小鼠25羟基维生素试剂盒
小鼠25羟基维生素试剂盒是一款专门用于体外定量检测小鼠来源生物样本中25羟基维生素含量的专用实验试剂组合，核心应用于基础科研领域，尤其适配小鼠钙磷代谢、骨骼发育、免疫功能调控及相关疾病研究。25羟基维生素是维sheng素D在体内的主要活性代谢产物，主要由小鼠肝脏代谢合成，广泛存在于小鼠血清、血浆、肝脏组织及肾脏组织中，是评估小鼠维sheng素D营养状态的核心指标，参与小鼠钙吸收、骨骼矿化、免疫细胞活化等生理过程，其含量异常与小鼠佝偻病、骨质疏松、免疫功能低下、钙磷代谢紊乱及肾脏疾病密切相关，是相关疾病机制研究、营养评估及药物靶点筛选的核心检测指标。本试剂盒基于酶联免疫吸附（ELISA）原理设计，集成了检测所需全部试剂，具备特异性强、灵敏度高、操作便捷、结果稳定、物种针对性强等优势，可快速、精准完成小鼠各类样本中25羟基维生素的定量检测，为小鼠骨骼发育、免疫调控相关科研实验提供标准化、可靠的数据支撑，适配不同科研场景的检测需求。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法ELISA原理，专门针对小鼠25羟基维生素（25-OH-VD₃）优化反应体系，有效规避小鼠体内其他维生素（如维sheng素D₂、维sheng素D₃）及代谢产物的交叉干扰，确保检测精准度与适用性：
酶标板预先包被小鼠25羟基维生素特异性捕获抗体，实验时依次加入小鼠样本、标准品及HRP标记的小鼠25羟基维生素检测抗体，经37℃恒温温育后，抗体与样本/标准品中的25羟基维生素特异性结合，形成“捕获抗体-25羟基维生素-检测抗体"复合物；经彻di
洗涤去除未结合的多余试剂（如未结合的检测抗体、杂蛋白）后，加入TMB底物液，TMB在过氧化物酶的催化下转化为蓝色，加入终止液（硫酸溶液）后变为黄色，颜色深浅与样本中小鼠25羟基维生素的含量呈正相关，通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），结合标准曲线即可计算出样本中小鼠25羟基维生素的具体含量。该原理适配低浓度样本检测，可有效避免维生素类物质的非特异性反应，保障检测结果的准确性，尤其适配小鼠生理状态下低浓度25羟基维生素的精准检测。 产品特点
1. 物种特异性强，无交叉干扰：采用小鼠25羟基维生素专属特异性单克隆抗体，可特异性识别小鼠来源样本中的25-OH-VD₃，有效规避大鼠、人等其他物种同源维生素及小鼠体内维sheng素D₂、维sheng素D₃、1,25-二羟基维sheng素D等其他维sheng素D代谢产物的干扰，同时避免样本中杂蛋白的非特异性结合，确保检测结果的准确性，批内变异系数CV<5%，板间变异系数CV<8%，保障实验数据重复性。
2. 灵敏度高，检测范围广：ELISA法检测范围通常为1-50ng/mL，灵敏度可达0.5ng/mL，可精准检测小鼠低浓度样本（如小鼠血清、肝脏组织匀浆）中的25羟基维生素，满足不同科研样本的检测需求，标准曲线相关系数R²≥0.99，线性表现优异，适配小鼠生理及病理状态下的含量变化检测，可精准区分维sheng素D缺乏、充足及过量状态。
3. 操作便捷，效率高效：试剂盒包含检测所需全部试剂（预包被酶标板、冻干标准品、样本xi释液、检测抗体-HRP、浓缩洗涤液、TMB底物液、终止液、封板膜等），无需额外配制核心试剂，实验流程简化，全程可在1-2小时内完成，适配96孔板高通量设计，单次可检测96个样本，大幅提升实验效率，新手也可轻松操作。
4. 稳定性好，保质期长：试剂经严格质检与工艺优化，冻干标准品、特异性抗体及底物活性稳定，未开封试剂盒按要求储存可稳定保存，稀释后的试剂可短期冷藏使用，避免反复冻融导致的活性下降，确保不同批次实验结果的一致性，保障实验重复性；标准品采用专用缓冲液配制，密封性好，可有效防止降解，进一步提升试剂稳定性。
