INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞源自大鼠胰岛肿瘤，贴壁生长，可分泌胰岛素且受葡萄糖调控，常用于糖尿病机制、胰岛功能及降糖药物筛选研究。

INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞

一、细胞基本生物学特性

INS-1大鼠胰岛细胞瘤细胞源自 X 射线诱导的大鼠胰岛肿瘤，经体外筛选克隆获得，是研究胰岛 β 细胞功能、胰岛素分泌调控及糖尿病发病机制的经典体外模型，因保留正常胰岛 β 细胞的核心功能特征，在代谢病学与药理学研究领域应用广泛。

形态上，该细胞呈上皮样或多边形，胞体大小较均一，直径约 10-15μm，胞质丰富且含细小分泌颗粒（胰岛素颗粒，免疫荧光染色呈阳性）；细胞核圆形或椭圆形，核仁 1-2 个，体外培养以贴壁生长为主，呈单层片状排列，部分区域细胞密度较高时可形成局部堆积，无严格接触抑制特性。生长特性方面，其增殖活性中等，倍增时间约 48-72 小时，常规培养条件下可稳定传代 50 代以上，且能长期维持胰岛 β 细胞的关键功能 —— 具备葡萄糖依赖性胰岛素分泌能力，当培养基中葡萄糖浓度从低糖（2.8mmol/L）升至高糖（16.7mmol/L）时，胰岛素分泌量可提升 3-5 倍，同时可响应胰高血糖素样肽 - 1（GLP-1）、 forskolin 等促分泌因子，模拟正常胰岛 β 细胞的功能响应模式。

分子表型上，该细胞高表达胰岛 β 细胞特异性标志物，如胰岛素（Insulin）、葡萄糖转运体 2（GLUT2）、葡萄糖激酶（GCK），同时表达与胰岛素分泌相关的离子通道蛋白（如 Kir6.2、SUR1 组成的 ATP 敏感性钾通道）；细胞内存在胰岛 β 细胞te有的信号通路（如 cAMP-PKA 通路、Ca²⁺- 钙调蛋白通路），可通过葡萄糖代谢触发胰岛素颗粒胞吐；染色体核型呈近二倍体，存在少量染色体数目变异，与大鼠胰岛 β 细胞的分子特征高度吻合，为胰岛功能研究提供可靠实验基础。

二、体外培养关键条件

INS-1 大鼠胰岛细胞瘤细胞的体外培养需精准调控营养与环境，以维持其胰岛素分泌功能与葡萄糖响应特性：培养基选择上，shou选 RPMI-1640 培养基，需添加 10% 胎牛血清（FBS）、1mmol/L 丙酮酸钠、50μmol/L β- 巯基乙醇及 1% 非必需氨基酸（NEAA），培养基葡萄糖浓度需稳定在 11.1mmol/L（兼顾细胞增殖与功能维持）；若开展葡萄糖响应实验，需提前准备低糖（2.8mmol/L）与高糖（16.7mmol/L）培养基，避免葡萄糖浓度波动影响实验结果。

培养环境需稳定在 37℃恒温、5% CO₂浓度及饱和湿度，CO₂浓度波动≤±0.3%，温度偏差超过 ±1℃会导致细胞贴壁能力下降，胰岛素分泌功能减弱；pH 值需维持在 7.2-7.4，渗透压控制在 280-300 mOsm/kg，过高或过低渗透压会损伤细胞分泌颗粒。传代管理是培养核心：当细胞融合度达 80%-90% 时需及时传代，操作前用无菌 PBS 清洗细胞 2 次，加入 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化液，37℃孵育 2-3 分钟至细胞间隙增大，加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液，按 1:3-1:4 比例接种至新培养瓶；需避免消化过度导致细胞活性下降，传代后 24 小时内不移动培养瓶，确保细胞稳定贴壁。此外，细胞对血清质量敏感，需选用低内毒素（≤10 EU/mL）、批次间一致性高的 FBS，劣质血清会导致细胞葡萄糖响应能力下降 40% 以上，甚至丢失胰岛素分泌功能。

三、核心科研应用领域

依托与正常胰岛 β 细胞的功能相似性，INS-1 大鼠胰岛细胞瘤细胞在科研领域价值显著：

四、质量控制与使用注意事项

合格的 INS-1 大鼠胰岛细胞瘤细胞需通过严格质量检测：细胞活力≥90%（台盼蓝染色法）；无细菌、真菌、支原体污染（PCR 法或培养法检测阴性）；免疫表型符合 Insulin⁺GLUT2⁺GCK⁺特征（免疫荧光或 Western Blot 验证）；葡萄糖响应能力达标（高糖诱导后胰岛素分泌量为低糖组的 3 倍以上，ELISA 检测）；增殖速率稳定（倍增时间 48-72 小时）。

使用时需注意：传代次数控制在 40 代内，超过传代上限可能导致 GLUT2、GCK 表达下降，葡萄糖响应能力减弱；开展胰岛素分泌实验前，需将细胞同步化至低糖培养基培养 12 小时，排除内源性激素干扰；细胞冻存需使用含 10% DMSO、20% FBS 的 RPMI-1640 专用冻存液，梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏后需培养 2-3 代，待细胞功能恢复后再开展实验；进行药物处理实验时，需设置低糖、高糖对照组及溶剂对照组，每组至少 3 个复孔，减少实验误差，保证结果可靠性。