ELISA试剂盒操作方法

乾思生物编辑整理：Elisa试验广泛应用在免疫学检验的各领域中，那么Elisa试验有没有简单便捷的操作方法呢？ELISA试剂盒操作方法具体如下：ELISA试剂盒操作方法一:用于检测未知抗原的双抗体夹心法:1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。（简称洗涤，下同）。2.加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中...

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细胞生物学发展史

乾思生物编辑整理：细胞生物学，cellbiology。从细胞整体、显微、亚显微和分子等各级水平上研究细胞结构、功能及生命活动规律的学科。所有学科形成，有其一定的发展轨迹。今天就让乾思-Mr.wang带您探讨下细胞生物学发展史。细胞生物学发展史（由近及远）细胞生物学，20世纪40年代后，电子显微镜得到广泛使用，标本的包埋、切片一套技术逐渐完善，才有了很大改变。开始逐渐开展了从生化方面研究细胞各部分的功能的工作，产生了生化细胞学。细胞生物学，1900年重新发现孟德尔的研究成就后，...

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ELISA质量控制

乾思生物编辑整理：ELISA是一种敏感性高、特异性强、重复性好的实验诊断方法，由于其试剂稳定、易保存、操作简便、结果判断较客观等因素，以及既适宜于大规模筛查试验又可以用于少量标本的检测，既可以做定性试验也可以做定量分析等优点，已广泛应用于微生物学、寄生虫学、肿瘤学和细胞因子等领域。ELISA的影响因素较多，加强质量管理才能充分发挥其方法学的优点。一、质量控制血清质控血清是已有靶值的血清，在每次的常规检验中加入一份或数份，通过所得结果来了解本次检验的情况。质控血清检验的结果如能...

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ELISA的标准操作介绍

乾思生物编辑整理：的试剂，良好的仪器和正确的操作是保证ELISA检测结果准确可靠的必要条件。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的本公司要求使用的纯化水电导率小于1.5μs/cm。ELISA标准操作要点具体如下：1.标本的采取和保存大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如...

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细胞培养知识

乾思生物编辑整理：1.如何选用培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的是AIMV培养基（SFM）。2.为什么要热灭活血清？加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件，刺激平滑肌收缩，细胞和血小板释放组胺，激活淋巴细胞和巨噬细胞。在进行免疫学研究、培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时，推荐使用热灭活血清。3.L-谷氨酰胺在...

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血清热灭活―您是否在浪费时间

乾思生物编辑整理：血清的热灭活是很多培养者感兴趣的话题，价格不菲的血清中含有诸如生长因子，维生素，氨基酸等珍贵物质，而将它们置于50℃以上的温度长达30分钟是*没有必要的。尽管如此，在大多数实验室之中血清的热灭活还是作为常规来执行，多数实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子，氨基酸等成分带来的负面影响，在我们的技术中zui常被提到的就是否该对血清进行热灭活，下面我们就对胎牛血清的热灭活进行一些探讨和解释。根据调查，至少70％的研究者对血清的灭活仅仅是因为遵照常规操作，或者说...

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细胞培养常见问题及回答

乾思生物编辑整理：1、如何选用培养基？培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的是AIMV培养基（SFM）。在开始进行新的细胞培养时，可以参考下表所列的条件：细胞系细胞类型种组织推荐使用的培养基293成纤维细胞人胚胎肾MEM，10%热灭活马血清3T6成纤维细胞小鼠胚胎DMEM,10%胎牛血清A549上皮细胞人肺癌F-12K,10%胎牛血...

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血清使用问题的总结

乾思生物编辑整理：一、血清灭活问题。1、问：加到培养基中的血清必须灭活吗？答：不是必须的，看做什么实验了。2、问：四季青胎牛血清灭活是56℃30分钟吗？答：如果用于培养大多数的肿瘤细胞，血清一般是不需要灭活的，这样可以有效保存血清中的生长因子。但是如果用于培养一些表面具有补体受体的细胞，如内皮细胞，血清是需要灭活，一般是56℃，30min。3、问：我要做滋养细胞培养，胎牛血清要灭活吗？答：进口的一般都已灭活，国产的不一定，还是灭活一下再用较安全。4、问：我用病毒上清转染细胞，...

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