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更新时间:2025-11-27
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A7R5大鼠胸大动脉平滑肌细胞是源于Sprague-Dawley大鼠胸主动脉中膜的永生化细胞系,因精准保留了血管平滑肌细胞的收缩功能与表型特征,成为研究血管生理、病理机制及心血管药物研发的标准化工具,在高血压、动脉粥样硬化等心血管疾病研究领域占据重要地位,为基础研究与临床转化提供关键支撑。
生物学特性上,A7R5细胞呈现典型的血管平滑肌细胞形态,显微镜下呈长梭形或纺锤形,胞质丰富均匀,细胞核呈椭圆形位于细胞zhong央,排列呈“峰-谷"样生长特征,以紧密贴壁方式生长,群体倍增时间约为48-72小时。该细胞系核心优势在于兼具收缩表型稳定性与增殖活性,传代至60代后仍维持正常核型(大鼠二倍体核型,染色体数目42条),且在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、去甲shen上腺素等刺激下可发生明显收缩反应,wan美模拟体内血管平滑肌的生理功能。
标准化培养是维持细胞功能的关键。A7R5细胞适宜在含10%胎牛血清的DMEM高糖培养基中生长,添加1%广谱抗菌双抗预防污染,培养环境需严格控制为37℃、5%二氧化碳及饱和湿度的恒温培养箱。传代时采用0.25%胰dan白酶-EDTA消化液温和处理,因细胞间连接紧密,需消化3-5分钟至细胞间隙增大、形态变圆,传代比例以1:2至1:3为宜,避免过度消化破坏细胞收缩相关结构。
冻存与复苏操作需兼顾细胞活性与功能完整性。冻存液采用含10%二甲基亚砜(DMSO)、20%胎牛血清的DMEM培养基配制,细胞密度调整为3×10⁶-6×10⁶个/mL后,经4℃预冷30分钟、-20℃冷冻1.5小时、-80℃过夜的梯度降温流程,最终转入液氮长期保存。复苏时快速置于37℃水浴震荡解冻,离心后用含双倍血清的培养基重悬,24小时后更换为常规培养基,细胞存活率可达85%以上,且收缩功能不受影响。
A7R5细胞的鉴定需结合形态学、分子标志物及功能特征综合判断。分子层面,高表达血管平滑肌特异性标志物如α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、平滑肌肌球蛋白重链(SM-MHC)及钙调蛋白(Calponin),低表达成纤维细胞标志物波形蛋白;功能层面,通过血管收缩实验可检测其对血管活性物质的反应性,钙成像技术可分析细胞内钙浓度变化,为细胞功能验证提供直接依据。
研究应用中,A7R5细胞的价值贯穿心血管研究全链条。基础研究中,常用于解析血管平滑肌收缩机制,如探索L型钙通道、肌浆网钙释放对细胞收缩的调控作用,以及AngⅡ介导的细胞增殖信号通路;心血管疾病研究中,作为高血压、动脉粥样硬化模型,模拟血管平滑肌细胞异常增殖与表型转化过程;药物研发领域,用于筛选血管扩张剂、抗增殖药物,评估药物对血管平滑肌收缩功能的影响;此外,还可构建血管体外三维模型,为血管组织工程研究提供种子细胞。
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