ATT-20小鼠垂体瘤细胞

ATT-20小鼠垂体瘤细胞是源自小鼠垂体前叶的内分泌肿瘤细胞模型，经化学诱导法构建并体外建系。以稳定的促肾上腺皮质激素（ACTH）分泌功能、典型的神经内分泌肿瘤表型及明确的遗传背景，成为垂体瘤发病机制、激素调控及靶向治疗研究的核心工具，为内分泌肿瘤基础研究与临床转化提供了专属体外平台。

该细胞系源自近交系小鼠，通过致癌剂诱导垂体前叶促肾上腺皮质激素细胞恶变获得，保留了源细胞的核心内分泌功能。其zui显著特征是持续高表达并分泌ACTH，分泌水平可达100-300pg/10⁶细胞/24小时，这种激素分泌特性使其成为研究库欣病等ACTH依赖性疾病的精准模型，可模拟体内垂体瘤导致的激素紊乱病理状态。

ATT-20细胞的生物学特性呈现典型神经内分泌肿瘤特征。形态上呈圆形或短梭形，贴壁生长为主，部分细胞呈悬浮聚集状态，胞质内可见嗜碱性分泌颗粒，细胞核圆形或椭圆形、核仁清晰，染色质分布均匀。增殖活性稳定，标准培养条件下种群倍增时间约48-72小时，传代40代内ACTH分泌能力无明显衰减。其分子特征为高表达POMC基因（ACTH前体蛋白编码基因）及神经内分泌标志物嗜铬粒蛋白A，与临床垂体促肾上腺皮质激素腺瘤表型高度契合。

体外培养的关键是维持激素分泌功能。适宜环境为37℃、5%CO₂恒温培养箱，推荐使用含15%胎牛血清的DMEM/F12混合培养基，添加1%ITS（胰岛素-转铁蛋白-硒）复合物以强化内分泌功能维持。传代需在细胞融合度70%-80%时进行，采用温和消化液处理2-3分钟，避免过度消化破坏细胞分泌颗粒，吹打时动作轻柔防止细胞聚集。冻存采用含10%二甲基亚砜、20%胎牛血清的培养基作为保护剂，细胞浓度2×10⁶个/ml，梯度降温后液氮保存，复苏存活率可达85%以上。

科研应用中，ATT-20细胞的价值聚焦于内分泌肿瘤研究领域。激素调控机制研究方面，可通过检测ACTH分泌量及POMC基因表达，解析下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）对垂体瘤细胞的调控作用，明确糖皮质激素负反馈调节异常的分子机制。发病机制研究中，用于探索POMC基因扩增、突变及表观遗传修饰在垂体瘤发生中的作用。

药物研发领域，是垂体瘤靶向药物筛选的专属模型，可通过检测药物对ACTH分泌及细胞增殖的抑制作用，评估针对POMC通路、神经内分泌信号通路药物的活性。体内实验中，将其接种于免疫缺陷小鼠皮下或垂体原位，可构建激素活性垂体瘤模型，用于评估药物的体内治疗效果及对HPA轴的调节作用。此外，该细胞系还用于垂体瘤诊断标志物研发，其高表达的分泌蛋白可为临床检测提供潜在靶点。

培养需特别注意：细胞激素分泌能力受培养环境影响显著，血清批次更换前需进行预实验验证；长期培养应定期通过放射免疫法或ELISA检测上清液ACTH浓度，确保细胞功能稳定；建议使用25代以内细胞进行实验，避免传代过久导致分泌功能衰减；进行STR分型鉴定与支原体检测，及时更换培养基清除代谢废物，维持细胞良好分泌状态。