LTEP-sm人小细胞肺癌细胞源自人小细胞肺癌组织，具高增殖性与神经内分泌特征，保留肿瘤恶性表型，常用于小细胞肺癌发病机制、hua疗敏感性及转移研究。

LTEP-sm人小细胞肺癌细胞

LTEP-sm人小细胞肺癌细胞是从人类小细胞肺癌（Small Cell Lung Cancer，SCLC）患者手术切除的肿瘤组织中分离、纯化获得的恶性肿瘤细胞株，因具有典型的小细胞肺癌病理形态、显著的神经内分泌特征及高侵袭转移潜能，且分子表型与临床 SCLC 高度吻合，成为研究小细胞肺癌发病机制、药物耐药机制及新型治疗策略的核心体外模型，在肺癌基础研究与临床转化领域，尤其针对 SCLC 这一恶性程度ji高的亚型，具有不可替代的应用价值。

从细胞来源与病理背景来看，LTEP-sm 细胞的原始肿瘤组织源自 SCLC 患者的中央型肺癌病灶 ——SCLC 是肺癌中恶性程度最高的亚型（占比约 15%），多起源于肺中央气道的神经内分泌细胞，与吸烟密切相关，临床特点为 “生长快、转移早、预后差"，确诊时约 70%-80% 患者已出现局部浸润或远处转移（常见转移部位为脑、骨、肝），虽对初始治疗药物敏感，但极易在短期内产生耐药，5 年生存率不足 7%。通过组织块酶解 - 密度梯度离心法（采用胶原酶消化肿瘤组织，结合 Percoll 密度梯度离心分离肿瘤细胞），从新鲜手术标本中去除成纤维细胞、免疫细胞等杂细胞，再通过 SCLC 特异性标志物筛选，最终获得纯度超 95% 的 LTEP-sm 细胞株。该细胞株严格保留原代 SCLC 的病理表型：细胞体积小、呈圆形或梭形，胞质少、核质比高，核仁不明显，体外培养时呈悬浮或半贴壁生长，常形成细胞团簇；免疫组化检测显示，细胞高表达 SCLC 特异性神经内分泌标志物（如嗜铬粒蛋白 A CgA、突触素 Syn、神经元特异性烯醇化酶 NSE）及转录因子 ASCL1（SCLC 关键驱动因子），低表达上皮细胞标志物 CK7，与临床 SCLC 的病理诊断标准高度一致，为研究 SCLC 的亚型特异性特征提供了可靠体外模型。

在核心生物学特性方面，LTEP-sm 细胞展现出三大典型 SCLC 特征，较好模拟临床 SCLC 的恶性行为。其一，高增殖活性与短倍增周期：体外培养时，细胞呈指数级快速增殖，倍增时间仅为 24-30 小时（明显短于肺鳞癌、肺腺癌的 36-48 小时），悬浮培养体系中细胞密度可在 3-4 天内从 1×10⁵ cells/mL 增至 1×10⁶ cells/mL；软琼脂克隆形成实验显示，其克隆形成率达 60% 以上，远高于其他肺癌亚型，体现出较强的自主增殖能力，与临床 SCLC“快速生长、短期内形成大病灶" 的特点高度吻合。其二，显著的神经内分泌功能与相关分子特征：LTEP-sm 细胞具备完整的神经内分泌分泌功能，可合成并分泌多种神经肽类物质（如胃泌素释放肽 GRP、血管活性肠肽 VIP），ELISA 检测显示，培养上清中 CgA 浓度可达 80-120pg/mL（培养 48 小时后），且神经内分泌标志物表达受转录因子网络调控 —— 敲降 ASCL1 后，CgA、Syn 表达量下降 50% 以上，细胞增殖速度减缓，验证了 ASCL1 在 SCLC 神经内分泌特征维持中的核心作用；同时，基因检测显示，细胞携带 SCLC 常见的分子改变，如 TP53 基因突变（发生率 100%）、RB1 基因失活（发生率 90%），且存在 MYC 家族基因扩增（约 30% SCLC 患者携带该改变），这些分子特征与临床 SCLC 的分子谱高度匹配，为研究 SCLC 的发病机制与靶向治疗提供了关键靶点。其三，强侵袭转移能力与药物敏感性特征：Transwell 侵袭实验中，LTEP-sm 细胞 24 小时穿越基质胶的细胞数是肺鳞癌细胞的 3-4 倍，且可通过分泌 MMP-2、MMP-9 降解细胞外基质，为侵袭转移提供条件；划痕愈合实验显示，细胞 24 小时划痕愈合率达 80% 以上，体现出较强的迁移能力；药物敏感性实验显示，细胞对 SCLC 临床常用治疗药物初始敏感，特定治疗药物（10μM）处理 48 小时后细胞凋亡率达 40%-50%，但连续培养 2-3 周后可形成耐药细胞株（凋亡率降至 10% 以下），较好复现临床 SCLC “初始敏感 - 快速耐药" 的治疗困境，为研究药物耐药机制提供了理想实验系统。

