ARPE-19人视网膜色素上皮细胞

ARPE-19人视网膜色素上皮细胞源自人胎儿视网膜色素上皮组织，经体外分离培养建立稳定细胞系。以保留完整的视网膜色素上皮（RPE）细胞生理功能、稳定的增殖特性及良好的分化潜能，成为黄斑变性、视网膜脱离等眼底疾病研究的核心工具，为眼科学基础研究与临床转化提供了可靠的体外平台。

该细胞系的核心优势是高度模拟体内RPE细胞的生理表型，与原代RPE细胞相比，不仅增殖能力更强，还能稳定表达RPE细胞特异性标志物如RPE65、CRALBP及紧密连接蛋白ZO-1。其保留的关键生理功能包括光感受器外节吞噬、维sheng素A代谢及血-视网膜屏障构建，这些特性使其成为研究RPE细胞功能异常相关眼底疾病的精准模型。

ARPE-19细胞呈现典型的RPE细胞生物学特性。形态学上呈多边形或鹅卵石样，贴壁生长时排列紧密规则，形成单层上皮样结构，胞质内富含黑色素颗粒，细胞核圆形居中、核仁清晰，细胞间通过紧密连接形成屏障结构。增殖活性稳定，标准培养条件下种群倍增时间约48-72小时，传代50代内可保持RPE细胞特异性表型，诱导分化后可形成更接近体内状态的极化单层，具备更强的吞噬功能。

体外培养的关键是维持其生理功能与极性结构。适宜的培养环境为37℃、5%CO₂的恒温培养箱，基础培养基推荐使用含10%胎牛血清的DMEM/F12混合培养基，添加1%非必需氨基酸以强化细胞分化能力。传代需在细胞融合度达到90%时进行，采用温和消化液处理3-5分钟，避免破坏细胞间连接结构，吹打时动作轻柔防止细胞形态损伤。冻存时使用含10%二甲基亚砜、20%胎牛血清的培养基作为保护剂，细胞浓度2×10⁶个/ml，梯度降温后液氮保存，复苏存活率可达85%以上。

科研应用中，ARPE-19细胞的价值聚焦眼底疾病研究领域。年龄相关性黄斑变性（AMD）研究方面，其可用于模拟RPE细胞氧化应激损伤模型，通过过氧化氢或蓝光诱导，观察细胞凋亡、吞噬功能下降及炎症因子释放等病理变化，解析AMD的发病机制。视网膜屏障功能研究中，利用其形成极化单层的特性，构建体外血-视网膜屏障模型，评估药物的视网膜穿透能力及屏障损伤修复效果。

药物研发领域，是眼底疾病治疗药物筛选的核心工具，可通过检测药物对RPE细胞存活、吞噬功能及炎症反应的调控作用，评估药物的治疗活性。细胞治疗研究中，其作为RPE细胞替代治疗的种子细胞来源，用于优化细胞培养与分化方案，为AMD等疾病的细胞治疗提供实验支撑。此外，该细胞系还用于视网膜毒性评价，检测药物或纳米材料对RPE细胞的潜在损伤，为眼用制剂的安全性评估提供依据。

培养需特别注意：细胞的极性与功能依赖特定培养条件，血清浓度过高或培养皿包被不当可能导致细胞分化异常；长期培养应定期通过免疫荧光染色检测RPE65、ZO-1等标志物，验证细胞表型稳定性；建议使用30代以内细胞进行实验，避免传代过久导致吞噬功能衰减；进行STR分型鉴定与支原体检测，及时更换培养基维持细胞营养供应，避免代谢废物积累影响细胞活性。