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更新时间:2025-11-19
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FDC-P1小鼠骨髓细胞
FDC-P1小鼠骨髓细胞是免疫学和血液学研究领域中一款具有里程碑意义的小鼠造血细胞系。它因其独特的细胞因子依赖特性,成为了解造血发育、细胞信号转导及癌症生物学不ke或缺的重要工具。
FDC-P1细胞系起源于DBA/2品系小鼠的骨髓,属于髓样淋巴细胞系。其zui显著和核心的特征是严格的细胞因子依赖性。
白细胞介素-3依赖:最初的FDC-P1细胞需要在小鼠白细胞介素-3的持续存在下才能存活和增殖。IL-3是一种主要由活化T细胞产生的细胞因子,在早期造血过程中,特别是髓系和淋巴系祖细胞的存活、增殖与分化中起着关键作用。
表型特征:FDC-P1细胞在形态上类似于未成熟的髓系前体细胞或早幼粒细胞。它们不表现出成熟巨噬细胞或粒细胞的特性,而是停滞在一个依赖于生长因子的增殖阶段。
永生化但非恶性:尽管FDC-P1细胞是“永生化"的,可以在体外无限传代,但它们在最初并非wan全恶性。将其移植到同系小鼠体内通常不会形成肿瘤,除非其内在的信号通路发生改变。
FDC-P1细胞的价值主要体现在其作为“生物传感器"的功能上,能够灵敏地响应特定的细胞因子和信号通路。
细胞因子研究与信号转导
因子检测:FDC-P1细胞曾被广泛用作一种生物测定工具,来检测样品中IL-3的活性或浓度。通过观察细胞的增殖情况(如MTT法或³H-胸苷掺入法),可以量化IL-3的水平。
信号通路解析:研究人员利用FDC-P1细胞深入研究了IL-3受体激活后的下游信号事件,包括JAK-STAT通路、MAPK通路和PI3K-Akt通路。这些研究对于理解细胞存活、增殖和凋亡的调控机制至关重要。
生长因子依赖性及癌变模型
癌基因发现:FDC-P1细胞是研究癌基因如何解除生长因子依赖性的经典模型。当引入特定的癌基因(如v-abl, bcr-abl, 突变型Ras等)后,FDC-P1细胞会获得在无IL-3条件下的自主生长能力,模拟了白血病的恶性转化过程。这为理解癌症的发生和发展提供了直接证据。
凋亡研究:撤除IL-3会诱导FDC-P1细胞迅速发生程序性死亡(凋亡)。因此,该细胞系也常用于研究细胞因子撤除所引发的凋亡信号通路,以及抗凋亡基因(如Bcl-2)的功能。
受体功能研究
通过基因工程手段,将不同物种(如人)的细胞因子受体(如GM-CSF受体、IL-5受体)在FDC-P1细胞中表达,可以研究这些受体的功能、配体特异性及信号传导能力。因为FDC-P1细胞本身提供了一个清晰的、无背景干扰的读数系统——细胞的增殖。
药物筛选与白血病研究
FDC-P1细胞及其转化的亚系(如表达BCR-ABL的FDC-P1)被用于筛选和评估针对特定信号通路的小分子抑制剂。例如,它们可以用于测试早期酪an酸激酶抑制剂的效果,为白血病药物的开发提供临床前模型。
培养基:通常使用RPMI-1640培养基,并添加10%胎牛血清。最关键的是,必须补充适量的条件培养基(如表达IL-3的WEHI-3B细胞上清)或重组小鼠IL-3。
培养条件:作为悬浮细胞生长,标准条件为37°C,5% CO₂。需要定期传代以维持最佳密度。
注意事项:
依赖性验证:定期在不含IL-3的培养基中培养细胞,以确认其依赖性未丢失,防止因自发突变产生因子非依赖性细胞而影响实验结果的准确性。
支原体污染:像所有常用细胞系一样,需定期检测并防止支原体污染。
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