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人葡萄膜黑色素细胞
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人葡萄膜黑色素细胞源于眼部葡萄膜(虹膜、睫状体、脉络膜),含黑色素颗粒,具光吸收、眼部组织保护功能,可体外培养,是研究眼生理、色素相关眼病的重要实验材料。

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更新时间:2025-10-13

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人葡萄膜黑色素细胞

人葡萄膜黑色素细胞是位于眼部葡萄膜组织内的特异性色素细胞,葡萄膜作为眼球壁的中层结构,由前向后分为虹膜、睫状体与脉络膜三部分,这类细胞便广泛分布于这三个区域,且在不同区域呈现出功能与形态的细微差异,是维持眼部正常生理功能与视觉健康的关键细胞类型之一。从形态上看,这类细胞呈梭形或树突状,胞质内富含大量黑色素颗粒 —— 黑色素颗粒由细胞内的黑素小体合成,其数量与分布直接决定了虹膜的颜色(如黑色、棕色、蓝色等),同时也赋予细胞独特的光吸收能力。此外,细胞表面表达黑色素细胞特异性标志物,如酪an酸酶(TYR,黑色素合成关键酶)、黑素小体相关蛋白 1(PMEL17),这些标志物不仅是鉴别细胞身份的重要依据,也是其执行色素相关功能的分子基础。因在眼部光保护、色素代谢及眼病发生中具有特殊作用,这类细胞成为研究眼部生理机制、色素相关眼病病理过程的核心实验模型,在眼科学、细胞生物学及药理学领域应用广泛。

从细胞来源与组织分布来看,葡萄膜黑色素细胞在葡萄膜的不同区域承担着差异化功能:虹膜中的细胞主要分布于虹膜基质层与前界膜下方,其含有的黑色素颗粒可通过调节进入眼内的光线强度,避免过量光线损伤视网膜感光细胞,同时虹膜颜色也由这些细胞的黑色素含量决定;睫状体中的细胞分布于睫状肌与睫状上皮之间,除参与光吸收外,还可通过分泌细胞因子(如转化生长因子 β,TGF-β)调节睫状体的收缩功能,间接影响晶状体的屈光调节;脉络膜中的细胞则密集分布于脉络膜基质层,形成连续的色素细胞层,一方面通过强烈的光吸收能力减少光线在眼内的散射,提升视觉成像质量,另一方面可保护脉络膜血管与视网膜外层组织免受紫外线等有害光线的损伤。这种广泛且差异化的分布,使得葡萄膜黑色素细胞在眼部整体功能调节中发挥着多维度作用。

在核心生理功能方面,葡萄膜黑色素细胞的作用集中体现在 “光吸收与视觉保护"“黑色素合成与代谢调节"“眼部微环境维持" 三大维度,各功能相互协同,保障眼部组织的健康与视觉功能的稳定。光吸收与视觉保护是其最核心的功能 —— 细胞内的黑色素颗粒对可见光、紫外线均具有强大的吸收能力,尤其是脉络膜中的黑色素细胞,可吸收进入眼内的多余光线,减少光线在眼球内部的反射与散射,避免杂散光干扰视网膜成像,提升视觉清晰度;同时,黑色素还能中和光线照射产生的活性氧(如超氧阴离子、过氧化氢),减少氧化应激对视网膜感光细胞、脉络膜血管的损伤,预防光诱导性视网膜病变的发生。

黑色素合成与代谢调节功能则依赖于细胞内复杂的酶促反应 —— 酪an酸酶是黑色素合成的关键限速酶,可催化酪an酸转化为多巴,进而逐步合成黑色素;这一过程受多种因素调控,如紫外线照射可激活酪an酸酶活性,促进黑色素合成,以增强光保护能力;而细胞因子(如干细胞因子,SCF)则通过与细胞表面受体结合,调节黑素小体的成熟与黑色素颗粒的分布,维持黑色素代谢的平衡。一旦黑色素合成或代谢出现异常,可能导致虹膜颜色异常、色素沉着过度或减退,甚至引发色素相关眼病。眼部微环境维持功能体现在细胞与周围组织的相互作用中 —— 葡萄膜黑色素细胞可分泌多种细胞因子与生长因子(如血管内皮生长因子,VEGF、成纤维细胞生长因子,bFGF),调节脉络膜血管的生成与稳定,为视网膜外层组织提供充足的血液供应与营养支持;同时,细胞还能通过表达黏附分子(如整合素 β1)与周围细胞(如视网膜色素上皮细胞、睫状上皮细胞)形成紧密连接,维持葡萄膜组织的结构完整性,阻止有害物质在眼部组织间的异常扩散。

