M5076小鼠卵巢网织细胞肉瘤细胞源自 C57BL/6 小鼠卵巢肉瘤，具高转移潜能，保留肉瘤病理特征，常用于肉瘤转移机制研究及抗肿瘤药物筛选。

M5076小鼠卵巢网织细胞肉瘤细胞

M5076小鼠卵巢网织细胞肉瘤细胞是从 C57BL/6 小鼠自发卵巢网织细胞肉瘤中分离、纯化获得的恶性肿瘤细胞株，因具有明确的组织起源、高度侵袭性及广泛的转移潜能，成为研究肉瘤发生发展机制、转移调控及抗肿瘤药物筛选的经典动物细胞模型，在肉瘤基础研究与临床转化领域具有重要应用价值。

从细胞来源与病理背景来看，M5076 细胞的原始肿瘤组织源自近交系 C57BL/6 小鼠的卵巢网织组织 —— 卵巢网织细胞属于淋巴造血系统相关细胞，该部位发生的肉瘤具有恶性程度高、进展迅速的特点，与人类部分软组织肉瘤的病理进程有相似之处。通过外科获取肿瘤组织后，采用机械研磨结合胶原酶消化法处理，获得单细胞悬液，再经多次贴壁培养与密度梯度离心筛选，去除成纤维细胞、红细胞等杂细胞，最终获得纯度超 90% 的 M5076 细胞株。该细胞株的病理表型与原始肉瘤高度一致：高表达网织细胞肉瘤相关标志物（如 CD45、Ly-5），同时表达转移相关蛋白（如基质金属蛋白酶 MMP-13、血管内皮生长因子 VEGF），核型分析显示存在染色体数目异常（多为近二倍体，染色体数目波动于 38-42 条），这些特征使其能精准模拟卵巢网织细胞肉瘤的恶性生物学行为。

在核心生物学特性方面，M5076 细胞展现出三大关键特征。其一，广泛的转移潜能：与其他肉瘤细胞株相比，M5076 细胞具有独特的多器官转移特性 —— 通过小鼠腹腔接种或尾静脉注射，细胞可快速转移至肝脏、脾脏、肺脏及淋巴结，其中肝转移率高达 90% 以上，脾转移率达 70%，形成与临床晚期肉瘤相似的多灶性转移灶；且转移过程中会特异性表达器官靶向黏附分子（如肝转移时高表达整合素 α5β1），为研究肉瘤多器官转移机制提供了理想模型。其二，强增殖与侵袭能力：体外培养时，细胞倍增时间短（约 20-24 小时），呈贴壁生长，形态以梭形为主，胞质突起明显；Transwell 侵袭实验显示，其穿越基质胶的细胞数是低侵袭性肉瘤细胞的 4-6 倍，划痕愈合实验中 24 小时伤口愈合率超 80%，且侵袭能力受细胞因子调控（如 TNF-α 处理可进一步增强侵袭活性）。其三，免疫原性特征：作为小鼠来源的肿瘤细胞，M5076 细胞保留一定免疫原性，可被小鼠免疫系统识别，在构建荷瘤小鼠模型时，能模拟体内肿瘤与免疫系统的相互作用，适用于肿瘤免疫相关机制研究。

在体外培养与维护细节上，M5076 细胞对培养环境要求适中，常规使用含 10% 胎牛血清的 RPMI 1640 培养基，添加非必需氨基酸（满足快速增殖的营养需求），培养基 pH 值维持在 7.2-7.4，需添加抗菌试剂预防污染。培养条件为 37℃、5% 二氧化碳恒温培养箱，因细胞贴壁能力中等，无需特殊包被培养瓶，但需避免频繁晃动培养瓶导致细胞脱落。传代操作需注意：当细胞融合度达 70%-80% 时及时传代（过度融合易导致细胞堆积死亡），采用低浓度消化液 37℃孵育 1-2 分钟，待细胞边缘收缩后加入含血清培养基终止消化，轻柔吹打形成单细胞悬液，传代比例为 1:3-1:4。长期储存时，选择对数生长期细胞，用含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的胎牛血清制备冻存液，梯度降温（4℃ 30 分钟→-80℃过夜→液氮长期保存），复苏时快速解冻后立即用培养基稀释，24 小时更换培养基，细胞存活率可达 80% 以上。

在科研与应用领域，M5076 细胞的价值主要集中在肉瘤恶性机制研究与治疗策略开发。其一，转移机制研究：利用该细胞多器官转移特性，通过转录组学筛选转移相关差异基因（如 S100A4、Twist），结合基因编辑技术验证其对肝、脾转移的调控作用；同时，构建原位移植模型（卵巢原位接种），观察肿瘤从原发灶向远处器官转移的动态过程，解析转移起始、定植的关键分子事件。其二，抗肿瘤药物筛选：针对肉瘤治疗耐药问题，利用 M5076 细胞构建药物敏感性模型，检测新型靶向药物（如 VEGF 抑制剂、MMP 抑制剂）对细胞增殖、转移的抑制效果；通过体内荷瘤模型验证药物对原发灶生长及转移灶形成的影响，为临床药物选择提供数据支持。其三，肿瘤免疫机制研究：借助细胞的免疫原性特征，构建免疫调控分子（如 PD-1/PD-L1 通路相关分子）评价模型，检测调控分子对肿瘤微环境中免疫细胞（如 CD8+T 细胞、巨噬细胞）的影响，观察肿瘤生长变化，为肉瘤免疫相关研究提供实验基础。其四，肿瘤微环境研究：将 M5076 细胞与肝窦内皮细胞、脾巨噬细胞共培养，模拟转移靶器官的微环境，研究微环境细胞分泌的细胞因子（如 IL-6、TGF-β）对肿瘤细胞转移能力的影响，探索靶向微环境的联合治疗策略。

综上，M5076 小鼠卵巢网织细胞肉瘤细胞凭借其广泛的转移潜能、稳定的生物学特性及贴近临床的病理表型，成为肉瘤研究领域的重要工具细胞。无论是解析肉瘤多器官转移机制，还是开发新型抗肿瘤药物与免疫相关研究方案，该细胞都能提供精准的实验支撑，助力推动肉瘤诊疗水平的提升。