CT26.WT小鼠结肠癌细胞

CT26.WT小鼠结肠癌细胞源于BALB/c小鼠的诱发性结肠癌组织，是通过N-亚硝基-N-甲基脲（MNU）诱导建立的高分化结肠腺癌细胞系。自20世纪70年代建株以来，因其与临床结肠癌高度相似的病理特征及稳定的生物学性能，成为结直肠癌研究领域应用zui广泛的小鼠肿瘤模型之一，尤其在肿瘤免yi治疗、转移机制及药物筛选研究中发挥着核心作用。

CT26.WT细胞的生物学特性集中体现为典型的结肠腺癌细胞特征与优异的免疫研究适配性。细胞形态呈上皮样，多为多边形或短梭形，胞质丰富，细胞核大而不规则，核仁清晰可见，体外培养以贴壁生长为主，融合后形成致密的细胞单层，生长状态稳定。免疫表型鉴定显示，该细胞表达结肠上皮特异性标志物细胞角蛋白18（CK18）、癌胚抗原（CEA），同时高表达肿瘤相关抗原gp70，这一特性使其成为肿瘤疫苗研发及免疫应答研究的理想靶点。遗传学方面，CT26.WT细胞存在KRAS基因突变、β-连环蛋白（β-catenin）异常激活等结肠癌典型分子特征，与临床散发性结肠癌的分子谱高度契合。增殖性能上，其倍增周期约为24-36小时，成瘤性ji强，在同源BALB/c小鼠皮下、腹腔或原位移植成瘤率均达100%，且可自发形成肺转移灶，wan美模拟临床结肠癌的侵袭转移过程。

标准化的培养与保存流程是维持CT26.WT细胞活性及生物学特性的关键。体外培养推荐使用RPMI1640培养基，添加10%胎牛血清提供营养支持，培养环境需严格控制在37℃、5%二氧化碳及饱和湿度的恒温培养箱中。当细胞融合度达到70%-80%时进行传代最佳，传代前先用PBS缓冲液轻柔冲洗细胞2次，加入细胞解离液孵育2-4分钟至细胞边缘收缩，再加入含血清的培养基终止解离，吹打均匀后按1:3-1:5比例接种至新培养瓶。冻存时采用含10%DMSO、40%胎牛血清及50%培养基的专用冻存液，将细胞密度调整为1×10^7个/mL，经4℃（30分钟）、-20℃（2小时）、-80℃（过夜）梯度降温后转入液氮长期保存；复苏时需在37℃水浴中快速解冻，离心去除DMSO后用新鲜培养基重悬接种，复苏成活率可达95%以上，且复苏后细胞特性保持稳定。

CT26.WT细胞的科研应用价值贯穿结直肠癌研究的多个核心领域，尤其在肿瘤免疫研究中优势突出。在免yi治疗研发方面，其同源BALB/c小鼠模型可精准评估CAR-T细胞治疗、免疫检查点抑制剂（如PD-1/PD-L1抗体）、肿瘤疫苗等疗法的疗效，是免yi治疗转化研究的金标准模型，众多临床前研究通过该模型证实了免疫疗法对结肠癌的抑制效果。在发病机制研究中，借助其典型的分子变异特征，可深入探究KRAS/RAF信号通路、Wnt/β-catenin通路在结肠癌发生发展中的调控作用，为揭示肿瘤恶性转化机制提供直接实验依据。在药物研发领域，该细胞系是抗结肠癌药物筛选的核心工具，可用于评估hua疗药物、靶向药物及联合治疗方案的疗效与安全性，同时其转移模型可用于筛选抑制肿瘤侵袭转移的新型药物。此外，CT26.WT细胞还广泛应用于肿瘤微环境调控、肿瘤-免疫细胞相互作用及放疗敏感性研究等方向，是结直肠癌基础研究与临床转化中不ke或缺的重要实验材料。