体外培养条件方面,葡萄膜黑色素细胞的培养需模拟眼部葡萄膜的微环境,重点维持其黑色素合成能力与形态特征。原代细胞的获取需从新鲜眼球组织中分离:首先去除眼球壁外层的巩膜,暴露葡萄膜组织,根据研究需求分别分离虹膜、睫状体或脉络膜组织;将组zhi剪碎后,用含特定酶的溶液(如 dispase 酶)消化处理,使细胞从组织中脱落;收集细胞悬液后离心纯化,去除杂质与杂细胞,获得原代葡萄膜黑色素细胞。体外培养时,基础培养基通常选用含 10%-15% 胎牛血清的 DMEM/F12 培养基,并添加关键生长因子以维持细胞活性:如干细胞因子(SCF,20ng/mL)促进细胞增殖,内皮素 - 1(ET-1,10ng/mL)维持黑色素合成功能,同时添加抗生素预防微生物污染。培养环境控制在 37℃恒温、5% CO₂浓度的培养箱中,培养基 pH 稳定在 7.2-7.4 之间,湿度保持 50%-60%;每 2-3 天更换一次培养基,避免营养耗尽与代谢废物堆积;当细胞融合度达到 70%-80% 时进行传代,传代时需用温和的消化方式处理,避免过度损伤细胞,通常可稳定传代 5-8 代,超过 8 代后细胞易出现黑色素合成能力下降、形态异常等功能退化现象。培养过程中,需定期通过免疫荧光染色检测酪an酸酶、PMEL17 等标志物,或通过黑色素含量测定验证细胞功能状态,确保实验结果可靠。

在科研与临床应用价值上,葡萄膜黑色素细胞是眼部研究的重要工具,应用场景广泛且针对性强。在基础科研领域,可用于探索眼部色素代谢机制 —— 如研究酪an酸酶活性调控对黑色素合成的影响,或分析紫外线、细胞因子等外界因素对黑素小体成熟的作用,为理解眼部色素形成与调节提供分子依据;同时,这类细胞也是研究眼部光保护机制的理想模型,通过模拟不同光照条件,观察细胞黑色素含量、活性氧水平的变化,解析黑色素在光损伤防护中的作用机制。在疾病模型构建中,葡萄膜黑色素细胞可用于模拟色素相关眼病的病理过程:如通过诱导细胞黑色素合成异常,构建虹膜色素缺失模型,研究先天性虹膜异色症的发病机制;或通过模拟氧化应激、炎症刺激等病理条件,观察细胞凋亡、因子分泌的变化,解析年龄相关性黄斑变性、葡萄膜炎等疾病中色素细胞的损伤机制,为疾病研究提供体外实验平台。在药物研发领域,这类细胞可用于筛选眼部色素相关疾病的治疗药物 —— 如检测候选药物对黑色素合成酶(如酪an酸酶)活性的调节作用,评估其对色素沉着过度(如太田痣)或减退疾病的治疗潜力;同时,也可通过检测药物对细胞活性、氧化应激水平的影响,评价药物的眼部安全性,避免药物对葡萄膜黑色素细胞造成损伤,为眼科药物的研发与临床应用提供关键数据支持。此外,在眼部组织工程研究中,葡萄膜黑色素细胞可作为种子细胞,与生物支架材料(如胶原蛋白支架)结合,构建模拟葡萄膜组织的体外模型,为眼部组织修复与替代治疗的研究奠定基础,助力推动眼科学再生医学的发展。


 

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