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小鼠杂交瘤细胞
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小鼠杂交瘤细胞由小鼠 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合而成,可稳定分泌特异性单克隆抗体,是单克隆抗体制备、免疫检测及疾病靶向研究的关键工具。

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更新时间:2025-10-10

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小鼠杂交瘤细胞

小鼠杂交瘤细胞是免疫学、生物医学及生物医药领域的核心工具细胞,通过小鼠 B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合制备而成,因兼具 B 细胞分泌特异性抗体与骨髓瘤细胞无限增殖的双重特性,成为单克隆抗体制备与相关研究的关键载体,推动了免疫检测、疾病靶向治疗等领域的快速发展。

从来源与制备原理来看,其制备需经多步严谨操作:首先选取免疫后的小鼠(针对特定抗原免疫,使小鼠产生能分泌对应抗体的 B 淋巴细胞),提取脾脏中的 B 淋巴细胞;随后与小鼠骨髓瘤细胞(经筛选的、缺乏次黄piao呤 - 鸟piao呤 - 磷酸核糖基转移酶或胸腺嘧啶激酶的缺陷型细胞,便于后续筛选)在聚乙二醇(PEG)或电融合技术作用下融合;融合后通过选择培养基(如 HAT 培养基)筛选,淘汰未融合的 B 淋巴细胞(短期增殖后死亡)与骨髓瘤细胞(无法在 HAT 培养基中合成核酸而死亡),仅保留融合成功的杂交瘤细胞;再经有限稀释法或克隆环法进行单克隆化培养,筛选出能稳定分泌目标特异性抗体的细胞克隆,最终建立可长期传代的细胞系。

在细胞形态与特性方面,其在显微镜下呈现典型的上皮样或成纤维样混合形态,细胞大小不均,边界清晰,胞质丰富,细胞核呈圆形或椭圆形,核仁明显。核心特性体现在 “双重优势":一方面继承骨髓瘤细胞的无限增殖能力,可在体外长期传代培养,持续扩增细胞数量,满足大规模抗体生产需求;另一方面保留 B 淋巴细胞的抗体分泌功能,且经单克隆化筛选后,能定向、稳定分泌针对单一抗原表位的特异性单克隆抗体,抗体纯度高、特异性强,避免了多克隆抗体成分混杂的问题。

培养条件方面,其培养体系需兼顾细胞增殖与抗体分泌效率,基础培养基常用 RPMI-1640 或 DMEM,添加 10%-20% 胎牛血清(提供生长必需的营养因子与细胞因子),部分情况下需补充胰岛素、转铁蛋白等添加剂优化培养效果。培养环境需维持 37℃恒温、5% CO₂的气体平衡,确保培养基 pH 稳定在 7.2-7.4 之间,为细胞代谢与抗体合成提供适宜条件。该细胞可采用贴壁培养或悬浮培养两种方式:贴壁培养需使用常规培养瓶,细胞附着生长;悬浮培养则通过摇瓶或生物反应器实现,更适合大规模工业化抗体生产,培养过程中需定期监测细胞密度与活力,当细胞密度达到 10⁶-10⁷个 /mL 时,可收集上清液纯化抗体,或进行传代培养维持细胞活性。

在科研与应用价值上,其应用场景广泛且具有不可替代性。在单克隆抗体制备领域,是生产各类特异性抗体的核心工具,制备的抗体可用于疾病诊断(如新guan病毒抗原检测试剂盒中的特异性抗体)、免疫组化分析(标记组织中的特定蛋白)及流式细胞术检测(识别细胞表面标志物);在疾病研究领域,可利用其分泌的单克隆抗体探究疾病发病机制,如通过抗体靶向结合肿瘤细胞表面抗原,研究肿瘤细胞的信号通路与增殖规律;在生物医药开发领域,单克隆抗体药物(如靶向治疗肿瘤的单抗药物)的研发与生产均以其为基础,通过大规模培养细胞获取高纯度抗体,经修饰优化后制成药物,用于肿瘤、自身免疫病等疾病的治疗;此外,还可用于抗体工程改造,通过基因编辑技术对细胞进行改造,优化抗体的亲和力、稳定性或效应功能,开发出更符合临床需求的抗体衍生物,为生物医学与生物医药领域的创新发展提供重要支撑。

 

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