HCT 116 [HCT116]人结直肠腺癌细胞

HCT 116 [HCT116]人结直肠腺癌细胞是结直肠癌研究领域的标gan性体外模型，以典型的微卫星不稳定（MSI-H）表型、明确的遗传背景及高基因编辑敏感性为核心特征，在结直肠癌发病机制、遗传稳定性调控及精准治疗研发中占据核心地位。

一、细胞来源与核心特征

该细胞系源自50岁男性结直肠腺癌患者的原发肿瘤组织，体外分离培养建立。其MSI-H表型与遗传性非息肉病性结直肠癌（Lynch综合征）高度契合，是研究DNA错配修复缺陷相关肿瘤的理想模型。

形态上，HCT 116细胞呈上皮样，贴壁生长且排列紧密，细胞质丰富，细胞核大而规则，核仁清晰，核质比高于正常结直肠上皮细胞。染色体为非整倍体（45-48条），存在MLH1基因缺失导致的错配修复功能缺陷，微卫星序列不稳定，为遗传机制研究提供天然材料。

功能上，其zui显著特征是MSI-H表型，DNA错配修复能力缺失导致基因突变积累速率显著升高。细胞增殖能力强，S期细胞比例高，凋亡率受DNA损伤药物调控敏感。侵袭迁移能力中等，体外可模拟结直肠癌局部浸润过程。高表达CEA、CK20等标志物，Wnt/β-catenin通路异常激活，且基因编辑效率高，是CRISPR技术常用模型。

二、培养条件与操作

培养需控制37℃、5% CO₂环境，维持培养基pH 7.2-7.4。常用McCoy's 5A培养基，添加10%优质胎牛血清及广谱抗菌试剂，满足高增殖需求并预防污染。该细胞对营养波动较敏感，建议使用稳定批次血清。

传代时用PBS洗涤细胞2次，加细胞消化液37℃孵育2-3分钟，待细胞边缘变圆后用血清培养基终止消化，轻柔吹打制成单细胞悬液，按1:3-1:5比例接种。因贴壁能力较强，需避免过度消化影响活性。

长期培养需每2-3天换液，细胞密度达70%-80%时传代。定期用台盼蓝检测活性（活细胞率≥90%），并通过PCR验证微卫星不稳定性，确保细胞核心表型稳定。

三、核心研究应用

1. 遗传机制研究：用于解析DNA错配修复缺陷导致MSI-H的分子机制，探索MLH1缺失在结直肠癌发生中的作用，为Lynch综合征研究提供依据。

2. 药物敏感性研究：评估免疫检查点抑制剂（如PD-1抗体）及DNA损伤类药物的疗效，分析MSI-H亚型的治疗应答特征，为精准治疗提供数据。

3. 基因功能研究：借助高基因编辑效率，构建基因敲除/敲入细胞系，验证结直肠癌相关基因功能，为靶点发现提供可靠模型。

四、优势与局限

优势在于MSI-H表型稳定，遗传背景明确，是错配修复缺陷研究的金标准；基因编辑敏感性高，实验可重复性强；适配机制研究与药物研发多场景。局限是无法模拟微卫星稳定型结直肠癌，需结合HT-29等细胞验证；缺乏体内肠道微环境，部分结果需动物模型确认；长期培养可能出现MSI表型弱化，需定期验证。

综上，HCT 116细胞凭借独特的MSI-H表型及遗传特征，成为结直肠癌研究不ke或缺的工具。通过多模型互补验证，其在遗传机制、精准治疗研发中价值显著，为消化道肿瘤研究提供重要支撑。