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间接ELISA（酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒） 本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎（DVH）抗体的ELISA（酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒）为例，间接ELISA（酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒）的操作程序如下。

　　（1） 材料

　　① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液；

　　② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清；待检鸭血清；

　　③ ELISA（酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒）检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。

　　（2） 方法步骤

　　① 加抗原包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干

　　② 加待检血清 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干

　　③ 加酶标抗体 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干

　　④ 加底物液 → 37℃ 30分钟，加终止液

　　⑤ 用ELISA（酶联免疫吸附试验,酶联免疫试剂盒）检测仪测定OD值，并计算出P/N比值。

　　（3） 结果判定已知阳性血清与已知阴性血清的比值（P/N）≥2.1，而且已知阳性血清的OD值≥0.4；在上述条件成立的情况下，如果待检血清与已知阴性血清的比值（P/N）≥2.1，而且待检血清的OD值≥0.4，则判为阳性，否则判为阴性。