A875人黑色素瘤细胞

A875人黑色素瘤细胞是源于人类皮肤黑色素瘤患者的永生化细胞系，因保留了黑色素瘤的典型生物学特征及黑色素合成能力，成为解析黑色素瘤发病机制、筛选靶向药物及研究黑色素代谢的核心实验材料，在皮肤肿瘤研究领域应用广泛，为基础研究与临床转化搭建了重要桥梁。

生物学特性上，A875细胞呈现典型的黑色素瘤细胞形态，显微镜下呈多角形或梭形，胞质内可见棕黑色黑色素颗粒，细胞核大而深染，核仁明显，以贴壁方式生长，生长活性旺盛，群体倍增时间约为24-36小时。该细胞系具有较强的体外增殖与侵袭能力，传代至50代后仍能维持稳定核型（染色体数目58-62条）及恶性表型，且可在体外持续合成黑色素，其合成量受α-黑素细胞刺激素（α-MSH）等信号分子调控，模拟体内黑色素瘤的生理与病理特征。

标准化培养是维持细胞特性的关键。A875细胞适宜在含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基中生长，添加1%广谱抗菌双抗预防污染，培养环境需严格控制为37℃、5%二氧化碳及饱和湿度的恒温培养箱。传代时采用0.25%胰dan白酶-EDTA消化液处理，因细胞贴壁较紧密，消化时间需控制在2-3分钟，待细胞间隙增大、形态变圆时立即终止，传代比例以1:3至1:4为宜，避免细胞密度过高导致黑色素堆积影响活性。

冻存与复苏操作需兼顾细胞活性与黑色素稳定性。冻存液采用含10%二甲基亚砜（DMSO）、20%胎牛血清的RPMI-1640培养基配制，细胞密度调整为1×10⁶-3×10⁶个/mL后，经4℃预冷30分钟、-20℃冷冻1小时、-80℃过夜的梯度降温流程，最终转入液氮长期保存。复苏时快速置于37℃水浴震荡解冻，离心后用新鲜培养基重悬，24小时后更换培养基去除死亡细胞，细胞存活率可稳定在80%以上，且黑色素合成功能不受影响。

A875细胞的鉴定需结合形态学、分子标志物及功能特征综合判断。分子层面，高表达黑色素瘤特异性标志物如S-100蛋白、HMB-45抗原及黑色素细胞分化相关基因MITF，同时存在BRAF基因突变（常见V600E位点突变），这与其恶性增殖特性密切相关；功能层面，通过黑色素定量检测可评估其色素合成能力，Transwell实验可验证其侵袭活性，为细胞属性确认提供直接依据。

研究应用中，A875细胞的价值贯穿黑色素瘤研究全链条。基础研究中，常用于解析黑色素合成机制，如探索MITF调控酪an酸酶活性的分子通路，以及BRAF突变对细胞增殖的驱动作用；靶向治疗研究中，作为BRAF抑制剂（如维莫非尼）的药效评价模型，筛选针对黑色素瘤的新型靶向药物；免yi治疗研究中，用于评估PD-1/PD-L1抑制剂对肿瘤细胞的杀伤效果，探索免疫联合治疗方案；此外，该细胞系可构建裸鼠移植瘤模型，模拟临床黑色素瘤的生长与转移过程，为临床治疗方案优化提供实验支撑。