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更新时间:2025-11-20
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CHO仓鼠卵巢细胞于1957年从成年中国仓鼠卵巢组织中分离建立,是生物制药与分子生物学领域的“明星细胞系"。其兼具高效外源蛋白表达能力、稳定遗传背景及良好培养适应性,不仅是重组蛋白药物生产的核心载体,也为基因功能验证提供可靠工具,在生物制药工业与基础科研中应用广泛。
CHO细胞的核心优势体现在“高蛋白表达潜能+优良培养特性"。细胞呈上皮样,多为多边形或短梭形,胞质丰富,细胞核大而圆,核仁明显,可适应贴壁或悬浮培养,工业生产中常用悬浮模式提升细胞密度。遗传学上为亚二倍体核型,DHFR等基因缺陷便于筛选高表达株,且拥有完善的蛋白修饰系统,能对重组蛋白进行正确糖基化、磷酸化修饰,保障蛋白活性与天然状态一致。该细胞内源性抗体表达低,减少蛋白纯化干扰,且无病毒致病因子,生物安全性高。增殖能力优异,贴壁培养倍增周期18-24小时,悬浮培养可缩短至12-18小时,传代稳定,长期培养仍保持外源蛋白表达能力。
标准化培养保存是维持其蛋白表达能力的关键。贴壁培养用DMEM/F12培养基加10%胎牛血清;悬浮培养采用无血清培养基,补充胰岛素、转铁蛋白等营养因子。培养环境需严格控制在37℃、5%二氧化碳及饱和湿度,最佳pH值7.2-7.4。贴壁培养细胞融合度80%-90%时传代,PBS冲洗后加解离液孵育2-3分钟,血清终止后按1:4-1:6接种;悬浮培养细胞密度达5×10^6-1×10^7个/mL时,按1:3稀释传代。冻存用含10%DMSO、40%胎牛血清及50%培养基的冻存液,细胞密度调至2×10^7个/mL,梯度降温后存液氮;复苏时37℃快速解冻,离心去DMSO后重悬接种,成活率超95%,蛋白表达能力稳定。
CHO细胞的应用价值聚焦生物制药、基因工程及蛋白研究。生物制药领域,它是全球重组蛋白药物生产的shou选细胞系,支撑70%以上相关药物生产,可制备赫赛汀等单克隆抗体、EPO等细胞因子及各类疫苗。基因工程中,通过基因编辑可构建稳定表达外源基因的细胞株,用于蛋白结构解析、相互作用研究及信号通路分析。蛋白功能研究中,其高效表达的重组蛋白为酶活性测定、抗体开发提供足量原料。此外,还可构建GPCR稳定表达细胞株用于药物筛选,在生物反应器优化、无血清培养基开发等工艺研究中也不ke或缺,通过优化培养条件能提升重组抗体产量、降低药价,是连接基础科研与工业生产的核心桥梁。
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