M21人黑色素瘤细胞源自人皮肤黑色素瘤组织，具强侵袭转移能力与黑色素合成特性，保留肿瘤恶性表型，常用于黑色素瘤机制研究及抗肿瘤药物筛选。

M21人黑色素瘤细胞

M21人黑色素瘤细胞是从人类皮肤恶性黑色素瘤患者手术切除的肿瘤组织中分离、纯化获得的恶性肿瘤细胞株，因具有显著的侵袭转移能力、稳定的黑色素合成特性及明确的基因突变背景，成为研究皮肤黑色素瘤发病机制、靶向治疗响应及耐药机制的经典体外模型，在黑色素瘤基础研究与临床转化领域具有不可替代的价值。

从细胞来源与病理背景来看，M21 细胞的原始肿瘤组织源自皮肤表浅扩散型黑色素瘤（临床常见亚型），该亚型由黑色素细胞恶性转化而来，具有进展快、易转移的特点。通过组织块培养法结合胶原酶消化处理，从新鲜肿瘤标本中分离获得单细胞悬液，再经多次贴壁筛选去除成纤维细胞等杂细胞，最终获得纯度超 95% 的 M21 细胞株。该细胞株的病理表型与临床黑色素瘤高度契合：高表达黑色素细胞特异性标志物（如 HMB-45、Melan-A、酪an酸酶），同时携带黑色素瘤常见的基因突变 ——BRAF V600E 突变（约 50% 人类黑色素瘤存在该突变），核型分析显示存在染色体 6p 增益、10q 缺失等典型遗传变异，这些特征使其能精准模拟临床黑色素瘤的恶性生物学行为，尤其适用于 BRAF 靶向治疗相关研究。

在核心生物学特性方面，M21 细胞展现出三大关键特征。其一，强侵袭与转移能力：体外实验中，Transwell 侵袭实验显示该细胞能高效穿越 Matrigel 基质胶（模拟体内基底膜），迁移细胞数是低侵袭性黑色素瘤细胞株的 3-4 倍；划痕愈合实验中，24 小时伤口愈合率可达 65% 以上，且侵袭能力受信号通路调控（如 BRAF 抑制剂处理可显著降低侵袭活性），这一特性与临床黑色素瘤易侵犯真皮层、发生淋巴结转移的特点高度一致，为研究侵袭转移机制提供了理想模型。其二，稳定的黑色素合成能力：细胞胞质内富含黑色素颗粒，在常规培养条件下可持续合成黑色素（培养基常呈深褐色），黑色素合成依赖酪an酸酶活性（加入酪an酸酶抑制剂可减少黑色素生成），这一特征不仅便于细胞形态学鉴定，也为研究黑色素代谢与肿瘤恶性程度的关联提供了基础。其三，BRAF 靶向治疗敏感性：因携带 BRAF V600E 突变，M21 细胞对 BRAF 抑制剂（如维莫非尼）高度敏感，药物处理后可快速抑制 MAPK/ERK 信号通路活性，导致细胞增殖停滞于 G1 期，凋亡率显著升高，这一响应与临床 BRAF 突变型黑色素瘤患者对靶向治疗的初期反应高度一致，为研究靶向治liao机制及耐药问题提供了关键模型。

在体外培养与维护细节上，M21 细胞对培养环境的营养需求较高，常规使用含 10% 胎牛血清的 DMEM 培养基（添加丙酮酸与非必需氨基酸，满足黑色素合成与快速增殖需求），培养基 pH 值维持在 7.2-7.4，需添加抗菌试剂预防污染。培养条件为 37℃、5% 二氧化碳恒温培养箱，因细胞贴壁依赖性强，需使用未经特殊包被的普通培养瓶（贴壁能力良好，过度包被易导致细胞过度聚集）。传代操作需注意：当细胞融合度达 75%-85% 时及时传代（过度融合会导致黑色素颗粒大量堆积，影响细胞活性），采用低浓度消化液 37℃孵育 2-3 分钟，待细胞间隙增大、边缘收缩后加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打（避免剧烈操作导致黑色素颗粒释放，影响细胞活性），传代比例为 1:2-1:3。长期储存时，选择对数生长期细胞，用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的胎牛血清制备冻存液，梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮长期保存），复苏时快速解冻（37℃水浴 1-2 分钟）后立即用培养基稀释，24 小时后更换培养基，细胞存活率可达 85% 以上。

在科研与应用领域，M21 细胞的价值主要集中在黑色素瘤恶性机制研究与治疗策略开发。其一，BRAF 靶向治liao机制与耐药研究：利用 M21 细胞构建靶向治疗响应模型，通过蛋白质印迹法检测 BRAF 抑制剂处理后 MAPK/ERK 通路关键蛋白（如 BRAF、MEK、ERK）的磷酸化水平，解析药物抑制肿瘤增殖的分子机制；同时，通过长期低剂量药物诱导构建 M21 耐药细胞株（如 M21/R），研究耐药相关机制（如 MEK 突变、NRAS 激活、上皮 - 间质转化），筛选逆转耐药的候选药物（如 MEK 抑制剂、联合靶向药物）。其二，侵袭转移机制研究：结合转录组测序与基因编辑技术，筛选 M21 细胞中高表达的转移相关基因（如 SNAI2、MMP-2、CXCR4），验证其对细胞侵袭、迁移能力的调控作用；通过裸鼠尾静脉注射模型，观察干预靶点后肺转移灶形成的变化，明确关键分子在体内转移过程中的作用，为开发抗转移治疗策略提供依据。其三，抗肿瘤药物筛选：针对黑色素瘤不同治疗方向，利用 M21 细胞构建多类型药物筛选模型 —— 靶向治疗药物（如 BRAF/MEK 抑制剂）、免疫调控药物（如免疫检查点抑制剂相关通路调节剂）、抗转移药物（如 MMP 抑制剂），通过检测药物对细胞增殖、凋亡、侵袭的影响，初步评估药物活性，再结合体内荷瘤模型验证药效，为临床药物研发提供数据支持。其四，肿瘤微环境研究：将 M21 细胞与皮肤成纤维细胞、肿瘤相关巨噬细胞共培养，模拟皮肤黑色素瘤的局部微环境，研究微环境细胞分泌的细胞因子（如 IL-1β、TGF-β）对肿瘤细胞侵袭能力、靶向治疗敏感性的影响，探索靶向微环境与靶向治疗联合的协同效应，为制定联合治疗方案提供理论基础。

综上，M21 人黑色素瘤细胞凭借其贴近临床的病理特征、BRAF 突变背景及稳定的生物学特性，成为黑色素瘤研究领域的核心工具细胞。无论是解析靶向治liao机制、探索耐药难题，还是筛选新型抗肿瘤药物，该细胞都能提供精准的实验支撑，助力推动黑色素瘤诊疗水平的提升。