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更新时间:2025-12-01
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293T/17人胚肾细胞是293细胞家族的精准优化株系,由293T细胞经克隆筛选而来,核心特征为稳定携带SV40大T抗原(SV40T)编码基因。它继承了293T细胞高转染、高表达优势,更通过改良强化了贴壁特性与培养稳定性,在病毒载体规模化生产和复杂蛋白表达中表现突出,成为生物医药研发的关键工具。
SV40T基因的稳定整合是其功能核心。该抗原结合p53、Rb抑癌蛋白解除增殖抑制,同时激活含SV40复制起点的质粒扩增,大幅提升外源基因拷贝数。与普通293T细胞相比,293T/17经克隆筛选后,SV40T表达更均一,细胞群体同质化程度更高,有效避免表达效率波动,外源蛋白产量稳定性提升30%以上。
在病毒载体制造中,293T/17是重组腺相关病毒(AAV)、慢病毒规模化生产的优选细胞。其优化的贴壁能力使其在多层培养瓶或微载体上形成均匀单层,提升单位面积病毒产量;同质化特性确保病毒颗粒组装效率一致,降低空壳病毒比例。如AAV生产中,共转染载体与辅助质粒后,可高效产出高滴度、高纯度重组AAV,为基因治疗药物研发提供稳定原料。
复杂重组蛋白表达是其突出优势。对于需糖基化修饰的膜蛋白(如GPCR)、多亚基蛋白复合物(如抗体药物偶联物),其完善的蛋白加工系统可保障产物活性。在肿瘤免yi治疗中,它可高效表达CAR-T靶向抗原,助力CAR结构优化;疫苗研发中,稳定表达的病毒刺突蛋白(如新guan病毒S蛋白),为抗原筛选和中和抗体检测提供高质量样本。
培养需突出“贴壁优化"特性,推荐含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基以强化贴壁稳定性,培养环境为37℃、5% CO₂。其增殖周期28-32小时,略慢于普通293T,但形态更均一(规则多角形),85%融合度时传代zuijia。yi酶消化需控制在40秒-1分钟,避免破坏贴壁蛋白,1:3传代比例可保持细胞活性稳定。
其均一性使其成为高通量实验理想模型,在CRISPR/Cas9活性验证中减少重复误差,信号通路研究中精准反映基因调控作用。目前,该细胞系已广泛用于生物医药工艺开发,无血清悬浮适应株的构建更推动了重组蛋白和病毒载体的工业化生产,为基因治疗、抗体药物等领域成果转化提供可靠支撑。
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