A375人恶性黑色素瘤瘤株

A375人恶性黑色素瘤瘤株是皮肤恶性肿瘤研究领域的核心生物材料，源于人类恶性黑色素瘤组织，经体外分离培养建立而成。该瘤株既保留了原发肿瘤的黑色素细胞特性及恶性侵袭表型，又具备稳定传代能力，成为探究黑色素瘤发病机制、药物筛选及免yi治疗研发的关键工具，为皮肤癌基础研究与临床转化搭建起重要桥梁，在黑色素瘤研究中应用极为广泛。

该瘤株于1974年从一名54岁女性黑色素瘤患者的皮肤转移灶中分离建立，其组织学渊源赋予了典型的恶性黑色素瘤生物学特征。形态学上，瘤株细胞呈梭形或多边形，细胞边界模糊不清，胞质丰富且内含有细小的黑色素颗粒，部分细胞因黑色素合成能力存在差异而呈透亮状；细胞核大且形态不规则，染色质分布不均，核仁清晰可见，核分裂象频繁出现，充分凸显其强大的恶性增殖潜能。免疫表型方面，A375瘤株高表达S-100蛋白、HMB-45及Melan-A等黑色素瘤特异性标志物，同时表达表皮生长因子受体，这些特征为瘤株的鉴定、分型及靶向研究提供了重要依据。

A375瘤株在体外培养时以贴壁生长为主，部分细胞可呈现半悬浮状态，增殖能力旺盛，倍增时间约为24-30小时，短期内即可实现大量扩增以满足实验需求。常规培养体系采用含10%胎牛血清的DMEM培养基，培养环境需严格维持在37℃、5%二氧化碳的恒温恒湿条件下，培养基pH值控制在7.2-7.4范围内zui为适宜。传代操作时，需待瘤株细胞融合度达到80%-90%，采用0.25%酶解液进行消化，消化时间控制在2-3分钟，待细胞形态变圆、细胞间隙增大后立即终止消化，经离心重悬后接种至新的培养容器中，避免过度消化损伤细胞活性，影响瘤株稳定性。

在科研应用中，A375瘤株的价值贯穿黑色素瘤研究的多个核心维度。发病机制研究中，科研人员通过该瘤株证实，BRAF基因突变（尤其是V600E热点突变）、MITF基因异常调控及MAPK信号通路持续激活，是黑色素瘤发生发展的关键分子驱动因素，为揭示疾病病理机制提供了重要线索。药物研发领域，因其明确的BRAF突变特性，A375瘤株常作为BRAF抑制剂、MEK抑制剂等靶向药物的核心筛选模型，通过检测瘤株细胞增殖抑制率、凋亡率及信号通路蛋白磷酸化水平，为药物活性评估及剂量优化提供精准的量化数据。此外，该瘤株还可用于构建裸鼠皮下移植瘤或肺转移模型，模拟黑色素瘤在体内的生长、浸润及转移过程，为评估药物体内疗效、探究肿瘤免疫逃逸机制提供可靠的动物实验平台。

使用A375瘤株开展实验时，标准化操作是保障研究结果可靠的关键。培养过程中需定期对瘤株进行支原体污染检测及黑色素合成能力评估，每1-2天更换一次新鲜培养基，为瘤株生长提供良好的营养环境；瘤株传代次数建议控制在50代以内，超过后需重新鉴定细胞标志物表达、基因突变状态及增殖特性，避免瘤株出现表型漂移。需特别注意的是，A375瘤株仅代表BRAF突变型黑色素瘤，临床黑色素瘤还存在NRAS突变型、野生型等多种亚型，因此研究结果需结合其他亚型瘤株及临床样本数据进行综合分析，以提升结论的临床普适性。作为经典的黑色素瘤研究瘤株，A375将持续为黑色素瘤精准医疗的发展提供坚实支撑。