5. 适配性广，场景多元：专门适配小鼠样本检测，兼容小鼠血清、血浆（EDTA或肝素抗凝）、组织匀浆（肝脏、肾脏、骨骼组织等）、细胞培养液等多种样本类型，广泛应用于小鼠钙磷代谢、骨骼发育、免疫功能调控、佝偻病、骨质疏松、肾脏疾病等相关科研领域，适配基础科研、药物靶点筛选、营养状态评估等实验场景。
6. 安全便捷，风险可控：优化试剂配方，无需氯仿、二氯甲烷等有毒有机溶剂，操作过程更安全，同时配套详细说明书，明确操作步骤、样本处理及注意事项，降低实验失误概率，保障实验安全与顺利进行；试剂组分均经过无菌检测，可有效避免污染风险，适配常规科研实验室操作。
适用样本类型
本试剂盒专门适配小鼠来源样本，可满足小鼠钙磷代谢、骨骼发育相关科研实验的多样化检测需求，具体适用样本包括：小鼠血清、血浆（EDTA或肝素抗凝）、组织匀浆（肝脏组织、肾脏组织、骨骼组织等）、细胞培养液。其中，组织匀浆需用预冷PBS（含蛋白酶抑制剂更佳）制备，低温离心提取；血清/血浆样本采集后需低温离心处理，避免溶血，新鲜样本优先检测，若无法立即检测需冷冻保存，避免反复冻融导致25羟基维生素降解；骨骼组织样本需提前脱钙处理，确保检测准确性。（具体样本处理方法请参考产品说明书）
储存与注意事项
（一）储存条件
1. 未开封试剂盒：需置于2-8℃避光密封保存，避免阳光直射、温度波动及潮湿环境，严禁冷冻，未开封试剂盒有效期通常为12个月，具体以说明书标注为准。
2. 组分储存：冻干标准品、小鼠25羟基维生素特异性抗体、TMB底物液等核心组分需置于-20℃避光保存，避免反复冻融（≤3次），防止活性丧失；浓缩洗涤液、样本xi释液可在2-8℃冷藏保存；标准品及抗体母液稀释后需存放于4℃，切勿放-20℃低温处，以免降低效价。
3. 稀释后试剂：稀释后的洗涤液、样本xi释液可在4℃冷藏保存，1周内用完；稀释后的标准品、抗体需现配现用，未用完的可短期冷藏，避免反复冻融及光照；样本xi释液需注意保质期，夏季即使冷藏也需避免批量配制过多，防止变质。
4. 运输条件：运输时采用凝胶冷藏包，确保试剂温度稳定在2-8℃，避免剧烈震荡、暴晒及ji端
温度，防止试剂失效，尤其注意保护抗体及底物，避免光照直射和温度骤变。 （二）注意事项
1. 实验全程需严格遵循无菌操作规范，实验器具需提前高压灭菌处理，加样时使用无菌枪头，避免试剂及样本污染，尤其是组织匀浆和骨骼脱钙样本，污染会导致检测结果偏高；实验台面需保持清洁，避免试剂交叉污染。
2. 试剂使用前需从冰箱取出，置于室温（25℃左右）平衡30分钟以上，避免温差导致冷凝水干扰实验；试剂配制及加样时动作轻柔，避免剧烈震荡，防止试剂失效或样本中25羟基维生素变性，抗体与样本孵育时避免剧烈晃动，确保抗原抗体充分结合。
3. 孵育及显色过程需严格控制温度和时间，尤其是显色反应需避光进行，避免光照影响显色效果；终止反应后需在10分钟内完成读数，防止颜色消退，确保检测数据稳定，同时避免过度孵育导致非特异性显色。
4. 不同批次的试剂不可混用，试剂盒配套试剂需单独使用，避免与其他试剂盒试剂交叉使用，防止干扰实验结果；实验结束后，废弃试剂及耗材需按生物安全规范妥善处理，避免污染环境；含终止液的废液需单独收集处理，避免腐蚀设备。
5. 操作含硫酸的终止液时，需佩戴手套、口罩、护目镜，避免皮肤接触及吸入，防止刺激伤害；实验台面需保持清洁，避免试剂洒落，若不慎接触皮肤，需立即用大量清水冲洗；试剂瓶盖需及时盖紧，防止挥发和污染。
6. 若样本中小鼠25羟基维生素含量超出检测范围，需适当稀释后重新检测，不可直接检测，以免导致结果偏差；检测过程中可设置阳性对照和空白对照，确保实验体系正常，阳性对照孔吸光度需落在标准曲线范围内，否则提示实验失效；样本需新鲜采集处理，避免长时间放置或反复冻融导致25羟基维生素降解，影响检测结果；骨骼样本脱钙过程需严格遵循说明书，避免脱钙试剂干扰检测。
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更新时间：2026-03-13
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