M2-10B4小鼠骨髓纤维原细胞源自小鼠骨髓，具支持造血细胞生长特性，可分泌造血相关因子，常用于造血微环境机制研究及造血功能调控实验。

M2-10B4小鼠骨髓纤维原细胞

M2-10B4小鼠骨髓纤维原细胞是从 C57BL/6 小鼠骨髓组织中分离、纯化并经克隆筛选获得的骨髓基质细胞株，因具有稳定支持造血细胞生长、分泌多种造血调控因子及模拟骨髓微环境的能力，成为研究造血微环境构建、造血干细胞增殖分化调控及血液系统疾病机制的经典体外模型，在血液生物学基础研究与临床转化领域具有不可替代的价值。

从细胞来源与病理背景来看，M2-10B4 细胞的原始细胞取自 C57BL/6 小鼠的股骨与胫骨骨髓腔 —— 骨髓纤维原细胞作为骨髓基质细胞的核心组成部分，是造血微环境的 “支架细胞"，负责为造血细胞提供物理支撑与营养信号。通过密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞后，利用贴壁培养特性筛选出纤维原细胞样细胞，再经有限稀释法克隆纯化，最终获得形态均一、功能稳定的 M2-10B4 细胞株。该细胞株的表型与原代骨髓纤维原细胞高度一致：高表达基质细胞特异性标志物（如 CD90.2、CD105、α-SMA），低表达造血细胞标志物（如 CD45、Ter119），同时保留骨髓基质细胞的核心功能特征，可作为体外重建造血微环境的 “功能单元"。

在核心生物学特性方面，M2-10B4 细胞展现出三大关键功能。其一，强效支持造血细胞生长：体外与造血干细胞（HSC）或造血祖细胞（HPC）共培养时，M2-10B4 细胞可通过直接接触（如细胞间黏附分子 ICAM-1、VCAM-1 介导的相互作用）及分泌可溶性因子，显著促进造血细胞的存活与增殖 —— 集落形成实验显示，共培养体系中造血集落（CFU-GM、BFU-E）形成数量是无基质细胞培养的 2-3 倍，且能维持造血细胞的自我更新能力，这一特性使其成为研究造血微环境对造血干细胞调控的理想模型。其二，广谱分泌造血调控因子：细胞可持续分泌多种关键造血细胞因子与生长因子，包括粒细胞集落刺激因子（G-CSF）、粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）、白细胞介素 - 6（IL-6）、干细胞因子（SCF）及转化生长因子 -β（TGF-β）等，这些因子构成 “细胞因子网络"，分别调控造血细胞的增殖、分化、凋亡及归巢过程，且因子分泌水平可被外界信号调控（如 LPS 刺激可上调 G-CSF、IL-6 表达），为研究造血调控信号通路提供了可控的实验系统。其三，模拟骨髓微环境的物理与化学特征：长期培养时，M2-10B4 细胞可形成多层细胞群落，分泌胶原蛋白、纤连蛋白等细胞外基质（ECM）成分，构建与体内骨髓相似的 “三维微环境结构"，造血细胞可定植于该结构中并维持生理状态下的分化潜能，这一特性使其在体外造血微环境重建及造血相关疾病模型构建中具有独特优势。

在体外培养与维护细节上，M2-10B4 细胞对培养环境要求温和，常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培养基（添加 L - 谷an酰胺与 HEPES 缓冲液，维持细胞代谢稳定），培养基 pH 值维持在 7.2-7.4，需添加抗菌试剂预防污染。培养条件为 37℃、5% 二氧化碳恒温培养箱，细胞呈贴壁生长，形态为典型的梭形或多角形，胞质伸展充分，细胞间可形成网状连接。传代操作需注意：当细胞融合度达 85%-95% 时及时传代（过度融合易导致细胞接触抑制，降低因子分泌能力），采用 0.25% yi酶 - EDTA 消化液 37℃孵育 2-3 分钟，待细胞wan全脱壁后加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液，传代比例为 1:4-1:6（该细胞增殖速度中等，倍增时间约 36-48 小时）。长期储存时，选择对数生长期细胞，用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的胎牛血清制备冻存液，梯度降温（4℃ 30 分钟→-80℃过夜→液氮长期保存），复苏时快速解冻（37℃水浴 1-2 分钟）后立即用培养基稀释，24 小时后更换培养基，细胞存活率可达 90% 以上，且复苏后功能无显著变化。

在科研与应用领域，M2-10B4 细胞的价值广泛覆盖血液生物学研究的多个方向。其一，造血微环境调控机制研究：利用 M2-10B4 细胞与造血干细胞共培养模型，通过基因编辑技术（如 CRISPR/Cas9）敲除或过表达基质细胞中的关键分子（如 SCF、VCAM-1），观察其对造血干细胞自我更新、分化的影响，解析造血微环境调控造血的分子网络 —— 例如，敲除 M2-10B4 细胞中的 SCF 基因后，造血集落形成数量显著减少，证实 SCF 在造血支持中的核心作用。其二，血液系统疾病模型构建：在白血病研究中，将 M2-10B4 细胞与白血病细胞共培养，可模拟白血病细胞在骨髓微环境中的 “庇护所效应"（白血病细胞借助基质细胞支持实现耐药与存活），研究微环境分子（如 TGF-β、IL-6）对白血病细胞增殖、耐药的调控作用；在再生障碍性贫血模型中，可通过辐射或药物处理 M2-10B4 细胞，构建受损骨髓微环境模型，探索微环境损伤对造血功能的影响及修复策略。其三，造血相关药物筛选与评价：针对造血功能障碍疾病（如中性粒细胞减少症、骨髓衰竭），利用 M2-10B4 细胞构建药物筛选模型，检测候选药物（如 G-CSF 激动剂、造血微环境修复剂）对细胞因子分泌、造血支持能力的影响，通过共培养体系评估药物对造血细胞存活与增殖的促进效果，为临床药物研发提供体外数据支持。其四，造血干细胞体外扩增技术开发：基于 M2-10B4 细胞的造血支持能力，可将其作为 “饲养层细胞"，优化造血干细胞体外扩增体系 —— 例如，通过调控 M2-10B4 细胞的因子分泌谱（如过表达 SCF、ANGPTL3），显著提升扩增后造血干细胞的归巢能力与重建造血功能，为造血干细胞移植治疗提供技术支撑。

综上，M2-10B4 小鼠骨髓纤维原细胞凭借其稳定的造血支持功能、可控的因子分泌特性及模拟骨髓微环境的能力，成为血液生物学研究领域的核心工具细胞。无论是解析造血微环境调控机制、构建血液疾病模型，还是开发造血相关药物与技术，该细胞都能提供精准的实验支撑，助力推动血液系统疾病诊疗水平的提升。