HUV-EC-C人脐静脉内皮细胞与 HUVEC 特性相近，源自人脐静脉，贴壁呈 “铺路石" 样，具血管生成、分泌血管活性物质功能，可用于血管机制、心血管疾病及相关药物筛选研究。

HUV-EC-C人脐静脉内皮细胞

一、细胞基本生物学特性

HUV-EC-C人脐静脉内皮细胞源自健康新生儿脐静脉血管内皮组织，经体外分离纯化并通过永生化处理建立细胞株，是研究血管内皮细胞功能、血管生成机制及心血管疾病的重要体外模型。其保留了血管内皮细胞的核心生物学特征，且因永生化特性可长期传代，在心血管药理学、肿瘤血管生物学及再生医学研究中应用广泛。

形态上，该细胞呈典型上皮样形态，胞体为多边形或短梭形，胞质丰富且呈淡嗜酸性，细胞间通过紧密连接、黏附连接形成连续单层结构（免疫荧光染色可检测到 VE - 钙黏蛋白、ZO-1 等连接蛋白表达）；细胞核圆形或椭圆形，位于细胞中央，核仁 1-2 个，染色质分布均匀。体外培养以贴壁生长为主，形成特征性 “铺路石" 样排列，具备接触抑制特性，细胞融合度达 90% 以上时增殖速率减缓。生长特性方面，其增殖活性稳定，倍增时间约 24-36 小时，因永生化处理可稳定传代 50 代以上，且长期维持内皮细胞关键功能 —— 在基质胶上可形成管状结构，模拟血管生成过程；可分泌一氧化氮、前列环素等血管活性物质，调节血管舒张；表达 VEGFR2 等特异性受体，能响应 VEGF 等信号分子调控，与原代脐静脉内皮细胞功能高度一致。

分子表型上，该细胞高表达血管内皮特异性标志物，如血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）、血小板内皮细胞黏附分子 - 1（CD31）、冯・维勒布兰德因子（vWF）及血管内皮生长因子受体 2（VEGFR2）；同时表达一氧化氮合酶（eNOS）、血栓调节蛋白（TM）等功能蛋白，参与血管舒张、凝血平衡等生理过程。细胞内存在 VEGF-VEGFR2-PI3K/Akt、Notch 等内皮细胞te有序列，调控血管生成与内皮细胞分化成熟。其染色体核型经永生化处理后仍保持近二倍体特征，与人体脐静脉内皮细胞分子特征高度吻合，为血管相关研究提供稳定实验基础。

二、体外培养关键条件

HUV-EC-C 人脐静脉内皮细胞的体外培养需精准调控环境与营养，维持其内皮特性与功能：培养基选择上，shou选内皮细胞专用培养基（如 EGM-2 培养基），添加 10% 胎牛血清（FBS）、血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（bFGF）、胰岛素样生长因子（IGF-1），补充肝素（防细胞凝集）及抗坏血酸（促进细胞外基质合成）。培养基 pH 控制在 7.2-7.4，渗透压 280-300 mOsm/kg；开展血管生成实验时，需用无血清或 2% 低血清培养基，避免血清杂信号干扰。

培养环境需稳定在 37℃、5% CO₂饱和湿度培养箱，CO₂浓度波动≤±0.3%，温度偏差超 ±1℃会导致细胞贴壁能力下降、连接结构破坏。因细胞贴壁依赖性强，需用明胶或胶原蛋白 I 包被培养器皿，增强贴壁能力。传代管理核心：细胞融合度达 70%-80% 时传代，无菌 PBS 清洗 2 次后加细胞消化液，37℃孵育 1-2 分钟至细胞间隙增大，加含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液，按 1:2-1:3 比例接种至新包被培养瓶。需控制消化时间，避免细胞活性下降。此外，细胞对血清质量敏感，需选低内毒素（≤10 EU/mL）、批次一致的内皮细胞专用血清，劣质血清会使血管生成能力下降 40% 以上，丢失特异性标志物表达。

三、核心科研应用领域

依托永生化特性与内皮细胞功能，HUV-EC-C 人脐静脉内皮细胞在科研领域价值显著：

四、质量控制与使用注意事项

合格的 HUV-EC-C 人脐静脉内皮细胞需通过严格检测：细胞活力≥90%（台盼蓝染色）；无细菌、真菌、支原体污染（PCR 或培养法阴性）；免疫表型符合 VE-cadherin⁺CD31⁺vWF⁺VEGFR2⁺（免疫荧光或流式验证）；功能达标（基质胶管状形成≥50 个 / 视野，VEGF 诱导迁移率提升 30% 以上）；增殖稳定（倍增时间 24-36 小时）；染色体核型近二倍体（提供检测报告）。

使用时需注意：虽为永生化细胞，传代超 50 代仍需监测功能与标志物表达，避免特性退化；开展血管生成实验前，需将细胞接种至包被培养板 / Transwell，确保贴壁均匀；细胞冻存用含 10% DMSO、20% FBS 的内皮专用冻存液，梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后接种至包被培养瓶，静置 48 小时恢复功能；药物处理或功能实验需设空白与溶剂对照组，每组至少 3 个复孔，减少误差保证结果可靠。