LNCaP人前列腺癌细胞源自人前列腺癌淋巴结转移灶，具雄激素敏感性与一定增殖侵袭性，保留肿瘤恶性特征，常用于前列腺癌机制、雄激素调控及药物筛选研究。

LNCaP人前列腺癌细胞

LNCaP人前列腺癌细胞是从人类前列腺癌患者手术切除的左锁骨上淋巴结转移灶中分离、纯化并体外建系获得的恶性肿瘤细胞株，因具有典型的前列腺癌病理形态、稳定的雄激素敏感性及贴近临床的转移相关分子表型，且能复现前列腺癌雄激素依赖阶段的恶性生物学行为，成为研究前列腺癌发病机制、雄激素调控及抗前列腺癌药物研发的核心体外模型，在前列腺癌基础研究与临床转化领域，尤其针对激素敏感性前列腺癌（HSPC）这一关键疾病阶段，具有不可替代的应用价值。

从细胞来源与病理背景来看，LNCaP 细胞的原始肿瘤组织源自前列腺癌淋巴结转移病灶 —— 前列腺癌是男性泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，约 60% 患者确诊时已出现局部侵犯或远处转移（淋巴结、骨骼为主要转移部位），其中激素敏感性前列腺癌（HSPC）占初治转移患者的 80% 以上，其生长增殖高度依赖雄激素信号，对雄激素剥夺治疗（ADT）响应率较高，但多数患者会在 1-3 年内进展为去势抵抗性前列腺癌（CRPC），预后显著变差。通过组织块酶解 - 贴壁培养法（采用低浓度胶原酶消化淋巴结转移灶组织，保护肿瘤细胞活性），从新鲜手术标本中分离获得肿瘤细胞，经差速贴壁法去除淋巴细胞、成纤维细胞等杂细胞，结合前列腺癌特异性标志物筛选，最终建立 LNCaP 细胞株。该细胞株严格保留原代前列腺癌转移灶的病理表型：显微镜下呈上皮样形态，细胞呈多边形或短梭形，胞质丰富，体外培养时呈贴壁生长并形成致密的细胞群落；免疫组化检测显示，细胞高表达前列腺癌特异性标志物（如前列腺特异性抗原 PSA、雄激素受体 AR、前列腺酸性磷酸酶 PAP），低表达转移抑制因子（如 E - 钙黏蛋白），核型分析显示其为亚二倍体（染色体数目约 60-65 条），携带染色体结构异常（如 8 号染色体三体），与临床激素敏感性前列腺癌的病理特征高度一致，为研究前列腺癌转移及激素调控机制提供了可靠模型。

在核心生物学特性方面，LNCaP 细胞展现出激素敏感性前列腺癌的三大典型特征，精准模拟临床 HSPC 阶段的恶性行为。其一，强雄激素敏感性与 AR 信号依赖性：LNCaP 细胞是目前应用zui广泛的雄激素敏感型前列腺癌细胞系，其生长增殖高度依赖雄激素信号 —— 在含雄激素（如双氢睾酮 DHT）的培养基中，细胞倍增时间约为 36-48 小时，增殖速率较无雄激素组提升 2-3 倍；Western blot 检测显示，雄激素可显著激活细胞内 AR 信号通路，促进 AR 核转位并上调下游靶基因（如 PSA、KLK2）表达，其中 PSA 分泌量可达 50-80ng/10⁶细胞 / 24 小时（显著高于去势抵抗性细胞系）；当去除培养基中的雄激素或加入 AR 拮抗剂（如比ka鲁胺）后，细胞增殖抑制率达 60% 以上，AR 靶基因表达量下降 70%，wan美复现临床 HSPC 对雄激素剥夺治疗的响应特征，这一特性为研究前列腺癌雄激素调控机制及 AR 靶向药物研发提供了理想实验系统。其二，可控的侵袭转移能力与上皮 - 间质转化（EMT）潜能：LNCaP 细胞具备中度侵袭转移能力，Transwell 侵袭实验显示，细胞 24 小时穿越基质胶的细胞数是正常前列腺上皮细胞的 4-6 倍，且侵袭能力受雄激素调控 —— 添加 DHT 后，细胞 MMP-2、MMP-9 表达量提升 50% 以上，侵袭能力增强 40%；同时，细胞具有部分 EMT 潜能，在 TGF-β1 诱导下，可下调上皮标志物 E - 钙黏蛋白表达，上调间质标志物 Vimentin 表达，EMT 转化率达 30% 以上，为研究前列腺癌从激素敏感向去势抵抗转化过程中的转移能力变化提供了可控模型。其三，临床相关的药物响应特征：LNCaP 细胞对前列腺癌临床常用药物表现出特定敏感性 —— 对雄激素剥夺相关药物（如促黄体生成素释放激素激动剂类似物）响应率达 70% 以上，对hua疗药物（如多xi他赛）敏感性较低（增殖抑制率＜30%），而对新型 AR 靶向药物（如恩扎卢胺）初始响应率达 55% 以上，与临床 HSPC 患者的药物响应谱高度吻合；通过长期雄激素剥夺培养，可诱导 LNCaP 细胞建立去势抵抗模型（LNCaP-CRPC），该模型细胞对恩扎卢胺耐药，且高表达 AR 突变体（如 AR-V7），为研究前列腺癌激素抵抗机制及耐药药物研发提供了关键工具。

