产品型号:
更新时间:2025-10-16
厂商性质:代理商
访 问 量 :626
021-34556080
相关文章
WEHI 231小鼠B淋巴细胞
WEHI 231小鼠B淋巴细胞是体外研究 B 细胞免疫应答、凋亡调控及 B 细胞淋巴瘤机制的重要细胞模型,源自小鼠 B 细胞淋巴瘤,经体外分离培养与鉴定后,保留了未成熟 B 细胞的核心生物学特性,兼具 B 细胞免疫功能特征与肿瘤细胞增殖活性,为免疫学基础研究、B 细胞相关疾病机制解析及抗肿瘤药物研发提供了可靠实验材料,在免疫生物学与肿瘤学研究中应用广泛且科研价值突出。
从细胞来源与生物学特性来看,该细胞系源自 Balb/c 小鼠的 B 细胞淋巴瘤,属于未成熟 B 细胞亚群,未成熟 B 细胞作为 B 细胞发育的关键阶段,承担 B 细胞受体(BCR)库筛选、免疫耐受建立的重要功能,而 WEHI 231 细胞高度还原了这一发育阶段的生理属性。在形态上,WEHI 231 小鼠 B 淋巴细胞呈圆形或椭圆形,胞体大小较均匀(直径约 8-10μm),细胞核大而圆,占细胞体积的 2/3 以上,核仁清晰可见,染色质呈细颗粒状均匀分布,细胞质少而呈淡蓝色,体外培养时以悬浮生长为主,偶见少量细胞因弱黏附性形成松散小团块,这一形态特征与体内未成熟 B 细胞的形态高度一致,便于通过光学显微镜观察判断细胞活性与状态。在免疫表型方面,该细胞表达未成熟 B 细胞特异性标志物,如 CD19(B 细胞全阶段标志物)、CD20(B 细胞活化相关标志物)、IgM(未成熟 B 细胞主要表面抗体),同时低表达或不表达成熟 B 细胞标志物 CD21、CD23,通过流式细胞术可明确其细胞发育阶段与纯度,且不表达 T 细胞标志物(如 CD3)、巨噬细胞标志物(如 CD11b),确保实验特异性。此外,WEHI 231 细胞具有独特的凋亡敏感性 —— 当 BCR 受到持续刺激(如抗 IgM 抗体处理)时,会启动内源性凋亡通路,这一特性使其成为研究 B 细胞免疫耐受与凋亡调控机制的经典模型。
在培养条件与操作要点方面,WEHI 231 小鼠 B 淋巴细胞对培养环境要求精细,需模拟体内淋巴组织微环境。培养基推荐使用含 10%-15% 胎牛血清(FBS)的 RPMI-1640 培养基,同时需添加 50μmol/L β- 巯基乙醇(维持细胞内还原环境,防止抗体链间二硫键异常折叠),胎牛血清可提供 B 细胞生长所需的细胞因子(如 IL-4、BAFF)、营养物质及黏附蛋白,促进细胞活性维持与增殖;培养环境需严格控制在 37℃、5% CO₂的恒温培养箱中,CO₂浓度可稳定培养基 pH 值在 7.2-7.4 的适宜范围,避免 pH 波动影响 B 细胞受体功能与凋亡信号传导。传代操作时,因细胞呈悬浮生长,无需胰dan白酶消化,当细胞密度达到 1×10⁶-2×10⁶个 /mL、培养基出现轻微浑浊时,直接按 1:2-1:4 的比例将细胞悬液接种至新鲜预热的培养基中即可,传代间隔通常为 2-3 天,需避免细胞密度过高导致营养耗尽或代谢废物(如乳酸)积累,引发非特异性凋亡。培养过程中需密切观察细胞形态,若出现大量细胞皱缩、细胞核固缩、碎片增多,需及时排查污染(如支原体、病毒)或培养基成分异常(如 β- 巯基乙醇浓度不足);同时需严格遵守无菌操作规范,所有操作均在超净工作台内进行,培养基、磷酸盐缓冲液(PBS)等试剂使用前需经 0.22μm 滤膜过滤除菌,每 1-2 周通过 PCR 法检测支原体,确保细胞培养稳定性。