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KM932EB病毒转化的人B淋巴细胞
产品简介:

KM932EB病毒转化的人B淋巴细胞,由 EB 病毒转化人 B 淋巴细胞建立,呈悬浮生长,保留 B 细胞功能,培养稳定,常用于 EB 病毒研究、免疫机制实验及相关疾病药物筛选。

产品型号:试剂盒

更新时间:2025-11-06

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KM932EB病毒转化的人B淋巴细胞

KM932EB病毒转化的人B淋巴细胞是通过 EB 病毒(Epstein-Barr Virus,EBV)体外转化健康人外周血 B 淋巴细胞建立的永生化细胞系,核心特征为保留 B 淋巴细胞的免疫表型、EB 病毒潜伏感染状态及稳定的体外增殖能力,可在体外模拟 EB 病毒感染 B 淋巴细胞后的生理病理过程,是研究 EB 病毒致病机制、B 淋巴细胞功能调控、免疫应答及相关疾病药物筛选的关键工具,在病毒学、免疫学、血液肿瘤学及临床医学领域具有不可替代的应用价值。

从细胞来源与形态功能特征来看,KM932 细胞的建立为 EB 病毒与 B 淋巴细胞相互作用研究提供了理想模型 —— 科研人员选取健康人外周血样本(经伦理审批),通过密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,利用免疫磁珠分选技术纯化 CD19⁺ B 淋巴细胞;在体外培养体系中加入 EB 病毒(通常为 B95-8 细胞分泌的病毒颗粒),诱导病毒感染 B 淋巴细胞;历经 2-4 周培养,筛选出持续增殖、形态均一且携带 EB 病毒基因组的细胞群体,确立 KM932EB 病毒转化的人 B 淋巴细胞系。该细胞严格保留 EB 病毒转化 B 淋巴细胞的核心特征:显微镜下呈圆形或类圆形悬浮生长,部分细胞聚集成团,胞体中等大小(直径 10-15μm),胞质丰富且含少量嗜碱性颗粒(瑞氏染色可见胞质呈淡蓝色);细胞核呈圆形或椭圆形,位于细胞中央,染色质疏松,核仁清晰(1-2 个);免疫表型检测显示,细胞高表达 B 淋巴细胞特异性标志物(CD19 阳性率 98% 以上、CD20 阳性率 95% 以上、CD21 阳性率 90% 以上,CD21 为 EB 病毒受体),同时表达 EB 病毒潜伏感染相关蛋白(EBNA-1 阳性率 96% 以上、LMP-1 阳性率 92% 以上),与体内 EB 病毒潜伏感染的 B 淋巴细胞表型高度一致。功能上,KM932 细胞保留 B 淋巴细胞的部分免疫功能:可在特定刺激下(如 PMA + 离子霉素)分泌免疫球蛋白(如 IgM,ELISA 检测显示每 10⁶细胞 24 小时分泌量达 1-2μg),且能响应免疫信号进行活化增殖,为 EB 病毒感染对 B 淋巴细胞功能影响的研究提供功能学基础。

在核心生物学特性方面,KM932 细胞凭借 “EB 病毒潜伏感染稳定、B 细胞功能保留、增殖可控" 的优势,成为多场景研究的理想模型。其一,稳定的 EB 病毒潜伏感染状态与永生化特性:作为 EB 病毒转化的细胞系,KM932 细胞的核心优势在于携带完整 EB 病毒基因组且处于稳定潜伏感染状态(主要为潜伏 Ⅱ 型,与 EB 病毒相关淋巴瘤感染类型一致),病毒基因组不整合入宿主细胞染色体,但可随细胞分裂稳定传递,传代 50 次以上仍能检测到 EB 病毒潜伏蛋白(EBNA-1、LMP-1)表达及病毒 DNA;同时,EB 病毒感染使 B 淋巴细胞获得永生化能力,体外培养时增殖稳定,倍增时间约 48-60 小时,不同传代批次(第 10-80 代)的增殖速率差异<10%,无明显衰老迹象(如细胞体积增大、活力下降),遗传背景稳定,为长期研究 EB 病毒潜伏感染机制提供可靠支撑。其二,可控的 EB 病毒激活与 B 细胞功能调控:KM932 细胞的 EB 病毒感染状态与 B 细胞功能可通过体外条件精准调控 —— 常规培养下,细胞维持 EB 病毒潜伏感染,B 细胞功能处于基础状态;加入 EB 病毒激活剂(如丁酸钠、佛波酯)后,48-72 小时内可诱导 EB 病毒从潜伏感染进入裂解感染状态,病毒裂解相关蛋白(ZEBRA、RTA)表达显著升高,病毒颗粒分泌量增加(病毒滴度可达 10⁴-10⁵ TCID₅₀/mL),模拟体内 EB 病毒激活过程;而在免疫信号刺激下(如 IL-4、CD40L),细胞免疫球蛋白分泌量提升 3-4 倍,B 细胞活化标志物(CD80、CD86)表达上调,为研究 B 淋巴细胞活化与免疫应答机制提供可控模型。其三,明确的病毒响应与疾病模拟特性:该细胞对 EB 病毒相关疾病的研究具有天然优势 —— 因携带 EB 病毒基因组,可用于模拟 EB 病毒相关淋巴瘤(如 Burkitt 淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤)的部分病理特征,如 LMP-1 过表达可诱导细胞出现类似淋巴瘤细胞的增殖特性(增殖速率提升 20%-30%)、抗凋亡能力增强(凋亡率下降 40%-50%);同时,对 EB 病毒靶向药物表现出稳定的剂量依赖性响应,如阿xi洛韦(EB 病毒 DNA 聚合酶抑制剂)处理后,病毒裂解感染率随药物浓度升高而下降,IC50 值稳定在 5-10μmol/L,且药物作用机制与体内一致,为 EB 病毒相关疾病药物研发提供理想模型。

