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人肾皮质近曲小管上皮细胞
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人肾皮质近曲小管上皮细胞源于肾皮质近曲小管,具高效重吸收功能,参与水、糖、电解质转运,可体外培养,是研究肾脏生理、肾病机制及护肾药物的重要材料。

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更新时间:2025-10-13

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人肾皮质近曲小管上皮细胞

人肾皮质近曲小管上皮细胞是肾脏皮质近曲小管的主要功能细胞,位于肾单位的起始段,紧接肾小球滤过膜之后,约占肾小管总长的 50%。这类细胞呈立方形或锥形,游离面布满密集的微绒毛,形成刷状缘,极大扩展了细胞膜表面积(可达每细胞 14000μm²);基底侧膜则形成丰富的质膜内褶,与周围毛细血管紧密相邻。这种特殊结构使其成为肾脏重吸收功能的核心执行者,承担着原尿中绝大部分有用物质的回收任务,同时参与多种代谢废物的分泌;其功能损伤会直接导致蛋白尿、糖尿等肾功能异常,与慢性肾炎、糖尿病肾病等疾病密切相关,且因可体外培养并保留核心生理功能,成为研究肾脏生理机制、肾病病理及筛选护肾药物的核心模型,在肾脏病学研究中具有不可替代的价值。

从细胞来源与组织定位来看,gai细胞由胚胎期后肾原基分化而来,最终定植于肾皮质区域,构成近曲小管的上皮层。在肾单位结构中,近曲小管是肾小球滤过液的 “第一站处理单元"—— 肾小球滤过产生的原尿(每日约 180L)首*入近曲小管,通过上皮细胞的重吸收作用,99% 的水分、100% 的葡萄糖与氨基酸、80% 的碳酸氢根、65% 的钠离子与氯离子,以及大部分钾离子、钙离子、磷酸盐等物质被重新回收至血液,仅剩余约 1.5-2.0L 的终尿排出体外。细胞游离面的微绒毛不仅增加了重吸收面积,还密集分布着各类转运蛋白(如钠 - 葡萄糖协同转运体 SGLT、钠 - 氨基酸协同转运体),为高效转运提供分子基础;基底侧膜的质膜内褶则富含钠钾 ATP 酶,通过主动转运维持细胞内外钠钾离子浓度梯度,为协同转运提供能量,形成 “主动 - 被动结合" 的高效重吸收机制。

在核心生物学功能方面,这类细胞的作用集中体现在 “物质重吸收"“代谢调节"“废物分泌" 三大维度。物质重吸收是其最核心的功能,且具有高度选择性与高效性:对葡萄糖的重吸收通过 SGLT1/2 实现,SGLT1 主要负责近曲小管近段的低亲和力、高容量转运,SGLT2 则负责近段的高亲和力、低容量转运,确保原尿中葡萄糖被wan全回收,避免糖尿;对氨基酸的重吸收通过多种钠 - 氨基酸协同转运体完成,不同转运体对应不同类型的氨基酸(如中性氨基酸、酸性氨基酸),保证氨基酸的全面回收;对水分的重吸收则主要通过水通道蛋白 AQP1 实现,AQP1 广泛分布于微绒毛与基底侧膜,随渗透压梯度快速转运水分,维持体液平衡。代谢调节功能体现在细胞对物质的加工转化上:如对滤过的小分子蛋白质(如溶jun酶、胰岛素),细胞通过胞吞作用摄取后,分解为氨基酸重新利用;对滤过的维sheng素 D3,细胞可将其转化为活性形式,参与钙磷代谢调节。废物分泌功能则是肾脏排毒的重要补充:细胞可主动分泌有机酸(如尿酸、草酸)、药物及其代谢产物(如青mei素、头孢类抗生素)至肾小管腔,随尿液排出体外;同时还能分泌氢离子,与碳酸氢根结合形成碳酸,碳酸分解为二氧化碳与水,二氧化碳被细胞吸收后重新合成碳酸氢根,实现酸碱平衡调节,避免酸中毒或碱中毒。

体外培养条件方面,这类细胞的培养需模拟近曲小管的生理微环境,兼顾细胞形态与功能维持。细胞分离通常采用酶解结合机械研磨的方法 —— 取新鲜肾皮质组织,去除肾包膜与髓质后,剪碎为小块,用胶原酶与 Dispase 混合液温和酶解,使近曲小管片段脱离肾间质;通过离心分离小管片段后,用细胞消化液处理获得单细胞悬液,再通过差速贴壁法纯化,去除成纤维细胞、内皮细胞等杂细胞,纯度可达 90% 以上。体外培养时,基础培养基选用 DMEM/F12 混合培养基,添加 10%-15% 胎牛血清、胰岛素(5μg/mL)、转铁蛋白(5μg/mL)及表皮生长因子(EGF,10ng/mL),以维持细胞的上皮形态与转运功能;培养皿需预先用胶原 Ⅳ 包被,模拟体内基底膜环境,促进细胞贴壁与极性形成。培养环境控制在 37℃恒温、5% CO₂浓度,培养基 pH 稳定在 7.2-7.4,湿度保持 50%-60%,定期更换培养基以维持营养充足。需注意的是,体外培养细胞长期传代后易出现功能退化(如 SGLT 表达减少、AQP1 活性下降),实验多选用传代 3-5 代以内的细胞;同时通过免疫细胞化学染色检测特异性标志物(如 SGLT2、AQP1),验证细胞纯度与功能状态,确保实验结果可靠。

在科研与临床应用价值上,这类细胞是肾脏研究的核心工具:在生理机制研究中,可用于探索转运蛋白的调控机制(如 SGLT2 的表达调控与降糖药物开发);在疾病模型构建中,通过高糖、高尿酸处理可模拟糖尿病肾病、高尿酸肾病模型,研究病理机制;在药物研发中,可筛选护肾药物(如 AQP1 调节剂)与检测药物肾毒性,避免研发失败;此外,细胞分泌的标志物(如尿微量白蛋白、N - 乙酰 -β-D - 氨基葡萄糖苷酶)可作为肾病早期诊断指标,为临床诊疗提供支持。


 

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