤免疫逃逸及抗血液肿瘤药物研发的核心体外模型。其保留了 T 细胞白血病的核心恶性特征，在血液肿瘤学、肿瘤免疫学及转化医学研究中应用广泛。

形态上，该细胞呈典型淋巴细胞样形态，胞体圆形或椭圆形，直径约 8-12μm，胞质少且呈淡蓝色（瑞氏染色），胞质内偶见少量细小嗜天青颗粒；细胞核大而圆，占细胞体积的 2/3 以上，染色质呈粗颗粒状，核仁 1-2 个且明显，部分细胞可见核凹陷或畸形（符合 T 细胞淋巴瘤的形态特征）。体外培养以悬浮生长为主，无贴壁能力，细胞密度较高时易形成松散细胞团，无接触抑制特性，可在适宜条件下持续增殖。生长特性方面，其增殖活性较强，倍增时间约 24-36 小时，常规培养条件下可稳定传代 50 代以上，且能长期维持 T 细胞白血病的关键恶性特征 —— 具备体外克隆形成能力，在软琼脂培养基中可形成分散的克隆集落；可分泌多种细胞因子（如 IL-2、IFN-γ）调控肿瘤微环境；表达 T 细胞活化标志物（如 CD25、CD69），模拟体内 T 细胞白血病细胞的异常活化状态。

分子表型上，该细胞高表达 T 淋巴细胞特异性标志物，如 CD2、CD3、CD4、CD5、CD7，其中 CD4⁺表型与临床皮肤 T 细胞淋巴瘤患者细胞特征高度一致；同时表达白血病相关抗原（如 CD30、CD56）及免疫检查点分子（如 PD-1、CTLA-4），参与肿瘤免疫逃逸；细胞内存在 T 细胞白血病常见的异常信号通路激活，如 JAK/STAT3 信号通路（调控细胞增殖与免疫抑制）、NF-κB 信号通路（抗凋亡）、PI3K/Akt/mTOR 信号通路（促进代谢重编程），这些通路异常是导致细胞恶性增殖、凋亡抵抗的核心原因；染色体核型呈亚二倍体，存在特定染色体异常（如 17p13 缺失、染色体易位 t (14;16)），与临床 T 细胞白血病患者细胞的分子特征吻合，为血液肿瘤机制研究提供可靠实验基础。

二、体外培养关键条件

HuT 78 人 T 淋巴细胞白血病细胞的体外培养需精准调控营养与环境，维持其悬浮生长特性与恶性表型：培养基选择上，shou选 RPMI-1640 培养基，需添加 10%-15% 胎牛血清（FBS）、1% 非必需氨基酸（NEAA）及 50μmol/L β- 巯基乙醇（维持 T 细胞活性），培养基 pH 值严格控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-300 mOsm/kg；若开展免疫相关实验（如 PD-1 抗体药效检测），需使用无血清或 2% 低血清培养基，避免血清中免疫活性成分干扰实验结果。

培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度的培养箱中，CO₂浓度波动≤±0.3%，温度偏差超过 ±1℃会导致细胞活力骤降，增殖速率下降 50% 以上；避免频繁震荡培养瓶，否则易破坏细胞团结构，导致细胞应激性表达 PD-L1 等免疫抑制分子。传代管理是培养核心：当细胞密度达到 1×10⁶-2×10⁶ cells/mL 时需及时传代，无需消化处理，直接取对数生长期细胞悬液，按 1:2-1:3 比例加入新鲜培养基即可；传代时需轻轻吹打细胞悬液，避免细胞团聚过紧形成沉淀，同时通过低速离心（1000rpm，5 分钟）去除极少数死亡细胞（上清中漂浮的透亮细胞）；培养基更换频率为每 1-2 天 1 次，防止代谢废物（如乳酸、氨）积累导致细胞酸中毒。此外，细胞对血清质量极敏感，需选用低内毒素（≤5 EU/mL）、批次间一致性高的 T 细胞专用血清，劣质血清会导致 CD3、CD4 等 T 细胞标志物表达下降 40% 以上，甚至丢失 JAK/STAT3 通路激活特征。