在体外培养与维护细节上，LTEP-sm 细胞因生长特性特殊，对培养环境要求较高，需模拟神经内分泌细胞的生长条件以维持其生物学特性。常规使用含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基（添加 2mM 必需营养物质、1mM 丙酮酸钠及 1% 非必需氨基酸，满足细胞高代谢需求，同时补充 5ng/mL 胰岛素，维持神经内分泌功能），培养基 pH 值需精准控制在 7.2-7.4，需添加抗菌试剂预防污染。培养条件为 37℃、5% 二氧化碳恒温培养箱，细胞以悬浮生长为主，部分细胞可贴壁生长（贴壁细胞仍保持悬浮细胞的生物学特性），需使用普通培养瓶（无需包被），接种密度建议为 1×10⁵ cells/mL（密度过低易导致细胞凋亡，过高则出现细胞团聚过度、营养不足）。传代操作需注意：当细胞密度达到 1×10⁶ cells/mL 时，按 1:3-1:4 比例直接加入新鲜培养基稀释传代（悬浮细胞无需消化），若贴壁细胞较多，可轻轻吹打使细胞脱落，避免剧烈操作破坏细胞团簇；长期储存时，选择对数生长期细胞，用含 10% DMSO、20% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基制备冻存液（高浓度血清可提升细胞冻存存活率），细胞密度调整为 5×10⁶ cells/mL，梯度降温（4℃ 30 分钟→-80℃过夜→液氮长期保存），复苏时快速解冻（37℃水浴 1-2 分钟）后立即用预热培养基稀释，24 小时后更换培养基，细胞存活率可达 80% 以上，且复苏后 3-5 代内病理形态、增殖能力及分子特征保持稳定。

在科研与应用领域，LTEP-sm 细胞的价值围绕 SCLC 的亚型特异性研究展开，覆盖发病机制、药物耐药、新型治疗策略研发等关键方向。其一，SCLC 发病机制的分子解析：利用细胞的 TP53、RB1 失活特征，通过 CRISPR/Cas9 技术恢复 TP53 或 RB1 功能，观察细胞增殖、凋亡及侵袭能力的变化，明确 “TP53/RB1 双失活" 在 SCLC 发生中的驱动作用；同时，通过转录组测序筛选 MYC 扩增下游的差异表达基因（如 CCNB1、CDK1），结合蛋白质印迹验证其表达变化，解析 MYC 信号通路调控 SCLC 高增殖活性的分子网络，为理解 SCLC 的恶性生物学行为提供分子依据。其二，SCLC 药物耐药机制与逆转策略研究：通过连续低剂量特定治疗药物诱导 LTEP-sm 细胞，构建耐药细胞株（LTEP-sm/DR），比较亲本细胞与耐药细胞的基因表达差异，发现耐药细胞中 ABC 转运蛋白（如 ABCB1）表达上调、DNA 损伤修复基因（如 BRCA1）活性增强；基于此机制，筛选 ABC 转运蛋白抑制剂（如维拉帕米）或 DNA 损伤修复抑制剂（如奥拉帕利），结果显示联合用药可使耐药细胞的凋亡率从 10% 提升至 35% 以上，为逆转 SCLC 药物耐药提供新策略。其三，SCLC 新型治疗靶点的筛选与验证：针对 SCLC 的神经内分泌特征，检测神经肽受体拮抗剂（如 GRP 受体拮抗剂）对 LTEP-sm 细胞的抑制作用，发现该类药物可下调 ASCL1 表达，使细胞增殖抑制率达 40% 以上；针对 MYC 扩增靶点，筛选 MYC 抑制剂（如 OMomyc），验证其对 MYC 下游信号通路的抑制效果，为 SCLC 的靶向治疗提供新候选药物；同时，利用细胞构建相关治疗模型，检测特定抗体对细胞的杀伤作用，发现联合治疗可提升相关蛋白表达，增强治疗效果，为 SCLC 相关治疗的临床应用提供体外证据。其四，SCLC 诊断标志物的开发与验证：基于 LTEP-sm 细胞的分泌蛋白谱，筛选 SCLC 特异性血清标志物（如 CgA、ProGRP），通过 ELISA 检测细胞培养上清中这些标志物的浓度，结合临床样本验证其诊断敏感性与特异性，结果显示 CgA 联合 ProGRP 诊断 SCLC 的敏感性达 85%、特异性达 90%，为 SCLC 早期诊断（尤其针对吸烟高危人群）、疗效监测及复发预警提供新的分子靶点。

综上，LTEP-sm 人小细胞肺癌细胞凭借其典型的 SCLC 病理形态、显著的神经内分泌特征及 “高增殖 - 强转移 - 易耐药" 的恶性生物学行为，成为小细胞肺癌研究领域的核心工具细胞。其在 SCLC 发病机制解析、药物耐药逆转、新型治疗靶点筛选等方面的应用，不仅填bu了 SCLC 体外研究模型的需求空白，更为推动 SCLC 精准诊疗技术的发展、改善患者极差的预后提供了关键实验支撑，具有重要的科学价值与临床转化意义。