在细胞冻存与复苏方面,冻存液建议使用含 10% 二甲基亚砜(DMSO)、20% 胎牛血清的 RPMI-1640 培养基,添加 50μmol/L β- 巯基乙醇,将细胞浓度调整为 2×10⁶-5×10⁶个 /mL,按梯度降温法处理:4℃放置 30 分钟→-20℃放置 1 小时→-80℃过夜,次日转入液氮长期保存;复苏时需将冻存管迅速放入 37℃水浴锅,持续轻轻摇晃至wan全融化(约 1-2 分钟),立即加入 10 倍体积的新鲜培养基稀释 DMSO,1000rpm 离心 5 分钟后弃上清,用含 β- 巯基乙醇的培养基重悬细胞接种,复苏后 24 小时内通过台盼蓝染色检测存活率(通常要求≥70%),确保后续实验可用性。
在功能特点与科研应用领域,WEHI 231 小鼠 B 淋巴细胞凭借其未成熟 B 细胞特性与凋亡敏感性,被广泛应用于 B 细胞免疫机制研究、B 细胞淋巴瘤模型构建、免yi治疗药物筛选等方面。在免疫机制研究中,该细胞是解析 B 细胞活化与凋亡调控的核心工具 —— 研究人员可通过抗 IgM 抗体刺激 BCR,观察细胞凋亡率变化(如 Annexin V/PI 双染),检测凋亡相关蛋白(如 Bcl-2、Caspase-3)的表达水平,明确 PI3K-AKT、NF-κB 等信号通路在 B 细胞耐受中的调控作用;也可通过添加 IL-4、BAFF 等细胞因子,观察细胞增殖增强与凋亡抑制现象,解析细胞因子对 B 细胞存活的调控机制,为理解自身免疫病(如系统性红斑狼疮)中 B 细胞异常活化的机制提供实验依据。
在 B 细胞淋巴瘤研究方面,WEHI 231 细胞可用于构建淋巴瘤模型 —— 通过基因编辑技术(如 CRISPR-Cas9)敲除抑癌基因(如 p53、PTEN)或过表达致癌基因(如 MYC、BCL-2),诱导细胞发生恶性转化,模拟 B 细胞淋巴瘤的病理特征(如凋亡抵抗、无限增殖)。例如,敲除 WEHI 231 细胞中的 PTEN 基因后,细胞对 BCR 介导的凋亡敏感性显著下降,且增殖能力增强,可用于研究 PTEN 缺失在 B 细胞淋巴瘤发生中的作用,为寻找靶向治疗靶点提供支撑。在药物筛选方面,该细胞可用于评估免疫调节剂与抗肿瘤药物的活性 —— 针对自身免疫病,可筛选能促进 B 细胞凋亡的药物(如 BCR 信号抑制剂);针对 B 细胞淋巴瘤,可筛选能逆转凋亡抵抗的药物(如 Bcl-2 抑制剂),通过 MTT 法检测药物对细胞增殖的抑制率,Western blot 检测药物对目标信号通路的影响,快速筛选潜在活性药物。
此外,WEHI 231 细胞还可用于研究 B 细胞与其他免疫细胞的相互作用 —— 与树突状细胞共培养,可观察树突状细胞通过 CD40L-CD40 信号对 B 细胞活化的促进作用;与 T 细胞共培养,可解析 T 细胞分泌的细胞因子对 B 细胞增殖与抗体分泌的调控,为研究体液免疫应答的调控网络提供实验模型。
综上所述,WEHI 231 小鼠 B 淋巴细胞凭借其明确的未成熟 B 细胞表型、独特的凋亡敏感性及便捷的培养操作,成为免疫生物学与 B 细胞淋巴瘤研究领域的核心工具,为推动 B 细胞免疫机制解析、疾病模型构建及药物研发发挥关键作用,未来在免yi治疗与精准医学研究中仍具有广阔的应用前景。
Copyright © 2025 上海乾思生物科技有限公司版权所有 备案号:沪ICP备2023041625号-1
技术支持:化工仪器网 管理登录 sitemap.xml