在体外培养与维护细节上，LNCaP 细胞因需维持雄激素敏感性，对培养环境要求较高，需模拟体内前列腺的激素微环境条件。常规使用含 10% 胎牛血清（需筛选低雄激素血清，避免干扰 AR 信号）的 RPMI 1640 培养基，添加 1mM 丙酮酸钠、1% 非必需氨基酸（满足 AR 信号激活相关代谢需求），如需维持雄激素敏感表型，可额外添加 10nM DHT；培养基 pH 值需精准控制在 7.2-7.4，需添加抗菌试剂预防污染。培养条件为 37℃、5% 二氧化碳恒温培养箱，细胞贴壁能力中等，建议使用普通培养瓶（无需包被），接种密度为 2×10⁴ cells/cm²（密度过低易导致细胞分化，过高则出现接触抑制，影响 AR 信号活性）。传代操作需注意：当细胞融合度达 75%-85% 时及时传代（过度融合会导致 AR 表达量下降），采用 0.25% 细胞消化液 37℃孵育 3-4 分钟，待细胞边缘收缩后，加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液（避免剧烈操作破坏 AR 核定位），传代比例为 1:3-1:4。长期储存时，选择对数生长期、AR 表达稳定的细胞，用含 10% DMSO、20% 胎牛血清（低雄激素）的冻存液重悬（细胞密度 5×10⁶ cells/mL），梯度降温（4℃ 30 分钟→-80℃过夜→液氮长期保存），复苏时快速解冻（37℃水浴 1-2 分钟）后立即用预热培养基稀释，24 小时后更换培养基，细胞存活率可达 75% 以上，且复苏后 3-5 代内雄激素敏感性、AR 信号活性保持稳定。

在科研与应用领域，LNCaP 细胞的价值围绕前列腺癌（尤其 HSPC 阶段）的关键科学问题展开，覆盖激素调控机制、药物研发、耐药研究等关键方向。其一，前列腺癌雄激素信号调控机制研究：利用 LNCaP 细胞的 AR 依赖性，通过 ChIP-seq 技术筛选 AR 下游靶基因，发现 AR 可直接结合 KLK3（PSA 编码基因）、TMPRSS2 等基因启动子区域，调控细胞增殖与分化；同时，研究非编码 RNA 对 AR 信号的调控作用，发现长链非编码 RNA SChLAP1 可通过结合 AR，增强其靶基因转录活性，促进细胞增殖，为理解前列腺癌激素调控的分子网络提供了新视角。其二，抗前列腺癌药物筛选与验证：基于 LNCaP 细胞的雄激素敏感性，构建 AR 靶向药物筛选模型，检测候选药物对 AR 信号及细胞增殖的抑制效果；例如，筛选出的新型 AR 拮抗剂处理后，可显著抑制 AR 核转位，使细胞增殖抑制率达 65% 以上，PSA 分泌量下降 80%，且对去势抵抗模型细胞仍有活性，为前列腺癌药物研发提供了新候选分子。其三，前列腺癌激素抵抗机制研究：通过诱导 LNCaP 细胞建立去势抵抗模型，比较亲本与耐药细胞的差异，发现耐药细胞中 AR 扩增、AR-V7 表达上调及 PI3K/Akt 信号激活是主要耐药机制；基于此，筛选 “AR 拮抗剂 + PI3K 抑制剂" 联合方案，结果显示联合用药可使耐药细胞凋亡率从 12% 提升至 40% 以上，为临床克服前列腺癌激素抵抗提供了新策略。其四，前列腺癌诊断标志物开发：基于 LNCaP 细胞的分泌蛋白谱，筛选前列腺癌特异性标志物，发现细胞分泌的 PSA、KLK2 浓度与临床患者血清水平高度相关，且在激素抵抗阶段 PSA/KLK2 比值显著下降，为前列腺癌分期诊断、疗效监测提供了分子依据。

综上，LNCaP 人前列腺癌细胞凭借其稳定的雄激素敏感性、临床相关的转移表型及激素抵抗模型构建能力，成为前列腺癌研究领域的核心工具细胞。其在雄激素信号机制、AR 靶向药物研发、激素抵抗研究等方面的应用，不仅填bu了激素敏感性前列腺癌体外研究模型的空白，更为推动前列腺癌精准诊疗技术发展、改善 HSPC 患者预后提供了关键实验支撑，具有重要的科学价值与临床转化意义。