三、核心科研应用领域

依托与临床 T 细胞白血病的高度相似性，HuT 78 人 T 淋巴细胞白血病细胞在科研领域价值显著：

T 细胞白血病发病机制研究：可用于解析 T 细胞白血病的分子发病机制，如探索 JAK3 基因突变对 JAK/STAT3 通路持续激活的调控作用，研究 17p13 缺失导致 p53 功能失活与细胞凋亡抵抗的关联，分析 PD-1/PD-L1 通路对肿瘤免疫逃逸的促进机制，挖掘疾病诊断标志物（如 miR-155、lncRNA MALAT1）与潜在治疗靶点（如 JAK 抑制剂靶点、PD-1 抗体靶点），为理解 T 细胞白血病的发生发展提供实验依据。

抗血液肿瘤药物筛选与评估：作为 T 细胞白血病特异性靶细胞模型，可用于筛选hua疗药物（如长春新碱、地塞mi松）、靶向药物（如 JAK 抑制剂、mTOR 抑制剂）及免yi治疗药物（如 PD-1/PD-L1 抗体、CAR-T 细胞），通过 CCK-8 法测定药物对细胞增殖的抑制率，计算半数抑制浓度（IC₅₀）；结合流式细胞术（Annexin V/PI 双染）分析药物诱导的细胞凋亡率，通过 Western Blot 检测通路相关蛋白（如 p-STAT3、p-Akt）表达变化，明确药物作用机制；尤其适用于免yi治疗药物筛选，可通过共培养模型检测 CAR-T 细胞对 HuT 78 细胞的杀伤效率。

肿瘤免疫逃逸机制研究：可用于研究 T 细胞白血病的免疫逃逸机制，如分析 PD-L1 在细胞表面的表达调控（如 IFN-γ 诱导 PD-L1 上调），观察肿瘤细胞对 T 细胞增殖、细胞因子分泌（如 IL-2、TNF-α）的抑制作用，探索调节性 T 细胞（Treg）与 HuT 78 细胞的相互作用，为开发逆转免疫逃逸的治疗策略（如免疫检查点抑制剂联合治疗）提供实验基础。

白血病耐药机制研究：可通过体外逐步加药诱导构建耐药细胞株（如长春新碱耐药株、JAK 抑制剂耐药株），对比耐药株与亲本株的分子表型差异，如 ABC 转运蛋白（ABCB1、ABCG2）表达升高、STAT3 通路代偿性激活、凋亡相关蛋白（Bcl-2、Mcl-1）高表达等，揭示耐药形成机制；同时可用于筛选耐药逆转剂（如 ABC 转运蛋白抑制剂），评估逆转剂对耐药细胞药物敏感性的恢复效果，为临床克服 T 细胞白血病耐药提供支持。

四、质量控制与使用注意事项

合格的 HuT 78 人 T 淋巴细胞白血病细胞需通过严格质量检测：细胞活力≥90%（台盼蓝染色法）；无细菌、真菌、支原体污染（PCR 法或培养法检测阴性）；免疫表型符合 CD2⁺CD3⁺CD4⁺CD7⁺特征（流式细胞术验证），且 PD-1、CD25 等活化标志物表达阳性；增殖速率稳定（倍增时间 24-36 小时）；功能指标达标（软琼脂克隆形成率≥25%，JAK/STAT3 通路蛋白 p-STAT3 表达阳性）；染色体核型与分子异常特征明确（提供检测报告）。

使用时需注意：传代次数控制在 50 代内，超过上限可能导致 T 细胞标志物表达异常、免疫表型改变；开展免疫相关实验前，需将细胞同步化至对数生长期，通过离心（1000rpm，5 分钟）去除培养基中残留的细胞因子，避免干扰实验；细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的 RPMI-1640 专用冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时需在 37℃水浴中 1 分钟内快速融化，立即加入 5 倍体积新鲜培养基稀释，离心后弃上清接种，静置 24 小时待细胞恢复活性；进行药物处理或共培养实验时，需设置空白对照组、溶剂对照组及阳性对照组（如 JAK 抑制剂阳性组），每组至少 3 个复孔，减少实验误差，保证结果可靠性。

上一个：A673人横纹肌肉瘤细胞