HUVEC人脐静脉内皮细胞源自人脐静脉，贴壁生长呈铺路石样，具血管生成等功能，可用于血管生理、病理机制及心血管疾病药物筛选研究。

HUVEC人脐静脉内皮细胞

一、细胞基本生物学特性

HUVEC人脐静脉内皮细胞源自健康新生儿脐静脉血管内皮组织，经体外分离纯化培养建立，是研究血管内皮细胞生理功能、血管生成机制及心血管相关疾病的经典体外模型。其保留了血管内皮细胞的核心生物学特征，在心血管生理学、病理学、药理学及再生医学研究领域应用广泛。

形态上，该细胞呈典型上皮样形态，胞体为多边形或短梭形，胞质丰富且呈淡嗜酸性，细胞间通过紧密连接、黏附连接形成连续的单层细胞结构（免疫荧光染色可检测到 VE - 钙黏蛋白、ZO-1 等连接蛋白表达）；细胞核圆形或椭圆形，位于细胞中央，核仁 1-2 个，染色质分布均匀。体外培养以贴壁生长为主，形成单层 “铺路石" 样排列，具有明显的接触抑制特性，当细胞融合度达 90% 以上时，增殖速率显著减缓。生长特性方面，其增殖活性中等，倍增时间约 24-36 小时，常规培养条件下可稳定传代 5-8 代（原代细胞），经永生化处理的细胞株可传代更多次，且能长期维持内皮细胞的关键功能 —— 具备血管生成潜能，在基质胶上可形成管状结构；可分泌血管活性物质（如一氧化氮、前列环素）；表达血管内皮特异性受体（如 VEGFR2），能响应血管内皮生长因子（VEGF）等信号分子的调控，模拟体内血管内皮的生理功能。

分子表型上，该细胞高表达血管内皮特异性标志物，如血管内皮钙黏蛋白（VE-cadherin）、血小板内皮细胞黏附分子 - 1（CD31）、血管内皮生长因子受体 2（VEGFR2）及冯・维勒布兰德因子（vWF）；同时表达与血管功能相关的蛋白，包括一氧化氮合酶（eNOS）、血栓调节蛋白（TM）等，参与血管舒张、凝血平衡等生理过程。细胞内存在血管内皮te有的信号通路，如 VEGF-VEGFR2-PI3K/Akt 通路（调控血管生成）、Notch 通路（调控内皮细胞分化与血管成熟），这些通路共同维持血管内皮的功能稳态。其染色体核型为正常二倍体（原代细胞），与人体脐静脉内皮细胞的分子特征高度吻合，为血管相关研究提供可靠的体外实验基础。

二、体外培养关键条件

HUVEC 人脐静脉内皮细胞的体外培养需精准调控营养环境与培养条件，以维持其内皮特性与血管功能：培养基选择上，shou选内皮细胞专用培养基（如 EGM-2 培养基），需添加 10% 胎牛血清（FBS）、血管内皮生长因子（VEGF）、成纤维细胞生长因子（bFGF）、胰岛素样生长因子（IGF-1）等细胞因子，同时补充肝素（防止细胞凝集）及抗坏血酸（促进细胞外基质合成）。培养基 pH 值需严格控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-300 mOsm/kg；若开展血管生成实验，需使用不含血清或低血清（2% FBS）的培养基，避免血清中杂信号干扰实验结果。

培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度的培养箱中，CO₂浓度波动需≤±0.3%，温度偏差超过 ±1℃会导致细胞贴壁能力下降，甚至破坏细胞间连接结构。由于该细胞贴壁依赖性强，需使用经明胶或胶原蛋白 I 包被的培养器皿，增强细胞贴壁能力，维持上皮形态。传代管理是培养核心：当细胞融合度达 70%-80% 时需及时传代（原代细胞避免过度增殖导致功能退化），操作前用无菌 PBS 清洗细胞 2 次，加入细胞消化液，37℃孵育 1-2 分钟至细胞边缘收缩、间隙增大，立即加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液（避免用力过猛破坏细胞连接），按 1:2-1:3 比例接种至新的包被培养瓶。需注意消化时间不宜过长，否则易导致细胞活性下降。此外，细胞对血清质量敏感，需选用低内毒素（≤10 EU/mL）、批次间一致性高的内皮细胞专用血清，劣质血清会使血管生成能力下降 40% 以上，甚至丢失内皮特异性标志物表达。

三、核心科研应用领域

依托与正常血管内皮细胞的高度功能相似性，HUVEC 人脐静脉内皮细胞在科研领域具有显著价值：

四、质量控制与使用注意事项

合格的 HUVEC 人脐静脉内皮细胞需通过严格的质量检测：细胞活力需≥92%（台盼蓝染色法）；无细菌、真菌、支原体污染（PCR 法或培养法检测结果为阴性）；免疫表型符合 VE-cadherin⁺CD31⁺vWF⁺VEGFR2⁺特征（免疫荧光或流式细胞术验证）；功能指标达标（基质胶上管状形成数量≥50 个 / 视野，VEGF 诱导后迁移率提升 30% 以上）；增殖速率稳定（倍增时间 24-36 小时，原代细胞）；染色体核型为正常二倍体（原代细胞，需提供检测报告）。

使用时需注意：原代细胞传代次数控制在 8 代内，超过上限可能导致内皮特异性功能下降、标志物表达减少；开展血管生成实验前，需将细胞接种至包被后的培养板 / Transwell 小室，确保细胞贴壁均匀；细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的内皮细胞专用冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时需在 37℃水浴中 1 分钟内快速融化，离心去除冻存液后接种至包被培养瓶，静置 48 小时待细胞wan全恢复贴壁与功能后再开展实验；进行药物处理或功能实验时，需设置空白对照组与溶剂对照组，每组至少 3 个复孔，减少实验误差，保证结果可靠性。