A-375人恶性黑色素瘤细胞

A-375人恶性黑色素瘤细胞是皮肤恶性肿瘤研究的经典细胞模型，源于人类恶性黑色素瘤组织，因保留了黑色素细胞的生物学特性及恶性肿瘤的侵袭表型，成为探究恶性黑色素瘤发病机制、药物筛选及免yi治疗研发的核心工具，为皮肤癌基础研究与临床转化搭建了关键桥梁，在黑色素瘤研究领域应用广泛。

该细胞系于1974年从一名54岁女性恶性黑色素瘤患者的皮肤转移灶中分离建立，组织学来源赋予其典型的黑色素瘤细胞特征。形态学上，A-375细胞呈梭形或多边形，细胞边界不清，胞质丰富且内含细小的黑色素颗粒，部分细胞因黑色素合成能力差异而呈透亮状；细胞核大而不规则，核染色质分布不均，核仁明显，核分裂象多见，凸显其强恶性增殖潜能。免疫表型方面，A-375细胞高表达黑色素瘤特异性标志物，如S-100蛋白、HMB-45及Melan-A，同时表达表皮生长因子受体，为细胞鉴定及靶向研究提供重要依据。

A-375细胞在体外培养时以贴壁生长为主，部分细胞可呈半悬浮状态，增殖能力旺盛，倍增时间约为24-30小时，短期内可实现大量扩增。常规培养体系采用含10%胎牛血清的DMEM培养基，培养环境需维持在37℃、5%二氧化碳的恒温恒湿条件下，pH值控制在7.2-7.4为宜。传代操作时，待细胞融合度达80%-90%，用0.25%酶解液消化2-3分钟，待细胞形态变圆、间隙增大后终止消化，离心重悬后接种至新培养瓶，避免过度消化影响细胞活性。

在科研应用中，A-375细胞的价值贯穿黑色素瘤研究的多个维度。发病机制研究中，通过该模型证实，BRAF基因突变（尤其是V600E位点突变）、MITF基因异常调控及MAPK信号通路持续激活，是黑色素瘤发生发展的关键分子驱动因素。药物研发领域，因其BRAF突变特性，常作为BRAF抑制剂、MEK抑制剂等靶向药物的筛选模型，通过检测细胞增殖抑制率、凋亡率及信号通路蛋白磷酸化水平，为药物活性评估提供量化数据。此外，A-375细胞还可用于构建裸鼠皮下移植瘤或肺转移模型，模拟黑色素瘤体内生长及转移过程，为评估药物体内疗效、探究肿瘤免疫逃逸机制提供可靠的动物实验平台。

使用A-375细胞开展实验时，标准化操作是保障结果可靠的关键。培养过程中需定期检测支原体污染及细胞黑色素合成能力，每1-2天更换一次培养基，维持细胞良好生长环境；传代次数建议控制在50代以内，超过后需重新鉴定细胞标志物表达及基因突变状态，避免细胞表型漂移。需注意，该细胞仅代表BRAF突变型黑色素瘤，研究结果需结合NRAS突变型、野生型等其他亚型细胞及临床样本分析，提升结论普适性。作为经典模型，A-375细胞将持续为黑色素瘤精准医疗发展提供坚实支撑。