在体外培养与维护细节上,KM932 细胞的操作需注重 “维持悬浮状态与 EB 病毒潜伏感染稳定"。培养时,推荐使用普通培养瓶(无需包被),培养基选用 RPMI 1640+15% 胎牛血清(血清浓度高于普通细胞,满足 B 淋巴细胞营养需求)+1% 抗菌试剂,pH 值控制在 7.2-7.4;细胞接种密度推荐 5×10⁴-1×10⁵ cells/mL(如 T25 培养瓶接种 5-10mL 细胞悬液),密度过低易导致细胞生长缓慢,过高则出现细胞过度聚集(需定期轻轻吹打分散,避免剧烈摇晃破坏细胞);传代时,无需消化处理,直接取对数生长期细胞悬液,按 1:2-1:3 的比例加入新鲜培养基即可,传代间隔 2-3 天;细胞冻存需选择对数生长期细胞(确保复苏后 EB 病毒潜伏感染状态稳定),采用含 10% DMSO 的血清冻存液,梯度降温(4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存),复苏后存活率达 85% 以上,复苏后需培养 1-2 代,待细胞活力与 EB 病毒感染状态恢复稳定后再用于实验。

在科研与应用领域,KM932 细胞的 “EB 病毒转化特性" 使其覆盖多个关键研究方向。其一,EB 病毒致病机制研究:该细胞是解析 EB 病毒潜伏感染与致癌机制的核心模型 —— 研究发现,KM932 细胞中 EB 病毒潜伏蛋白 LMP-1 可通过激活 NF-κB、MAPK 等信号通路,促进细胞异常增殖与抗凋亡;沉默 LMP-1 基因后,细胞增殖抑制率达 60% 以上,凋亡率升高,明确 LMP-1 在 EB 病毒相关肿瘤发生中的关键作用;同时,通过检测细胞内 EB 病毒基因组复制、潜伏蛋白表达调控机制,可为 EB 病毒潜伏感染维持与激活的分子机制研究提供实验依据。其二,B 淋巴细胞功能与免疫应答研究:KM932 细胞可用于 B 淋巴细胞活化、分化与免疫球蛋白分泌机制研究 —— 通过添加不同细胞因子(如 IL-2、IL-10)或免疫信号分子,观察细胞增殖、分化标志物(如 CD38、CD138)及免疫球蛋白分泌的变化,明确 IL-10 可促进细胞向浆细胞分化(CD138 阳性率提升 40%),为 B 淋巴细胞免疫功能调控研究提供支持;同时,可用于研究 EB 病毒感染对 B 淋巴细胞免疫功能的影响,如 EB 病毒感染可抑制 B 淋巴细胞对 T 细胞信号的响应,导致免疫功能紊乱,为 EB 病毒相关免疫疾病机制研究提供数据。其三,EB 病毒相关疾病药物研发与筛选:该细胞是 EB 病毒相关疾病药物临床前研究的重要工具 —— 在抗病du药物研发中,利用 KM932 细胞构建 EB 病毒裂解感染模型,筛选抑制病毒复制的药物,如新型 EB 病毒 DNA 聚合酶抑制剂处理后,病毒滴度下降 10³-10⁴倍;在抗肿瘤药物研发中,针对 EB 病毒潜伏蛋白(如 LMP-1)设计靶向药物,检测药物对细胞增殖与凋亡的影响,如 LMP-1 抑制剂处理后,细胞增殖抑制率达 70% 以上,且对正常 B 淋巴细胞毒性较低,为 EB 病毒相关肿liu治疗药物研发提供依据。其四,EB 病毒检测与诊断技术研究:KM932 细胞可作为 EB 病毒检测的阳性对照与标准品 —— 因稳定携带 EB 病毒基因组且能分泌病毒颗粒,可用于 EB 病毒核酸检测(如 PCR)、抗体检测(如 ELISA)试剂盒的研发与质量控制;同时,可用于 EB 病毒分离培养技术的优化,为临床 EB 病毒感染诊断技术改进提供支持。

综上,KM932EB 病毒转化的人 B 淋巴细胞凭借 “EB 病毒潜伏感染稳定、B 细胞功能保留、科研适用性强" 的特性,成为 EB 病毒与 B 淋巴细胞相关研究领域的 “特异性工具细胞"。其在 EB 病毒致病机制、免疫调控、药物研发等领域的应用,不仅推动了病毒学与免疫学的发展,更在 EB 病毒相关疾病的诊断、治疗及预后评估中发挥关键作用,为揭示 EB 病毒感染的分子机制与临床转化研究提供重要实验依据,具有不可替代的科学价值与应用前景。


 

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