AtT-20 [AtT20]小鼠垂体瘤细胞

AtT-20 [AtT20]小鼠垂体瘤细胞是源自小鼠垂体前叶的经典内分泌肿瘤模型，经化学诱导构建并体外建系。以稳定的促肾上腺皮质激素（ACTH）分泌功能、典型神经内分泌表型及明确遗传背景，成为垂体瘤机制研究与靶向治疗开发的核心工具，为内分泌肿瘤研究提供专属体外平台。

该细胞系源自近交系小鼠，通过致癌剂诱导垂体前叶ACTH分泌细胞恶变获得，核心特征是持续高分泌ACTH，水平达100-300pg/10⁶细胞/24小时。这种特性使其成为库欣病等ACTH依赖性疾病的精准模型，可模拟体内垂体瘤引发的激素紊乱病理状态，为相关疾病研究提供可靠支撑。

AtT-20细胞呈典型神经内分泌肿瘤特征：形态为圆形或短梭形，贴壁生长为主，胞质含嗜碱性分泌颗粒，细胞核圆、核仁清晰。增殖稳定，倍增时间48-72小时，传代40代内ACTH分泌能力稳定。分子层面高表达POMC基因（ACTH前体编码基因）及嗜铬粒蛋白A，与临床垂体促肾上腺皮质激素腺瘤表型高度契合。

体外培养关键是维持激素分泌功能，适宜环境为37℃、5%CO₂恒温培养箱，推荐含15%胎牛血清的DMEM/F12培养基，添加1%ITS复合物强化内分泌功能。传代需在融合度70%-80%时进行，温和消化2-3分钟，避免破坏分泌颗粒。冻存用含10%二甲基亚砜的保护剂，细胞浓度2×10⁶个/ml，梯度降温后液氮保存，复苏存活率超85%。

科研应用中，其价值聚焦内分泌肿瘤领域。激素调控研究中，通过检测ACTH分泌及POMC表达，解析下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）调控作用，明确糖皮质激素负反馈异常机制。发病机制研究则聚焦POMC基因扩增、突变及表观修饰在垂体瘤发生中的作用。

药物研发中，是垂体瘤靶向药筛选的专属模型，可评估药物对ACTH分泌及细胞增殖的抑制效果。体内实验中，接种于免疫缺陷小鼠可构建激素活性垂体瘤模型，用于评估药物体内疗效及对HPA轴的调节作用。同时，其高表达分泌蛋白为垂体瘤诊断标志物研发提供潜在靶点。

培养注意事项：激素分泌受环境影响大，血清更换前需预实验；定期用ELISA检测上清ACTH浓度验证功能；建议使用25代以内细胞避免分泌功能衰减；定期进行STR鉴定与支原体检测，及时更换培养基清除代谢废物。