QGY-7703人肝癌细胞源自人肝癌组织，贴壁生长，保留肝癌恶性特征，表达相关标志物，适用于肝癌发病机制研究、药物敏感性测试及肿瘤生物学实验。

QGY-7703人肝癌细胞

QGY-7703人肝癌细胞是源自人类原发性肝细胞癌组织的贴壁生长细胞系，因稳定保留肝癌细胞的恶性生物学特征（如无限增殖、侵袭转移潜能），且体外培养易操作、重复性高，成为研究肝癌发病机制、肿瘤进展及药物筛选的经典体外模型，为肝癌基础研究与临床转化提供关键实验载体。

一、核心生物学特性

细胞来源上，QGY-7703 细胞分离自肝癌患者手术切除的肿瘤组织，经体外多次传代建系后，持续保留肝细胞癌的组织学特征与分子表型，与正常肝细胞系（如 QSG-7701）相比，具有明显的恶性增殖优势。形态上，QGY-7703 细胞呈不规则多边形或梭形，贴壁生长时排列松散，无 “铺路石" 样规则结构，细胞间隙较大；胞质丰富但颗粒增多，部分细胞可见空泡（提示代谢异常），细胞核大且多呈异形（如多核、核仁增多），染色质分布不均，符合肝癌细胞的典型恶性形态特征。

功能特性方面，QGY-7703 细胞具备肝癌细胞的核心恶性行为：增殖能力ji强，细胞周期短（约 24-30 小时），对数生长期增殖速度显著高于正常肝细胞，且无接触抑制现象，密度过高时仍可堆叠生长；具有较强的侵袭与迁移能力，可通过分泌基质金属蛋白酶（MMP-2、MMP-9）降解细胞外基质，在 Transwell 实验中能高效穿透基底膜，模拟体内肝癌转移过程；同时表达肝癌相关标志物，如甲胎蛋白（AFP，阳性率较高）、细胞角蛋白 19（CK19）、上皮细胞黏附分子（EpCAM），这些标志物不仅为细胞鉴定提供依据，也为肝癌靶向实验提供明确靶点。此外，细胞基因组存在肝癌常见的分子异常，如部分原癌基因（MYC、RAS）表达上调、抑癌基因（p53）突变，进一步贴近临床肝癌的分子特征。

二、体外培养关键条件

基础培养基选择以 RPMI-1640 或 DMEM（高糖）为主，需添加 10%-12% 胎牛血清（无需额外添加激素维持恶性表型，与正常肝细胞不同），满足细胞快速增殖对营养的需求，同时加入 1% 无菌防护试剂预防细菌污染。培养基 pH 需控制在 7.2-7.4，渗透压维持在 280-320mOsm/kg，可通过添加 10mM HEPES 缓冲液增强 pH 稳定性，避免环境波动影响细胞活性。

培养环境需严格控制为 37℃、5% CO₂的恒温恒湿条件，培养箱内湿度保持在 95% 以上，防止培养基因水分蒸发导致渗透压升高。因细胞贴壁生长且增殖迅速，传代周期短（约 2-3 天），传代时需先用消化液处理（37℃孵育 1-2 分钟），待细胞边缘收缩、脱离培养瓶壁时，加入含血清的培养基终止消化，轻轻吹打制成单细胞悬液，按 1:4-1:6 的比例接种至新培养瓶。需注意细胞汇合度达 80% 时需及时传代，避免密度过高导致细胞缺氧、代谢废物积累，影响细胞活性。

细胞维护过程中，每日需通过倒置显微镜观察细胞状态：若发现细胞形态明显异形（如巨型细胞增多）、培养基浑浊或出现漂浮死细胞，需及时更换培养基或排查污染；若细胞增殖速度异常减慢，需检测血清质量或排查支原体污染。细胞冻存时，使用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的胎牛血清作为冻存液，采用梯度降温法（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮保存），复苏时 37℃水浴快速解冻，立即加入 5 倍体积培养基稀释，降低 DMSO 毒性，提高复苏存活率（通常可达 80% 以上）。

三、主要实验应用场景

在肝癌发病机制研究中，QGY-7703 细胞是核心模型。科研人员可通过基因编辑技术（如 CRISPR-Cas9）敲除或过表达肝癌相关基因（如 p53、MYC），观察细胞增殖、凋亡及迁移能力的变化，明确基因在肝癌发生发展中的调控作用；也可通过转录组测序、蛋白质组学分析，筛选肝癌进展相关的差异表达基因（如 VEGF、MMPs），解析肝癌细胞恶性转化的分子通路，为肝癌早期诊断提供潜在分子标志物。

药物筛选与敏感性测试领域，QGY-7703 细胞应用广泛。可将不同浓度的肝癌治疗药物（如靶向抑制剂、hua疗药物前体）作用于细胞，通过 MTT 法、CCK-8 法检测细胞活力，计算半数抑制浓度（IC50），评估药物对肝癌细胞的杀伤效果；也可构建药物耐药细胞株，研究耐药相关基因（如 ABCB1、BCL-2）的表达变化，探究肝癌耐药机制，为逆转耐药提供实验依据。此外，因细胞表达 AFP 等标志物，可通过检测药物对标志物分泌的影响，辅助评估药物对肝癌细胞表型的调控作用。

在肿瘤微环境研究中，QGY-7703 细胞可用于模拟肝癌细胞与微环境成分的相互作用。通过与肝癌相关成纤维细胞（CAFs）、免疫细胞（如巨噬细胞）共培养，观察微环境细胞对肝癌细胞增殖、侵袭的促进作用；也可研究细胞因子（如 IL-6、TGF-β）对肝癌细胞上皮 - 间质转化（EMT）的诱导效果，解析微环境在肝癌转移中的作用机制，为靶向肿瘤微环境的治疗策略提供实验基础。

四、实验应用注意事项

实验前需通过免疫荧光或 Western blot 验证细胞标志物（AFP、CK19）的表达水平，确保细胞恶性表型稳定，避免因传代次数过多（建议传代不超过 30 代）导致表型退化，影响实验结果的可靠性；不同批次胎牛血清对细胞增殖速度影响较大，需通过预实验筛选能维持细胞稳定增殖的血清批次，固定使用以保证实验一致性。

贴壁细胞消化过程需严格控制时间，避免消化过度导致细胞破裂或消化不充分影响传代效率，建议在显微镜下实时观察，待细胞大部分脱离瓶壁时立即终止消化。操作时需严格无菌，QGY-7703 细胞虽增殖能力强，但对支原体污染敏感，污染后易导致细胞形态异常、增殖减慢，每传代 3 次需通过 PCR 法检测支原体，若发现污染需立即丢弃，防止交叉感染。

结果解读需结合临床肝癌特征，QGY-7703 细胞虽贴近肝癌分子表型，但体外培养无法wan全模拟体内肿瘤微环境（如血管生成、免疫抑制），实验结论需结合动物移植瘤模型（如裸鼠荷瘤实验）或临床样本数据综合分析；同时，需注意与正常肝细胞系（如 QSG-7701）的对比研究，通过差异分析更精准解析肝癌的恶性机制，避免单独使用肿瘤细胞系导致结果片面。