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更新时间:2025-12-05
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A673人横纹肌肉瘤细胞是儿童软组织肿瘤研究领域的经典人源细胞系,1968年从一名15岁女性胚胎型横纹肌肉瘤患者的原发肿瘤组织中分离建立,归类为小圆细胞恶性肿瘤细胞。作为横纹肌肉瘤研究的标gan模型,该细胞系因稳定保留肿瘤细胞的分化特征、恶性表型及关键分子改变,成为解析疾病发病机制、开发诊断技术及筛选治疗药物的核心工具。
生物学特性方面,A673细胞呈现典型的小圆细胞或短梭形形态,体外培养以贴壁生长为主,部分细胞呈簇状聚集分布,细胞边界清晰,核质比显著升高,核仁大而明显,胞质内可见少量平行排列的肌丝样结构,提示其向骨骼肌分化的潜能。分子层面,该细胞高表达横纹肌肉瘤特异性标志物,包括肌动蛋白(α-SMA)、肌球蛋白重链(MyHC)及肌分化关键调控因子MyoD,这些标志物的稳定表达是其作为横纹肌肉瘤模型的核心依据。增殖特性上,A673细胞活性旺盛,倍增时间约24-30小时,同时具备较强的体外侵袭和迁移能力,在基质胶侵袭实验中可高效穿透人工基底膜,模拟肿瘤细胞的转移过程。此外,约60%的A673细胞克隆存在CDKN2A抑癌基因纯合缺失,这一分子特征与临床约30%的胚胎型横纹肌肉瘤患者高度吻合,为研究抑癌基因失活机制提供了天然模型。
体外培养A673细胞需严格把控环境与营养条件,zui适培养环境为37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱,推荐使用添加10%胎牛血清(FBS)、1%抗菌药物混合液的RPMI 1640培养基,添加2mM氨基戊二酸可进一步提升细胞活性。培养过程中需密切监测细胞密度,当融合度达到70%-80%时需及时传代,避免过度融合导致细胞分化状态改变。传代前用0.25%消化酶-EDTA溶液消化2分钟,待细胞间隙增大、形态变圆后加入wan全培养基终止消化,轻柔吹打制成单细胞悬液,传代比例以1:3-1:5为宜。需特别注意,该细胞贴壁能力中等,消化时间过长易导致细胞损伤,且培养基需每2天更换一次,避免乳酸等代谢废物积累影响细胞增殖。
研究应用中,A673细胞的价值具有鲜明的针对性。在肿瘤生物学研究中,其可用于探究横纹肌肉瘤细胞增殖调控通路(如MAPK/ERK通路)、肌分化异常与恶性转化的关联,以及肿瘤微环境对细胞侵袭能力的影响;在药物研发领域,该细胞系是横纹肌肉瘤治疗药物(如长春新碱)的核心筛选平台,可通过CCK-8法、集落形成实验评估药物的抗增殖活性,同时也是极光激酶抑制剂、CDK4/6抑制剂等靶向药物的体外评价模型;在分子机制研究中,利用其CDKN2A基因缺失特征,可深入分析p16INK4a-Rb通路异常在肿瘤发生发展中的作用机制。此外,A673细胞具有较强的裸鼠成瘤能力,接种后2-3周即可形成稳定肿瘤,常被用于构建体内移植瘤模型,为药物体内药效验证及转移机制研究提供支撑。
需注意的是,A673细胞仅代表胚胎型横纹肌肉瘤亚型,无法wan全模拟腺泡型横纹肌肉瘤(常存在PAX-FOXO1融合基因)的分子特征与生物学行为,实验结论需结合多亚型细胞模型及临床样本交叉验证。但凭借明确的细胞来源、稳定的生物学性能、清晰的分子特征及与临床的高度关联性,A673细胞仍是横纹肌肉瘤研究中不ke或缺的工具,持续为儿童软组织肉瘤的基础理论突破与临床治疗革新提供关键支撑。
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